病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作相關性分析＊

范如艷 范楚平 潘俊秀 陳禮娟 肖志兵 劉 嬋

南華大學附屬郴州市第一人民醫(yī)院 郴州市兒童哮喘防治技術研發(fā)中心，湖南省郴州市 423000

哮喘是當今世界最常見的慢性疾病之一，是由多種炎癥細胞參與的氣道可逆性慢性炎癥，易感者對各種激發(fā)因子具有氣道高反應性，引起氣道縮窄。表現(xiàn)為反復發(fā)作的喘息、呼吸困難、胸悶或咳嗽等癥狀。呼吸道病毒感染是誘發(fā)哮喘急性發(fā)作的最重要因素，病毒感染誘發(fā)哮喘急性發(fā)作的機制主要有：產(chǎn)生氣道炎性因子；產(chǎn)生特異性IgE，形成Ⅰ型變態(tài)反應；損傷氣道上皮，引起氣道高反應。本研究應用直接免疫熒光法（DIF）對哮喘急性發(fā)作患兒鼻咽分泌物進行7種病毒抗原檢測分析，探討病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作相關性。

1 對象與方法

1.1 對象 實驗組為2013－2014年本院住院兒童哮喘急性發(fā)作患兒，共367例，常規(guī)進行呼吸道病毒檢測，男194例，女173例。年齡0～5歲，平均年齡（3.83±1.15）歲，其中＜6個月117例，～1歲102例，～3歲85例，～5歲63例。病程2～28個月，中位病程7個月。對照組為2013－2014年本院門診隨診兒童哮喘緩解期患兒，共403例，常規(guī)進行呼吸道病毒檢測，男205例，女198例。年齡在0～5歲，平均年齡（3.33±1.25）歲，其中＜6個月143例，～1歲134例，～3歲75例，～5歲51例。病程2～26個月，中位病程5個月。診斷依據(jù)中華醫(yī)學會兒科分會呼吸學組頒布的標準[1，2］。兩組在年齡構(gòu)成、性別以及病程之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標本采集：患兒入院當天或隨診當天由醫(yī)務人員用鼻拭子從患兒鼻咽部轉(zhuǎn)動數(shù)次取樣，然后保存于6～8ml PBS的離心管充分混合，立即送檢。

1.2.2 病毒病原學分析：樣本懸液于2 500r／min離心5min，收集細胞做細胞涂片，應用直接免疫熒光法檢測呼吸道7種常見病毒：RSV、ADV、IFA、IFB、PIVⅠ、PIVⅡ、PIVⅢ。

1.2.3 試劑與儀器：試劑盒為美國DHI公司生產(chǎn)，采用日本Olympus cx21型熒光顯微鏡。

2 結(jié)果

2.1 兩組病毒檢出率比較 （表1）哮喘急性發(fā)作組（實驗組）病毒檢出率明顯高于哮喘緩解期組（對照組）（P＜0.01），以RSV檢出率最高，提示病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作有密切相關性，RSV感染是引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒。

2.2 不同年齡兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況 （表2）不同年齡兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況提示6個月以下年齡組陽性率最高，為67.5%，其中RSV陽性率高達48.7%，提示病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作有密切相關性，RSV是引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒。

表1 兩組病毒檢出陽性率比較〔n（%）〕

2.3 不同月份兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測情況（表3）不同月份兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況提示RSV是引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒，RSV感染季節(jié)性較明顯，主要集中在冬春季節(jié)（10月至次年4月）。

表2 不同年齡兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況（n）

表3 不同月份兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況（n）

3 討論

哮喘是常見的慢性疾病之一，全世界大約有3億哮喘患者。哮喘患病率在不同人群介于1%～3%，并且在大多數(shù)國家仍在上升，尤其在年幼兒童。2002年我國兒童哮喘流行病學調(diào)查顯示患病率為0.5%～3%，個別地區(qū)則高達5%，哮喘已成為嚴重的公眾衛(wèi)生問題，從而引起世界各國的極大關注[3］。支氣管哮喘是由嗜酸性粒細胞、肥大細胞和T淋巴細胞等多種炎癥細胞參與的氣道可逆性慢性炎癥，這種氣道炎癥使易感者對各種激發(fā)因子具有氣道高反應性，并可引起氣道平滑肌痙攣、黏膜腫脹、分泌增加。表現(xiàn)為反復發(fā)作的喘息、呼吸困難、胸悶或咳嗽等癥狀。常在夜間或清晨發(fā)作、加劇，常常出現(xiàn)廣泛多變的可逆性氣流受限，使患者肺功能不同程度下降[4～7］。呼吸道病毒感染是誘發(fā)哮喘的最重要因素，年齡越小相關性越大，嬰幼兒高達90%的哮喘發(fā)作與呼吸道病毒感染有關。引起兒童呼吸道感染的病毒種類主要有呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒等，這些病毒感染與哮喘發(fā)病密切相關。病毒感染誘發(fā)哮喘的機制主要有：產(chǎn)生氣道炎性因子；產(chǎn)生特異性IgE，形成Ⅰ型變態(tài)反應；損傷氣道上皮，引起氣道高反應。Johnson等[8］研究表明RSV感染患兒呼吸道上皮細胞和炎性細胞浸潤，混合纖維素、痰液，且存在黏膜腫脹，從而導致呼吸道明顯阻塞，易導致喘息。

病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作有密切相關性，RSV是引起兒童哮喘急性發(fā)作的主要病毒，與患兒年齡、季節(jié)、地區(qū)差異、氣候有一定關系。田曼等[9］報告南京地區(qū)哮喘病毒檢出率43.5%，RSV感染是兒童哮喘急性發(fā)作的主要病毒，1月和2月為感染高峰時間，嬰幼兒最常見。劉春艷等[10］報告北京地區(qū)兒童RSV感染平均年齡為4個月。趙明波等[11］報告昆明地區(qū)兒童RSV感染發(fā)病年齡1歲以下占57.05%，10～12個月為感染高峰月齡。Lee等[12］報告臺灣地區(qū)兒童RSV感染高峰為春季和秋季。提示兒童RSV感染狀況與地區(qū)差異及各地氣候不同影響到RSV的繁殖有關。

本研究顯示哮喘急性發(fā)作期病毒檢出率明顯高于哮喘緩解期，以合胞病毒檢出率最高，提示病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作有密切相關性，RSV是引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒。不同年齡兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況提示6個月以下年齡組陽性率最高，為67.5%，其中RSV陽性率高達48.7%，提示病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作有密切相關性，RSV感引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒。不同月份兒童哮喘急性發(fā)作病毒檢測分布情況提示RSV是引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒，RSV感染季節(jié)性較明顯，主要集中在冬春季節(jié)，10月至次年4月，與相關文獻報道具有一致性[9～11］。

綜上所述，病毒感染與兒童哮喘急性發(fā)作有密切相關性，RSV是引起嬰幼兒哮喘急性發(fā)作的主要病毒，主要集中在冬春季節(jié)。

[1]中華醫(yī)學會兒科學會呼吸學組.兒童支氣管哮喘診斷與防治指南〔J〕.中華兒科雜志，2008，46（10）：745－753.

[2]魯繼榮，喬紅梅.兒童哮喘診斷與治療指南——2007年版美國兒童哮喘診斷與管理指南解讀〔J〕.實用兒科臨床雜志，2010，25（4）：306－308.

[3]Global Initiative for Asthma Pocket guide for asthma management and prevention[EB／OL］[2013－06－20］.http：／／www.ginasthma.org／document／1.

[4]Nichel T，Hanssen H，Emslander I，etal.Immunomodulatory effects of aerobic training in obesity〔J〕.Mediators Inflamm，2011.

[5]Wu DN，Yamauchi K，Kobayashi H，etal.Effects of esophageal acid perfusion on cough responsiveness in patients with bronchial asthma〔J〕.Chest，2002，122（2）：505－509.

[6]魏健，黃波.布地奈德混懸劑霧化聯(lián)合孟魯司特口服治療嬰幼兒喘息性支氣管炎療效觀察〔J〕.新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報，2012，27（2）：294－298.

[7]蘇海生，忽新剛.布地奈德福莫特羅粉吸入治療對輕度支氣管哮喘氣道重塑和支氣管肺泡灌洗液中炎癥介質(zhì)的影響〔J〕.新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報，2011，28（3）：339－342.

[8]Johnson JE，Gonzales RA，Olson SJ，etal.The histopathology of fatal untreated Human respiratory syncytial virus infection〔J〕.Mod Pathol，2007，20（1）：108－119.

[9]田曼，施圣云，秦銘，等.兒童急性下呼吸道感染病毒病原學分析〔J〕.臨床兒科雜志，2010，28（2）：120－123.

[10]劉春艷，謝正德，Gonalez R，等.兒童急性下呼吸道感染病毒病原學研究〔J〕.中國實用兒科雜志，2009，24（4）：270－273.

[11]趙明波，吳澄清，趙波，等.昆明小兒急性下呼吸道合胞病毒感染的臨床研究〔J〕.中國實用兒科雜志，2008，23（1）：34－36.

[12]Lee JT，Chang LY，Wang LC，etal.Epidemiology of respiratory syncytial virus infect－ion in northern Taiwan，2001－2005－seaonality，clinical，characteristics，and disease burden〔J〕.J Microbiol Immunol Infect，2007，40（4）：293－301.