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    合水粉葛液化糖化工藝研究

    2015-09-10 12:44:25劉健南鄭琳張華建等
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年8期
    關(guān)鍵詞:糖化液化

    劉健南 鄭琳 張華建等

    摘要: 通過(guò)單因素和正交試驗(yàn),探討不同因素對(duì)合水粉葛液化糖化過(guò)程中DE值的影響。試驗(yàn)得出最佳液化工藝條件為:α-淀粉酶添加量為12 U/g,pH值為6 0,液化溫度為60 ℃,液化時(shí)間為180 min;最佳糖化工藝條件為:糖化酶添加量為200 U/g,pH值為4 0,糖化溫度為50 ℃,糖化時(shí)間為90 min。結(jié)果表明,該工藝的還原糖產(chǎn)量較高,為合水粉葛果酒釀造打好基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞: 合水粉葛;液化;糖化

    中圖分類號(hào): TS262 7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2015)08-0284-03

    粉葛(Pueraria thomsonii Benth)別稱干葛藤,與野葛[Pueraia lobata(Willd) Ohwi]一起構(gòu)成我國(guó)分布最廣的2種豆科葛屬植物。葛根是葛的地下塊根,富含葛根素、黃酮類物質(zhì)、花生酸、維生素以及鈣、鐵、鋅、硒等多種微量元素,具有降低心肌耗氧量、增加冠脈腦血管血流量、緩解心絞痛、抗心律失常、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用 [1-2],屬于國(guó)家衛(wèi)生部公布的藥食同源植物 [3]。合水粉葛是廣東省佛山市高明區(qū)出產(chǎn)的具有獨(dú)特優(yōu)良品質(zhì)的粉葛,是國(guó)家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品 [4]。

    淀粉的液化糖化是合水粉葛果酒生產(chǎn)過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié),是利用α-淀粉酶的液化作用和糖化酶的糖化作用,將粉葛中的淀粉分解為麥芽糖、葡萄糖等可發(fā)酵性糖的加工工序。本研究對(duì)粉葛液化糖化工藝進(jìn)行了探討,并確定了基本工藝參數(shù),以期為粉葛果酒的生產(chǎn)提供參考。

    1 材料與方法

    1 1 材料

    合水粉葛,購(gòu)自廣東省佛山市高明區(qū)合水粉葛產(chǎn)區(qū);α-淀粉酶(5 000 U/g)、糖化酶(50 000 U/g),由河南豫中生物科技有限公司生產(chǎn);其他化學(xué)試劑均為市售分析純。

    1 2 測(cè)定方法 [5]

    還原糖的測(cè)定:菲林試劑法;淀粉:酶水解法;DE值:指糖化液中的還原糖含量(以葡萄糖計(jì))占淀粉含量的百分率。

    DE=酶解液中的還原糖-漿液中的還原糖[]淀粉含量×100%。

    1 3 工藝流程

    原料清洗→去皮→切塊→打漿→預(yù)煮→液化→滅酶→糖化→滅酶→冷卻→糖化液。

    1 4 試驗(yàn)方法

    1 4 1 液化單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn) 以料水比1 g ∶ 1 mL、液化時(shí)間180 min、α-淀粉酶添加量12 U/g、pH值6 0、液化溫度55 ℃作為初始液化條件,分別考察α-淀粉酶添加量(8、10、12、14、16 U/g、)、pH值(5 0、5 5、6 0、6 5、7 0)、液化溫度(45、50、55、60、65 ℃)對(duì)粉葛液化的影響。根據(jù)單因素試驗(yàn)確定各主要因素和水平,以DE值為考察指標(biāo)進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。其因素及水平見(jiàn)表1。

    1 4 2 糖化單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn) 在最佳液化工藝條件基礎(chǔ)上,以糖化酶添加160 U/g、pH值4 0、糖化溫度55 ℃、糖化時(shí)間90 min作為初始糖化條件的基礎(chǔ)上,分別考察糖化酶添加量(80、120、160、200、240 U/g、)、pH值(3 0、3 5、4 0、4 5、5 0)、糖化溫度(45、50、55、60、65 ℃)對(duì)粉葛糖化的影響。根據(jù)單因素試驗(yàn)確定各主要因素和水平,以DE值為考察指標(biāo)進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。其因素及水平見(jiàn)表2。

    2 結(jié)果與分析

    2 1 液化單因素試驗(yàn)

    2 1 1 α-淀粉酶添加量對(duì)液化的影響 取粉葛漿液5份于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為6 0,分別按8、10、12、14、16 U/g的比例添加α-淀粉酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于 55 ℃ 的水浴鍋中恒溫180 min,恒溫過(guò)程間隔一定時(shí)間對(duì)漿液進(jìn)行攪拌(下同)。試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。由圖1可知,隨著酶添加量的增加,DE值逐漸提高,達(dá)到14 U/g添加量時(shí)增加率逐漸減慢。從節(jié)約成本的角度考慮,α-淀粉酶的添加量選擇范圍為10~14 U/g時(shí)有較好的液化效果。

    2 1 2 pH值對(duì)液化的影響 取粉葛漿液5份于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為5 0、5 5、6 0、6 5、7 0,按12 U/g的比例添加α-淀粉酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于55 ℃的水浴鍋中恒溫180 min。試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。由圖2可知,當(dāng)pH值在5 0~6 5之間時(shí),DE值隨著pH值的增大而呈上升趨勢(shì),隨之出現(xiàn)了下降。因此認(rèn)為在pH值5 5~6 5范圍時(shí)液化效果較好。

    2 1 3 溫度對(duì)液化的影響 取粉葛漿液5份于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為6 0,按12 U/g的比例添加α-淀粉酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于45、50、55、60、65 ℃的水浴鍋中恒溫180 min。試驗(yàn)結(jié)果如圖3所示。由圖3可知,當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí),DE值隨著溫度的升高而迅速增大,當(dāng)溫度高于 60 ℃ 后,DE值的增長(zhǎng)變化不大,因此,液化溫度范圍以50~60 ℃為佳。

    2 1 4 時(shí)間對(duì)液化的影響 取粉葛漿液5份于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為6 0,按12 U/g的比例添加α-淀粉酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于55 ℃的水浴鍋中恒溫60、120、180、240、300 min。試驗(yàn)結(jié)果如圖4所示。

    由圖4可知,隨著恒溫時(shí)間的延長(zhǎng)DE值呈增加趨勢(shì),但當(dāng)恒溫時(shí)間超過(guò)180 min后其DE值增長(zhǎng)幅度出現(xiàn)減緩,且酶的活力會(huì)隨著時(shí)間增加而出現(xiàn)鈍化現(xiàn)象,故液化恒溫時(shí)間可確定180 min為宜。

    2 2 液化正交試驗(yàn)

    按“1 4 1”節(jié)進(jìn)行試驗(yàn),用單因素試驗(yàn)中最佳的試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),其結(jié)果及直觀分析見(jiàn)表3,方差分析見(jiàn)表4。

    由表3可知,影響合水粉葛液化DE值主次因素順序依次是:酶添加量>pH值>溫度,最佳組合為A2B2C3,即最佳工藝為酶添加量12 U/g、pH值6 0、溫度60 ℃。

    由表4可知,酶添加量為最顯著因素,影響液化試驗(yàn)結(jié)果的因素順序依次是:酶添加量>pH值>溫度,與表3正交試驗(yàn)的極差分析結(jié)果相吻合。

    2 3 糖化單因素試驗(yàn)

    2 3 1 糖化酶添加量對(duì)糖化效果的影響 取最佳條件液化后粉葛漿液進(jìn)行滅酶處理,冷卻至常溫后平分成5份置于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)pH值為4 0,分別按80、120、160、200、240 U/g的比例添加糖化酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于 55 ℃ 的水浴鍋中恒溫90 min,恒溫過(guò)程間隔一定時(shí)間對(duì)漿液進(jìn)行攪拌(下同)。試驗(yàn)結(jié)果如圖5所示。

    由圖5可知,隨著酶添加量的增加,達(dá)到200 U/g添加量時(shí)增加率逐漸減慢。從節(jié)約成本的角度考慮,糖化酶的添加量選擇范圍為120~200 U/g時(shí)有較好的糖化效果。

    2 3 2 pH值對(duì)糖化效果的影響 取最佳條件液化后粉葛漿液進(jìn)行滅酶處理,冷卻至常溫后平分成5份置于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為3 0、3 5、4 0、4 5、5 0,按160 U/g的比例添加糖化酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于55 ℃的水浴鍋中恒溫90 min。試驗(yàn)結(jié)果如圖6所示。

    由圖6可知,當(dāng)pH值在3 0~4 5之間時(shí),DE值隨著pH值的增大而增大,隨后出現(xiàn)了下降趨勢(shì)。因此認(rèn)為在pH值范圍為3 5~4 5時(shí),糖化效果較好。

    2 3 3 溫度對(duì)糖化的影響

    取最佳條件液化后粉葛漿液進(jìn)行滅酶處理,冷卻至常溫后平分成5份置于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為4 0,按160 U/g的比例添加糖化酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于45、50、55、60、65 ℃的水浴鍋中恒溫 90 min。試驗(yàn)結(jié)果如圖7所示。

    由圖7可知,當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí),DE值隨著溫度的升高而呈明顯上升趨勢(shì),當(dāng)溫度高于60 ℃后,DE值的增長(zhǎng)變化不大,因此,糖化溫度范圍以50~60 ℃為佳。

    2 3 4 時(shí)間對(duì)糖化的影響

    取最佳條件液化后粉葛漿液進(jìn)行滅酶處理,冷卻至常溫后平分成5份置于燒杯中,用檸檬酸溶液調(diào)至pH值為4 0,按160 U/g的比例添加糖化酶,充分?jǐn)嚢韬?,加蓋置于55 ℃的水浴鍋中恒溫30、60、90、120、150 min。試驗(yàn)結(jié)果如圖8所示。

    由圖8可知,隨著恒溫時(shí)間的延長(zhǎng)DE值呈增加趨勢(shì),但當(dāng)恒溫時(shí)間超過(guò)90 min后其DE值增長(zhǎng)幅度出現(xiàn)減緩,且會(huì)出現(xiàn)酶鈍化現(xiàn)象,故恒溫時(shí)間以90 min為宜。

    2 4 糖化正交試驗(yàn)

    按“1 4 2”節(jié)進(jìn)行試驗(yàn),用單因素試驗(yàn)中最佳的試驗(yàn)結(jié)

    果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),其結(jié)果及直觀分析見(jiàn)表5,方差分析見(jiàn)表6。

    由表5可知,影響合水粉葛糖化DE值主次因素順序依次是:酶添加量>pH值>溫度,最佳組合為A3B2C1,即最佳工藝為酶添加量200 U/g、pH值4 0、溫度50 ℃。

    由表6可知,酶添加量為最顯著因素,影響液化試驗(yàn)結(jié)果的因素順序依次是:酶添加量>pH值>溫度,與表3正交試驗(yàn)的極差分析結(jié)果相吻合。

    3 結(jié)論

    經(jīng)試驗(yàn)獲得合水粉葛的最佳液化工藝為α-淀粉酶添加量為12 U/g、pH值為6 0、液化溫度60 ℃、液化時(shí)間180 min;最佳糖化工藝為:糖化酶添加量為200 U/g、pH值為4 0、糖化溫度50 ℃、糖化時(shí)間90 min。試驗(yàn)結(jié)果表明,該工藝得到的還原糖含量較高,根據(jù)果酒生產(chǎn)過(guò)程乙醇含量需求及“含糖量-潛在乙醇濃度換算表”得出該品種的液化糖化符合工藝要求 [6],為合水粉葛保健果酒的釀造奠定了良好基礎(chǔ)。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 曹鐘靈,李建北,張東明 葛屬植物中異黃酮類化合物的研究進(jìn)展[J] 中藥材,2005,28(1):67-71

    [2]胡曉云,賴 艷 葛根藥食兩用的開(kāi)發(fā)研究[J] 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2007,19(7):65-67

    [3]中國(guó)藥典委員會(huì) 中國(guó)藥典:一部[M] 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:273-274

    [4]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局 56號(hào)[EB/OL] (2006-04-16)[2015-05-20] http://www lawyee net/act/act_display asp?rid=355147

    [5]張水華 食品分析[M] 北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,2007:138

    [6] 徐 凌 食品發(fā)酵釀造[M] 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2011:62-63

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