杏鮑菇組織分離菌株工廠化栽培試驗(yàn)

柯麗娜　賴志斌　張志鴻等

摘要： 通過出菇栽培試驗(yàn)，比較分析杏鮑菇菌株日引1號(hào)、杏3號(hào)與其組織分離菌株出菇性狀、平均單袋產(chǎn)量、單袋利潤情況等。試驗(yàn)結(jié)果，分離菌株與出發(fā)菌株現(xiàn)蕾時(shí)間及外觀品質(zhì)差異不大，而滿袋時(shí)間分離菌株少于出發(fā)菌株 1～2 d。分離菌株日引1號(hào)-1、日引1號(hào)-3比出發(fā)菌株日引1號(hào)產(chǎn)量分別提高6 62%、0 6%，利潤分別提高3309%、2 19%。日引1號(hào)-2產(chǎn)量與利潤比出發(fā)菌株日引1號(hào)降低0 71%、4 17%。杏3號(hào)-1、杏3號(hào)-2比出發(fā)菌株杏3號(hào)產(chǎn)量分別提高1 99%、6 68%，利潤分別提高42 08%、112 82%。結(jié)果表明，應(yīng)用組織分離不僅可以保持出發(fā)菌株的優(yōu)良特性，還可以達(dá)到較好的復(fù)壯效果，但分離時(shí)要注意子實(shí)體單株的選擇。

關(guān)鍵詞： 杏鮑菇；組織分離；工廠化；栽培試驗(yàn)

中圖分類號(hào)： S646 1+40 4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）08-0239-02

杏鮑菇（Pleurotus eryngii），別稱刺芹菇、刺芹側(cè)耳 [1]，是近年來開發(fā)栽培成功的集食用、藥用、食療于一體的珍稀食用菌新品種，深受消費(fèi)者喜愛 [2]。目前，杏鮑菇工廠化栽培品種單一，菇農(nóng)不斷地對(duì)原有菌株進(jìn)行多代轉(zhuǎn)接，易出現(xiàn)杏鮑菇菌種退化現(xiàn)象，導(dǎo)致杏鮑菇產(chǎn)量、質(zhì)量不穩(wěn)定；另外受市場(chǎng)的影響，經(jīng)濟(jì)效益逐年下降，不少菇農(nóng)陷入虧損，嚴(yán)重打擊菇農(nóng)栽培杏鮑菇的積極性，影響杏鮑菇產(chǎn)業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。為此，我們對(duì)工廠化栽培的杏鮑菇菌株進(jìn)行組織分離，通過品種對(duì)比試驗(yàn)，分析比較分離菌株與出發(fā)菌株的差異，尋找保持原有菌株優(yōu)良特性的方法。

1 材料與方法

1 1 供試菌株

供試菌株7個(gè)，日引1號(hào)及其3株分離菌株，分別為日引1號(hào)-1、日引1號(hào)-2、日引1號(hào)-3；杏3號(hào)及其2株分離菌株，分別為杏3號(hào)-1、杏3號(hào)-2。日引1號(hào)是由福建省漳州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所選育，并于2010年通過福建省新品種認(rèn)定的優(yōu)良品種，杏3號(hào)為福建省漳州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所保存的菌株。

1 2 培養(yǎng)基配方

1 2 1 母種 馬鈴薯200 g、磷酸氫二鉀1 g、硫酸鎂1 g、糖20 g、瓊脂20 g、水1 L。

1 2 2 原種、栽培種 原種采用麥粒作培養(yǎng)基，將無霉變的麥粒洗干凈，用1%的石灰水浸泡24 h，洗凈晾干，加1 5%的石灰和15%的木屑，攪拌均勻，裝瓶高壓滅菌，121 ℃滅菌 25 h，冷卻接種；3級(jí)種采用枝條和麥粒作培養(yǎng)基，枝條和麥粒的處理與原種相同，含水量約62% [3]。

1 2 3 栽培袋 干料500 g、配方為玉米芯42%、木屑20%、麩皮20%、玉米粉8%、豆粕7%、石灰1 5%、碳酸鈣1 5%。含水量約64%。

1 3 試驗(yàn)方法

1 3 1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在山東福禾菌業(yè)科技有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)以菌株為因素，設(shè)置7個(gè)處理，采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)4次，每處理栽培袋數(shù)為240袋，試驗(yàn)總栽培袋數(shù)為 1 680 袋。

1 3 2 栽培管理 栽培管理參照工廠化栽培普遍使用的方法。培養(yǎng)料充分?jǐn)嚢杈鶆?，機(jī)械裝料，裝滿料壓緊后套上塑料環(huán)，塞上棉花塞，高壓121 ℃持續(xù)滅菌2 5 h，冷卻至30 ℃以下統(tǒng)一接種，接種后置24 ℃培養(yǎng)室避光統(tǒng)一培養(yǎng)，定期觀察菌絲生長(zhǎng)情況，發(fā)現(xiàn)污染及時(shí)清理。待菌絲滿袋后，后熟7 d，移至出菇房出菇，溫度13～16 ℃，空氣濕度保持在60%～90% [4]，適當(dāng)通風(fēng)，給適當(dāng)散射光，當(dāng)菇蕾長(zhǎng)至3～4 cm時(shí)統(tǒng)一疏蕾，待子實(shí)體成熟后采收，分別統(tǒng)計(jì)各處理的產(chǎn)量。

1 4 測(cè)定項(xiàng)目與統(tǒng)計(jì)方法

1 4 1 測(cè)定項(xiàng)目 （1）生物學(xué)效率： 記錄子實(shí)體單袋產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率；生物學(xué)效率=子實(shí)體鮮質(zhì)量（g）/培養(yǎng)料干質(zhì)量（g）×100%。（2）經(jīng)濟(jì)效益分： 按照當(dāng)年原料價(jià)格及鮮菇市場(chǎng)價(jià)，計(jì)算不同杏鮑菇菌株的單袋銷售額及利潤，并進(jìn)行經(jīng)濟(jì)效益分析。（3）觀察各菌株的農(nóng)藝性狀，統(tǒng)計(jì)各菌株的總產(chǎn)量、單袋利潤，并進(jìn)行方差分析。

1 4 2 統(tǒng)計(jì)方法 采用DPS V2進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)顯著性分析，采用LSD進(jìn)行差異性分析 [5]。

2 結(jié)果與分析

2 1 不同菌株農(nóng)藝性狀

不同菌株出菇性狀見表1。觀察滿袋時(shí)間、現(xiàn)蕾天數(shù)，結(jié)果組織分離菌株的滿袋時(shí)間比出發(fā)菌株少，日引1號(hào)29 d滿袋，而3株分離菌株在27、28 d均滿袋。杏3號(hào) 31 d滿袋，而2株分離菌株29、30 d滿袋。現(xiàn)蕾時(shí)間出發(fā)菌株與分離菌株差異不大，一般在進(jìn)出菇房后8、9 d。2株出發(fā)菌株的子實(shí)體外觀品質(zhì)差異較大，性狀表現(xiàn)較好的為日引1號(hào)，整齊度較好，勻整質(zhì)優(yōu)，子實(shí)體色澤白嫩，大菇多，質(zhì)地緊實(shí)，杏3號(hào)整齊度一般，色澤白偏黃，但質(zhì)地緊實(shí)，分離菌株與出發(fā)菌株比較，外觀品質(zhì)基本沒差異。

2 2 不同菌株產(chǎn)量

7個(gè)菌株的小菇蕾、商品等級(jí)菇、菇頭平均質(zhì)量及平均總產(chǎn)量、生物學(xué)效率差異較大。 出發(fā)菌株日引1號(hào)，產(chǎn)量 41892 g/袋，高于杏3號(hào) 378 71 g/袋，差異達(dá)極顯著。日引1號(hào)的3株分離菌株產(chǎn)量均高于杏3號(hào)的2株分離菌株。供試菌株總產(chǎn)量按從高到低排序?yàn)槿找?號(hào)-1﹥?nèi)找?號(hào)-3﹥ 日引1號(hào)﹥?nèi)找?號(hào)-2﹥杏3號(hào)-2﹥杏3號(hào)-1﹥杏3號(hào)。日引1號(hào)-1、日引1號(hào)-3總產(chǎn)量分別比出發(fā)菌株日引1號(hào)提高662%、0 6%，分離菌株日引1號(hào)-2總產(chǎn)量比日引1號(hào)降低071%，表明同一品種選擇不同的子實(shí)體單株，對(duì)產(chǎn)量影響很大。分離菌株杏3號(hào)-1、杏3號(hào)-2總產(chǎn)量分別比杏3號(hào)增加1 99%、6 68%（表2）。

對(duì)7個(gè)試驗(yàn)菌株的平均單袋總產(chǎn)量進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表3。不同菌株間產(chǎn)量存在較大差異。結(jié)果表明，平均單袋總產(chǎn)量最高的是菌株日引1號(hào)-1，與其他菌株的總產(chǎn)量差異顯著，與分離菌株日引1號(hào)-2存在極顯著差異；日引1號(hào)-3與出發(fā)菌株日引1號(hào)總產(chǎn)量差異不顯著；日引1號(hào)-2產(chǎn)量低于出發(fā)菌株日引1號(hào)，但二者差異不顯著；分離菌株杏3號(hào)-2單袋總產(chǎn)量與出發(fā)菌株杏3號(hào)差異顯著，與分離菌株杏3號(hào)-1差異不顯著；杏3號(hào)-1與杏3號(hào)差異不顯著。

2 3 不同菌株栽培利潤比較

由于試驗(yàn)菌株各個(gè)等級(jí)菇市場(chǎng)售價(jià)一樣，7個(gè)試驗(yàn)菌株的單袋銷售額從高到低的排序與單袋總產(chǎn)量一致，方差分析結(jié)果也一致。單袋銷售額最高的為日引1號(hào)-1，為1 99元/袋，單袋利潤為0 39元/袋；最低的為杏3號(hào)，為170元/袋， 單袋利潤為0 10元/袋。從表4可以看出，分離菌株杏3號(hào)-1、杏3號(hào)-2的單袋利潤均高于出發(fā)菌株杏3號(hào)，分別提高42 08%、112 82%；分離菌株日引1號(hào)-1、日引1號(hào)-2單袋利潤高于出發(fā)菌株日引1號(hào)，分別提高33 09%、219%，日引1號(hào)-3單袋利潤低于日引1號(hào)4 17%。

3 結(jié)論與討論

王波等指出，組織分離方法可以達(dá)到較好的提純復(fù)壯效果 [6]，本試驗(yàn)結(jié)果也得到驗(yàn)證，分離菌株不僅較好地保持了出發(fā)菌株的優(yōu)良特性，表現(xiàn)出菇整齊，朵形大，質(zhì)地致密，菇體較白，平整，棍棒狀，成品菇較多，菇蕾及成品菇比例占到了總產(chǎn)量的85%以上。分離菌株的產(chǎn)量、利潤甚至優(yōu)于出發(fā)菌株。本試驗(yàn)中出發(fā)菌株杏3號(hào)的2個(gè)分離菌株單袋產(chǎn)量及利潤均高于出發(fā)菌株，日引1號(hào)其中2個(gè)分離菌株高于出發(fā)菌株?？赡苡捎诮M織分離是通過篩選表現(xiàn)優(yōu)良的個(gè)體，再結(jié)合人工連續(xù)的定向選擇，使得現(xiàn)有品種的優(yōu)良性狀得以保持 [7]。

研究結(jié)果同一菌株的不同組織分離物，單袋產(chǎn)量、單袋利潤差別較大，日引1號(hào)的3個(gè)分離菌株，其中日引1號(hào)-1、日引1號(hào)-3均高于出發(fā)菌株，而日引1號(hào)-2則低于日引1號(hào)，表明杏鮑菇進(jìn)行組織分離時(shí)選擇的子實(shí)體單株有差異，造成了組織分離菌株差異，因此要注意選擇性狀優(yōu)良的單株，并在分離后對(duì)新獲得的菌株進(jìn)行出菇試驗(yàn)，確認(rèn)為優(yōu)良高產(chǎn)菌株后，才能應(yīng)用于生產(chǎn)。

本試驗(yàn)中，出發(fā)菌株日引1號(hào)產(chǎn)量顯著高于杏3號(hào)，日引1號(hào)的3株分離菌株產(chǎn)量均高于杏3號(hào)的2株分離菌株。說明分離菌株高產(chǎn)高效的特性很大程度取決于原來出發(fā)菌株，所以進(jìn)行組織分離時(shí)特別要注意選擇優(yōu)良杏鮑菇品種，也說明組織分離對(duì)于創(chuàng)造新菌株具有一定的局限性。主要是組織分離是無性繁殖過程， 雙親的染色體沒有經(jīng)過重組。為了豐

富現(xiàn)有杏鮑菇品種，創(chuàng)造出更優(yōu)更好的新菌株，還需要在組織分離基礎(chǔ)上選擇其他育種方法。相關(guān)報(bào)道食用菌不同時(shí)期、不同部位的子實(shí)體組織分離的栽培效果差異較大 [8-11]，對(duì)組織分離時(shí)期、部位還需開展進(jìn)一步研究。

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