Sysmex XE－5000檢測漿膜腔積液的可比性研究

賀端明，藍(lán)惠森，江雁瓊

（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院，廣東廣州510700）

Sysmex XE－5000血細(xì)胞分析儀采用電阻抗和流式激光原理，根據(jù)電阻脈沖、前向散射光強(qiáng)度和寬度、熒光強(qiáng)度和寬度對標(biāo)本中所有有形成分進(jìn)行檢測，可定量測定標(biāo)本中的白細(xì)胞、紅細(xì)胞及白細(xì)胞分類。除此之外，XE－5000還提供了一些研究參數(shù)，如高熒光細(xì)胞比率及其散點(diǎn)圖，對腫瘤細(xì)胞的篩查有很大的意義［1－2］。漿膜腔積液常規(guī)檢測對各類胸腹水的診斷、治療及預(yù)后有著重要的價值，但一直以來都采用手工法進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，操作繁瑣，不同檢測者測定結(jié)果不一，重復(fù)性較差，使實(shí)驗(yàn)室之間的可比性差，不利于建立實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量評價，影響臨床醫(yī)師對患者資料的分析［3］。而Sysmex XE－5000血液分析儀帶有體液模式，若運(yùn)用于臨床檢測，則可方便、快速、準(zhǔn)確地向臨床醫(yī)生報(bào)告結(jié)果，更好、更快地服務(wù)于患者。為此，本研究通過58份體液標(biāo)本建立實(shí)驗(yàn)，對手工法與儀器法進(jìn)行對比，為Sysmex XE－5000血液分析儀應(yīng)用于臨床快速、成批量檢測體液常規(guī)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 來源隨機(jī)選取58份由廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院臨床醫(yī)師采集的無凝塊漿膜腔積液標(biāo)本，EDTA－K2抗凝管收集標(biāo)本后及時送檢。

1.2 儀器與試劑 Sysmex XE－5000全自動血液分析儀（簡稱XE－5000）及配套試劑校準(zhǔn)品質(zhì)控品購自日本Sysmex公司；奧林巴斯KX21光學(xué)顯微鏡；改良牛鮑氏血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；冰醋酸溶液。

1.3 方法 在標(biāo)本采集后1h內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)并記錄結(jié)果。

1.3.1 XE－5000檢測 取漿膜腔積液標(biāo)本嚴(yán)格按照XE－5000操作手冊進(jìn)行檢測，將標(biāo)本輕輕混勻后在體液模式下進(jìn)行檢測。XE－5000利用電阻抗法測定紅細(xì)胞數(shù)，利用核酸熒光染色流式細(xì)胞法檢測有核細(xì)胞并對其進(jìn)行分類。分析前采用儀器配套質(zhì)控物檢測，儀器性能符合要求。

1.3.2 手工法檢測 標(biāo)本充分混勻后，沖池靜置5min后用光學(xué)顯微鏡對標(biāo)本進(jìn)行總細(xì)胞計(jì)數(shù)，每份標(biāo)本檢測2次，結(jié)果取其平均值；白細(xì)胞分類計(jì)算先用無水乙醇清洗潔凈試管的試管壁，并甩干，加入一滴樣本，靜置15 min使其充分反應(yīng)后沖池鏡檢，每份標(biāo)本檢測2次。操作過程嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版中的體液細(xì)胞計(jì)算操作指南。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，組間比較采用配對t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)，以α＝0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 對總體標(biāo)本檢測的比較 見表1。

表1 兩種方法檢測總體標(biāo)本的比較及相關(guān)性分析

2.2 白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L標(biāo)本檢測的比較 總體標(biāo)本中，79%標(biāo)本中白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L，對其標(biāo)本中各細(xì)胞檢測結(jié)果進(jìn)行分析比較，見表2。

表2 兩種方法檢測白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L標(biāo)本的比較及相關(guān)性分析

2.3 白細(xì)胞數(shù)小于20×106／L 標(biāo)本檢測的比較 總體標(biāo)本中，20%標(biāo)本中白細(xì)胞數(shù)小于20×106／L，對其標(biāo)本中各細(xì)胞檢測結(jié)果進(jìn)行分析比較，見表3。

2.4 紅細(xì)胞數(shù)大于或等于1 000×106／L 標(biāo)本檢測的比較總體標(biāo)本中，62%的標(biāo)本中紅細(xì)胞細(xì)胞數(shù)大于或等于1 000×106／L，對其標(biāo)本中各細(xì)胞檢測結(jié)果進(jìn)行分析比較，見表4。

表3 兩種方法檢測白細(xì)胞數(shù)小于20×106／L標(biāo)本的比較及相關(guān)性分析

表4 兩種方法檢測紅細(xì)胞數(shù)大于或等于1 000×106／L標(biāo)本的比較及相關(guān)性分析

2.5 紅細(xì)胞數(shù)小于1 000×106／L 標(biāo)本檢測的比較 總體標(biāo)本中，38%標(biāo)本紅細(xì)胞數(shù)小于1 000×106／L，對其標(biāo)本中各細(xì)胞檢測結(jié)果進(jìn)行分析比較，見表5。

表5 兩種方法檢測紅細(xì)胞數(shù)小于1 000×106／L標(biāo)本的比較及相關(guān)性分析

3 討 論

從總體上分析，白細(xì)胞、紅細(xì)胞及白細(xì)胞分類兩法測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩方法結(jié)果相關(guān)性研究中：白細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.98，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.52，單個核細(xì)胞r＝0.42，多個核細(xì)胞r＝0.58，除白細(xì)胞以兩種方法測定的相關(guān)性高以外，其他的相關(guān)性均較低。若所有體液標(biāo)本直接用儀器分析，一些標(biāo)本的真實(shí)結(jié)果會得不到確切的反映，因而XE－5000測定體液標(biāo)本的結(jié)果要有選擇地發(fā)報(bào)告［4－5］。

以白細(xì)胞數(shù)20×106／L 為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，在收集的58份標(biāo)本中，其中46份標(biāo)本白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L，占總標(biāo)本的79%，12份標(biāo)本白細(xì)胞數(shù)小于20×106／L，占總標(biāo)本的21%。兩組在白細(xì)胞、紅細(xì)胞及白細(xì)胞分類兩法測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩方法結(jié)果相關(guān)性研究中：白細(xì)胞高值標(biāo)本的檢測中白細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.98，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.62，單個核細(xì)胞r＝0.73，多個核細(xì)胞r＝0.73；白細(xì)胞低值標(biāo)本的檢測中白細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.31，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.99，單個核細(xì)胞r＝0.18，多個核細(xì)胞r＝0.50。從數(shù)據(jù)上，可以直觀地看出，當(dāng)標(biāo)本中白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L 時，無論是手工數(shù)細(xì)胞還是由XE－5000分析得出的紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異，且都具有較好的相關(guān)性；當(dāng)標(biāo)本中白細(xì)胞數(shù)小于20×106／L時，各細(xì)胞計(jì)數(shù)雖然統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異，但在相關(guān)性分析中卻出現(xiàn)了較大的區(qū)別，而紅細(xì)胞數(shù)的相關(guān)系數(shù)卻接近于1，但對于這一可信度還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)，因?yàn)榈椭禈?biāo)本量偏少。從這一方法比較分析中，不難得出，以白細(xì)胞為標(biāo)準(zhǔn)，對于白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L 的標(biāo)本，可以以儀器所得結(jié)果發(fā)出報(bào)告；對于白細(xì)胞數(shù)小于20×106／L的標(biāo)本，應(yīng)該謹(jǐn)慎處理，不能以儀器所得結(jié)果發(fā)出報(bào)告，需予以復(fù)查。

以紅細(xì)胞數(shù)1 000×106／L 為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，在收集的58份標(biāo)本中，其中36份標(biāo)本紅細(xì)胞數(shù)大于或等于1 000×106／L，占總 標(biāo) 本 的62%，22 份 標(biāo) 本 紅 細(xì) 胞 數(shù) 小 于1 000×106／L，占總標(biāo)本的38%。兩組在白細(xì)胞、紅細(xì)胞及白細(xì)胞分類兩法測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩方法結(jié)果相關(guān)性研究中：紅細(xì)胞高值標(biāo)本的檢測中白細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.99，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.46，單個核細(xì)胞r＝0.80，多個核細(xì)胞r＝0.80；低值標(biāo)本檢測中白細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.97，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)r＝0.00，單個核細(xì)胞r＝0.07，多個核細(xì)胞r＝0.30。所得數(shù)據(jù)顯示，紅細(xì)胞數(shù)大于或等于1 000×106／L的標(biāo)本中，白細(xì)胞及其分類的相關(guān)性都是比較好的，而紅細(xì)胞本身的相關(guān)系數(shù)卻不太理想；在紅細(xì)胞數(shù)小于1 000×106／L的標(biāo)本中，白細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)性也比較高，白細(xì)胞的分類卻很低；紅細(xì)胞計(jì)數(shù)于兩種方法比較無相關(guān)性，所以對于儀器測得紅細(xì)胞計(jì)數(shù)小于1 000×106／L的標(biāo)本要予以手工復(fù)查，要以手工顯微鏡下計(jì)數(shù)所得為標(biāo)準(zhǔn)。

漿膜腔積液常規(guī)檢查一般包括物理檢查、細(xì)胞學(xué)檢查、化學(xué)檢查、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、異常細(xì)胞等。白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類提示積液性質(zhì)、有無炎癥；紅細(xì)胞估計(jì)出血類型和時間；異常細(xì)胞提示腫瘤、確定診療方案、判斷愈后情況。目前，手工計(jì)數(shù)是體液標(biāo)本細(xì)胞計(jì)數(shù)的常規(guī)方法，雖然是金標(biāo)準(zhǔn)，但是用儀器檢測可以避免人為誤差，提高檢測速度等優(yōu)點(diǎn)，所以儀器檢測體液標(biāo)本是未來的發(fā)展方向［6－9］。從研究結(jié)果得出，以白細(xì)胞數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)對標(biāo)本進(jìn)行分類時，儀器對標(biāo)本的檢測結(jié)果相對于以紅細(xì)胞為標(biāo)準(zhǔn)更有價值。所以當(dāng)標(biāo)本中白細(xì)胞數(shù)大于或等于20×106／L時，結(jié)果的可信度高，可以直接報(bào)告臨床，而白細(xì)胞低值的標(biāo)本需要手工復(fù)查。

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