集落刺激因子對(duì)化療者血液白細(xì)胞介素－4和腫瘤壞死因子－α的影響＊

李慶端，林俊山，高凌云，葉少毅

（福建省漳州市中醫(yī)院，福建漳州363000）

白細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)的主要組成部分。當(dāng)病情惡化，炎癥介質(zhì)因子刺激繼續(xù)增強(qiáng)，機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)無(wú)法達(dá)到防御作用時(shí)，就會(huì)通過(guò)加強(qiáng)細(xì)胞－體液免疫調(diào)控，促進(jìn)骨髓內(nèi)細(xì)胞成熟，調(diào)節(jié)骨髓屏障，加速成熟細(xì)胞釋放，達(dá)到提升血液中白細(xì)胞的作用。而運(yùn)用集落刺激因子（CSF）刺激骨髓提升外周血液中白細(xì)胞數(shù)的機(jī)制與上述不同，人為注射CSF 主要是刺激多能造血干細(xì)胞和不同發(fā)育分化階段的造血干細(xì)胞進(jìn)行增殖、分化并引導(dǎo)骨髓細(xì)胞從G0期進(jìn)入S增殖期［1］，促進(jìn)細(xì)胞的成熟，改變血髓屏障的微循環(huán)，加速細(xì)胞由骨髓釋放入外周血從而達(dá)到提升血液中白細(xì)胞的作用。本研究旨在探討CSF對(duì)化療者血白細(xì)胞介素－4（IL－4）和腫瘤壞死因子－α（TNF－α）的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年6月至2014年7月于本院住院化療的腫瘤患者30例作為化療組，排除發(fā)熱、細(xì)菌感染和近期手術(shù)患者，男女不限，年齡43～68歲，使用CSF前白細(xì)胞小于或等于4.0×109／L，使用CSF后白細(xì)胞大于或等于15×109／L；同期住院明確診斷細(xì)菌感染的患者30例作為細(xì)菌感染組，外周血液白細(xì)胞升高大于或等于15×109／L，細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，臨床明確診斷為感染性肺炎患者，男女不限，年齡38～70歲；健康體檢者30 例作為健康對(duì)照組，外周血液白細(xì)胞4.0～10.0×109／L，近期內(nèi)無(wú)發(fā)熱，無(wú)感染體征并排除孕婦、血液系統(tǒng)疾病和服用影響粒細(xì)胞數(shù)量功能藥物的人群，男女不限，年齡25～51歲。

1.2 儀器與試劑 希森美康－1800i血細(xì)胞全自動(dòng)分析儀與配套試劑為日本希森美康公司產(chǎn)品；IL－4和TNF－α酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒為美國(guó)Cloud－Clone Corpg 公司產(chǎn)品；酶標(biāo)儀RAYTORT6500和全自動(dòng)洗板機(jī)TW960 為美國(guó)Rayto 雷杜公司產(chǎn)品。

1.3 方法 用ELISA 方法，分別檢測(cè)化療組使用CSF前后、細(xì)菌感染組以及健康對(duì)照組靜脈血漿中IL－4和TNF－α的水平，操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié) 果

各組血清IL－4和TNF－α水平的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。從表中可見(jiàn)使用CSF后可使化療者血中IL－4水平輕度升高，但與使用CSF前比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝0.364，P＞0.05），與健康對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝0.269，P＞0.05），但與細(xì)菌感染組比較明顯降低（t＝4.281，P＜0.05）。使用CSF后可使化療者血中TNF－α水平明顯高，與使用CSF前、健康對(duì)照組和細(xì)菌感染組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 各組血液中IL－4和TNF－α檢測(cè)結(jié)果（ng／mL，

表1 各組血液中IL－4和TNF－α檢測(cè)結(jié)果（ng／mL，

＊：P＜0.05，分別與細(xì)菌感染組、使用CSF 前、健康體檢組比較；△：P＜0.05，與細(xì)菌感染組比較。

患者類(lèi)型 n TNF－αIL－4化療組使用CSF前 30 1.705±1.608 1.148±1.102使用CSF后 30 3.894±1.724＊ 1.257±1.213△細(xì)菌感染組 30 1.987±1.421 2.897±1.705健康體檢組30 1.739±1.574 1.174±1.172

3 討 論

正常情況下，外周血液循環(huán)中的白細(xì)胞升高是一種機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)。是由于體內(nèi)存在炎癥介質(zhì)因子（如組織挫傷、感染、中毒等因素產(chǎn)生）刺激下，通過(guò)體液免疫系統(tǒng)的調(diào)控作用，使得血管張力發(fā)生變化，舒張血管內(nèi)皮細(xì)胞，調(diào)節(jié)微血管的通透性，抑制血小板和白細(xì)胞在血管壁上的黏附能力，使得邊緣池的白細(xì)胞迅速向循環(huán)池移動(dòng)。同時(shí)啟動(dòng)活化細(xì)胞免疫系統(tǒng)，活化致敏免疫細(xì)胞，分泌多種細(xì)胞因子發(fā)揮細(xì)胞免疫調(diào)控作用，增強(qiáng)白細(xì)胞的變形、趨化、游走、吞噬和消化能力，調(diào)節(jié)白細(xì)胞凋亡時(shí)間，延長(zhǎng)成熟白細(xì)胞存活時(shí)間等以提升外周血中白細(xì)胞數(shù)。腫瘤化療者使用重組人CSF 提升血液中白細(xì)胞數(shù)的同時(shí)，體內(nèi)因白細(xì)胞的波動(dòng)導(dǎo)致一系列細(xì)胞因子量的變化，尤其是與白細(xì)胞調(diào)節(jié)相關(guān)的細(xì)胞因子。本研究表明，使用CSF 后化療者體內(nèi)的TNF－α的水平明顯升高，而IL－4升高的幅度不明顯。這與急性創(chuàng)傷導(dǎo)致IL－4明顯升高不同［2］，亦與糖皮激素導(dǎo)致IL－4明顯升高而TNF－α水平下降不同［3］。細(xì)菌感染組IL－4的水平明顯升高而TNF－α升高的幅度不明顯，這與使用CSF后誘發(fā)體內(nèi)產(chǎn)生的細(xì)胞因子種類(lèi)和量不同。外周血中可見(jiàn)白細(xì)胞出現(xiàn)核質(zhì)發(fā)育不一致的現(xiàn)象［4］。TNF－α是由活化的單核－巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一種糖蛋白包括可溶性sTNF－α 和膜相關(guān)性mTNF－α，屬于Ⅱ型膜蛋白，以三聚體的形式發(fā)揮作用的。TNF－α通過(guò)與靶細(xì)胞膜上的腫瘤壞死因子受體TNFR 結(jié)合實(shí)現(xiàn)細(xì)胞毒性、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)功能。同時(shí)，TNF－α作為細(xì)胞死亡因子之一參與細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)，又作為一種炎癥介質(zhì)，能增加血神經(jīng)屏障的通透性［5］，刺激中性粒細(xì)胞，使其黏附在血管內(nèi)皮細(xì)胞上，產(chǎn)生超氧化物釋放溶酶體酶，增加補(bǔ)體受體的表達(dá)。本次結(jié)果表明CSF 可以激活單核－巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF－α，TNF－α是調(diào)節(jié)血循環(huán)中白細(xì)胞的主要因素之一，也是外周粒細(xì)胞在光學(xué)油鏡下可見(jiàn)到異常增粗顆粒原因之一。這與停用CSF后外周循環(huán)中白細(xì)胞總數(shù)急劇下降相符。IL－4是由活化T 淋巴細(xì)胞分泌的，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增殖和分泌抗體；誘導(dǎo)單核細(xì)胞分泌CSF，增強(qiáng)粒細(xì)胞介導(dǎo)的吞噬、殺傷活性和ADCC作用同時(shí)抑制單核細(xì)胞分泌TNF、IL－1、IL－6。本次研究結(jié)果中IL－4升高的幅度不明顯，提示CSF對(duì)T 淋巴細(xì)胞的激活不明顯，與細(xì)菌感染機(jī)制不同，這與機(jī)體處于非應(yīng)激狀態(tài)有關(guān)，為的是穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境，達(dá)到負(fù)反饋?zhàn)饔?，進(jìn)一步調(diào)節(jié)骨髓細(xì)胞的分裂和釋放速度。

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