骨成形蛋白9在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的表達(dá)及臨床意義

樊銀杰，王 魏，孫宏治

遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州 121001

綜述

骨成形蛋白9在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的表達(dá)及臨床意義

樊銀杰，王 魏，孫宏治

遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州 121001

目的 探討骨成形蛋白9（bone morphogenetic protein-9，BMP-9）在結(jié)直腸癌演變過程中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。方法 收集遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院病理科2012年5月- 2014年10月收治的65例伴有腺瘤的結(jié)直腸癌患者的腺瘤組織、癌組織及對應(yīng)的正常腸黏膜組織各65塊作為研究對象，運用免疫組化方法分析BMP-9和細(xì)胞增殖因子Ki-67在這些組織中的表達(dá)情況。結(jié)果 在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中，BMP-9的陽性率分別為68%（44/65）、91%（59/65）和95%（62/65），BMP-9在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平高于腺瘤組織（P＜0.05），腺瘤組織中的表達(dá)水平高于正常腸黏膜組織（P＜0.05）；結(jié)直腸癌組織中BMP-9的表達(dá)水平與腫瘤位置、腫瘤大體類型、腫瘤組織的分化程度、組織學(xué)類型、WHO組織學(xué)分級、脈管內(nèi)癌栓情況、TNM分期和血清腫瘤標(biāo)記物CEA、CA19-9水平均無相關(guān)性（P＞0.05）；結(jié)直腸組織中BMP-9表達(dá)水平與Ki-67表達(dá)水平無顯著相關(guān)性（P＞0.05），與腺瘤的臨床病理學(xué)指標(biāo)均無顯著相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論 BMP-9在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤和癌組織中的表達(dá)呈遞增趨勢，說明BMP-9對于結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生、發(fā)展可能起一定的促進(jìn)作用。

骨成形蛋白9；Ki-67；結(jié)直腸腫瘤；腺瘤

網(wǎng)絡(luò)出版時間：2015-04-14 09:52 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.3275.R.20150414.0952.001.html

結(jié)直腸癌是世界第3大惡性腫瘤，也是國內(nèi)腫瘤死亡的第5大主要原因［1-2］。從腺瘤到腺癌的連續(xù)發(fā)展過程體現(xiàn)了大多數(shù)結(jié)直腸腫瘤患者正常腸上皮發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變的生物學(xué)行為［3-4］。因此，清楚結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)行為顯得尤為重要。這就需要一種新的結(jié)直腸組織表達(dá)的分子標(biāo)記物來預(yù)測結(jié)直腸腫瘤發(fā)生、發(fā)展的風(fēng)險，其將會在腫瘤患者個體化診療及改善結(jié)腸癌患者預(yù)后等方面有很大的指導(dǎo)意義［5-6］。骨成形蛋白9（bone morphogenetic protein-9，BMP-9）是TGF-β超家族的成員之一，也叫做生長分化因子2（growth differentiation factor-2，GDF-2）［7］。BMP-9通過調(diào)控各種不同的細(xì)胞生長過程如增殖、分化、侵襲、存活及凋亡在體內(nèi)發(fā)揮著各種生理作用［8-10］，包括骨形成、肝網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能、造血功能、神經(jīng)分化功能、體內(nèi)血糖穩(wěn)態(tài)、體內(nèi)鐵離子平衡和新生血管形成［11-17］。大量實驗研究證實，BMP-9也參與了腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程［18-26］。與BMP-9相關(guān)的腫瘤研究已有很多，但對于BMP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移方面的研究目前還沒有。因此，在本實驗中，我們通過對臨床結(jié)直腸正常黏膜、結(jié)直腸腺瘤和結(jié)直腸癌病理切片進(jìn)行BMP-9和Ki-67免疫組化染色，比較BMP-9在正常結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸腺瘤和結(jié)直腸癌組織中表達(dá)情況，并分析BMP-9在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況與臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性，探討B(tài)MP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及臨床病理意義。

材料和方法

1 標(biāo)本采集 收集本院病理科2012年5月- 2014年10月被診斷為伴有腺瘤的結(jié)直腸癌患者病理組織標(biāo)本65例，取其腺瘤組織、癌組織及對應(yīng)的正常黏膜組織蠟塊共195塊，常規(guī)做成4μm的病理切片。本院血清腫瘤標(biāo)記物CEA和CA19-9水平檢測標(biāo)準(zhǔn)：CEA 0 ～ 3.4 ng/ml為正常，CA19-9 0 ～27 U/ml為正常。標(biāo)本相關(guān)信息見表1。

2 主要病理學(xué)指標(biāo) 腫瘤組織分期依據(jù)美國AJCC癌癥分期手冊（第7版）中的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)［27］。腫瘤組織分級按照WHO分級標(biāo)準(zhǔn)將高分化（管狀）腺癌、乳頭狀腺癌及中分化（管狀）腺癌歸為低級別，將低分化（管狀）腺癌、黏液腺癌、印戒細(xì)胞癌、未分化癌及髓樣癌歸為高級別。

3 主要實驗試劑 BMP-9抗體（Abcam，ab35088）和Ki-67抗體（Abcam，ab15580）均購自美國Abcam公司，免疫組化二步增強液（PV-9000）和DAB染色試劑盒均購自北京中山金橋生物公司，胎牛血清（BSA，A1933）和蘇木素（MHS16）購自美國Sigma公司，中性樹膠購自英國AGTC（HS-103-100ML）生物公司。

4 免疫組化檢測 石蠟病理組織切片首先進(jìn)行烤片并置于二甲苯中進(jìn)行脫蠟處理，然后過梯度乙醇水化。在用純水洗過后，進(jìn)行抗原修復(fù)，BMP-9為pH 6.0檸檬酸鈉抗原修復(fù)液高壓修復(fù)，Ki-67為pH 6.0檸檬酸鈉抗原修復(fù)液煮沸修復(fù)。完成后，使其緩慢恢復(fù)室溫。然后用1%胎牛血清封閉1 h。分別用濃度為1∶100的BMP-9抗體和1∶250的Ki67抗體4℃過夜。然后，用二步染色增強試劑盒及DAB染色試劑盒進(jìn)行染色，用蘇木素復(fù)染后，進(jìn)行中性樹膠封片處理。每次染色均設(shè)有用封閉液（1% BSA）代替一抗的陰性對照。

5 免疫組化染色半定量評判標(biāo)準(zhǔn) 1）BMP-9根據(jù)染色強度分為4個等級：0級（無著色）評0分，1級（淡黃色）評1分，2級（黃色）評2分，3級（棕黃色）評3分。根據(jù)陽性細(xì)胞比例分為5個等級：0級（＜5%）評0分，1級（5% ～ 25%）評1分，2級（25% ～ 50%）評2分，3級（50% ～ 75%）評3分，4級（＞75%）評4分。最終評分根據(jù)兩者乘積，總分為0 ～ 12分，分為4級：0分為陰性（-），1 ～3分為弱陽性（+），4 ～ 7分為中等陽性（++），8 ～ 12分為強陽性（+++）。2）Ki-67免疫組化染色結(jié)果根據(jù)陽性細(xì)胞比例評估：陽性細(xì)胞數(shù)所占比例＜10%為陰性（-），10% ～ 25%為弱陽性（+），25% ～ 50%為中度陽性（++），＞50%為強陽性（+++）。

6 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件。χ2檢驗進(jìn)行組間率的比較，相關(guān)分析采用Spearman等級相關(guān)方法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

表1　臨床標(biāo)本的主要信息Tab. 1　Main information of clinical specimen

結(jié)　果

1 BMP-9在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中的表達(dá) BMP-9陽性染色主要定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上，細(xì)胞核著色很弱或者幾乎不著色。在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中，BMP-9的陽性率分別為68%（44/65）、91%（59/65）和95%（62/65）。Spearman等級相關(guān)分析，在正常腸黏膜、腺瘤和腺癌組織中BMP-9的表達(dá)水平有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較，BMP-9在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平高于腺瘤組織（r = 0.221，P＜0.05），腺瘤組織中的表達(dá)水平高于正常腸黏膜組織（r = 0.572，P＜0.05），提示BMP-9在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)較高，腺瘤組織次之，在正常腸黏膜中表達(dá)最低。見圖1、表2。

2 Ki-67在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中的表達(dá) Ki-67陽性染色定位于細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜不著色。在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中，Ki-67的陽性率分別為82%（53/65）、100%（65/65）和98%（64/65）。Spearman等級相關(guān)分析，在正常腸黏膜、腺瘤和腺癌組織中Ki-67的表達(dá)水平有統(tǒng)計學(xué)差異（r = 0.711，P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較，Ki-67在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平高于腺瘤組織（r = 0.506，P＜0.05），腺瘤組織中的表達(dá)水平高于正常腸黏膜組織（r = 0.546，P＜0.05），提示BMP-9在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)較高，腺瘤組織次之，在正常腸黏膜中表達(dá)最低。見圖1、表2。

3 結(jié)直腸腺瘤組織中BMP-9的表達(dá)水平與病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性 結(jié)直腸腺瘤組織中BMP-9的陽性表達(dá)與腺瘤的位置、腺瘤的單、多發(fā)性、腺瘤的組織學(xué)類型及腺瘤的不典型增生均無相關(guān)性（P＞0.05） （表3）。其中，在腺瘤上皮的不典型增生分度中，BMP-9表達(dá)陽性率在輕度不典型增生中為86%（25/29），在中度不典型增生中為96%（26/27），在重度不典型增生中為89%（8/9）。

4 癌組織中BMP-9的表達(dá)與臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性 結(jié)直腸癌組織中BMP-9的陽性表達(dá)與癌腫位置、腫瘤大體類型、腫瘤組織的分化程度、組織學(xué)類型、WHO組織學(xué)分級、脈管內(nèi)癌栓情況、TNM分期和血清腫瘤標(biāo)記物CEA、CA19-9水平均無相關(guān)性（P＞0.05）。見表3。

圖 1　BMP-9和Ki-67在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中的表達(dá)情況（400×）A： BMP-9在正常腸黏膜組織中的表達(dá)； B： BMP-9在腺瘤組織中的表達(dá)； C： BMP-9在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)； D： Ki-67在正常腸黏膜組織中的表達(dá)； E： Ki-67在腺瘤組織的表達(dá)； F： Ki-67在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)Fig. 1　Expressions of BMP-9 and Ki-67 in colorectal carcinoma， adenoma and normal mucosa （original magnification： 400×）A： expression of BMP-9 in normal colorectal mucosa； B： expression of BMP-9 in colorectal adenoma； C： expression of BMP-9 in colorectal carcinoma； D： expression of Ki-67 in normal colorectal mucosa； E： expression of Ki-67 in colorectal adenoma； F： expression of Ki-67 in colorectal carcinoma

表2　BMP-9和Ki-67在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤及癌組織中的表達(dá)Tab. 2　Expressions of BMP-9 and Ki-67 in specimens of colorectal carcinoma， adenoma and normal mucosa

表3　BMP-9的表達(dá)水平與臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系Tab. 3　Relationship between expressions of BMP-9 and clinicopathological characteristics of colorectal adenoma

5 癌組織中BMP-9的表達(dá)與Ki-67表達(dá)的相關(guān)性 Spearman等級相關(guān)分析結(jié)果顯示，結(jié)直腸組織中BMP-9表達(dá)與Ki-67表達(dá)無顯著相關(guān)性（r = -0.024，P＞0.05）。

討　論

早在20世紀(jì)50年代，Jackman和Mayo將Dukes最先提出的結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生大部分是由良性的腺瘤發(fā)展而來的理論正式定義為“正常腸黏膜—腸腺瘤—腺癌”順序［28］。在形態(tài)學(xué)上，也可以發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸上皮增生、腺瘤再到癌變各個階段的發(fā)生以及相應(yīng)染色體的改變。這也體現(xiàn)了結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個多步驟、多階段及多基因參與的生物學(xué)事件。這一多步驟的復(fù)雜過程就使得臨床上結(jié)直腸癌的診治變得異常困難，如早期結(jié)直腸癌微小病灶漏診率較高，治療過程中的藥物耐受等。因此，對結(jié)直腸腫瘤新的分子學(xué)標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)對于臨床結(jié)直腸癌的診治意義重大。BMP-9參與人體內(nèi)眾多的生理病理過程，其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展方面的研究已有很多，研究總結(jié)發(fā)現(xiàn)，BMP-9在腫瘤組織中的表達(dá)和對腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移的作用都具有種屬特異性，即在不同的腫瘤中表達(dá)和所發(fā)揮的作用不同。目前，BMP-9在甲狀腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、肝細(xì)胞癌、骨肉瘤、骨髓瘤等多種腫瘤組織中已有相關(guān)研究，而對于結(jié)直腸癌的相關(guān)研究尚未見報道。因此，本實驗將首次研究BMP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的表達(dá)情況，免疫組化染色結(jié)果提示，BMP-9主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞膜和細(xì)胞核中的表達(dá)較弱或者幾乎不表達(dá)；統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明，BMP-9在正常腸黏膜上皮、腺瘤和腺癌組織中的表達(dá)呈遞增趨勢。同時，我們也對腺瘤組織中BMP-9的表達(dá)和腺瘤的病理學(xué)特征進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在中、重度不典型增生的腺瘤上皮中BMP-9的陽性表達(dá)率高于輕度不典型增生。此外，我們在結(jié)直腸組織BMP-9的表達(dá)水平與臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性研究中發(fā)現(xiàn)，BMP-9表達(dá)水平與臨床病理學(xué)指標(biāo)均無明顯相關(guān)性。同時，我們也對細(xì)胞增殖因子Ki-67和BMP-9表達(dá)情況進(jìn)行了相關(guān)性分析，并未發(fā)現(xiàn)在結(jié)直腸正常腸黏膜上皮、腺瘤和腺癌組織中BMP-9的表達(dá)水平與增殖指標(biāo)存在相關(guān)性，提示BMP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中所發(fā)揮的作用可能與細(xì)胞增殖作用不大。

本研究首次對BMP-9在結(jié)直腸發(fā)生、發(fā)展過程中不同組織中的表達(dá)情況進(jìn)行了研究，旨在探索在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中BMP-9所起的作用。也分析了結(jié)直腸腺瘤和腺癌中BMP-9的表達(dá)與臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性，這對結(jié)直腸癌的臨床診療有極其重要的作用。本實驗所選病例為伴發(fā)腺瘤的結(jié)直腸癌患者，所取的正常腸黏膜組織亦屬于相應(yīng)的同一患者，這一自身對照大大減少了個體組織差異性所帶來的影響；同時，用于BMP-9和Ki-67的免疫組化染色切片也是出自于同一個組織蠟塊，這也為分析BMP-9和Ki-67的相關(guān)性時提供了較好的對比性，在實驗設(shè)計上具有一定的創(chuàng)新性。但是由于存在納入研究條件的限制和病源受限的問題，致使納入研究的病例數(shù)不足，尚不能得出較為可靠的結(jié)論；在染色條件方面，Miyamoto等［29］、Pecina-Slaus等［30］、楊其昌［31］、樊祥山［32］實驗中所用的組織芯片實驗效率高、實驗對比度好，能夠極大地降低染色實驗條件前后不一致所帶來的影響，而本實驗中涉及的免疫組化切片數(shù)量多，在分批染色時雖然固定了統(tǒng)一的染色步驟和染色時間，但也會存在一定的前后染色條件差異，如所用試劑批次不一、染色環(huán)境溫度的差異等，都會對實驗結(jié)果產(chǎn)生一定的影響；此外，在進(jìn)行免疫組化染色結(jié)果評判方面，雖然采用了國內(nèi)外公認(rèn)的半定量免疫組化評判標(biāo)準(zhǔn)（見上述免疫組化染色評判標(biāo)準(zhǔn)），但切片質(zhì)量和抗原修復(fù)的影響（比如切片組織的折疊、脫落等）、組織表達(dá)蛋白強弱的個體差異性和主觀因素會對染色結(jié)果的評判產(chǎn)生一定影響，而Guo等［33］用Image-Pro Plus圖像分析軟件對免疫組化結(jié)果進(jìn)行較為客觀的定量評估，這在一定程度上避免了本實驗中染色結(jié)果評判過程中的多種干擾因素。

本實驗通過對正常腸黏膜上皮組織、結(jié)直腸腺瘤組織和結(jié)直腸癌組織進(jìn)行BMP-9和增殖指標(biāo)蛋白Ki-67的免疫組化染色，發(fā)現(xiàn)BMP-9在正常腸黏膜上皮、腺瘤及腺癌這3種不同組織中的表達(dá)水平呈現(xiàn)逐步遞增趨勢。這在一定程度上說明了在“正常腸黏膜—腸腺瘤—腺癌”的經(jīng)典結(jié)直腸癌演變序列中，BMP-9可能起著促進(jìn)結(jié)直腸腫瘤發(fā)生、發(fā)展的作用。這一研究結(jié)果不僅發(fā)現(xiàn)了BMP-9在結(jié)直腸腫瘤這一新領(lǐng)域所發(fā)揮的作用，使我們對BMP-9的生理病理作用有更為深刻的了解；更重要的是，也確定了BMP-9這一新的結(jié)直腸癌分子生物學(xué)標(biāo)記物，更加完善了結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展的作用機(jī)制。這一結(jié)論的確立，對于臨床上檢測結(jié)直腸癌早期進(jìn)展情況和預(yù)測腫瘤預(yù)后有極其重要的指導(dǎo)意義。對于結(jié)直腸腫瘤的高危人群，我們可以對其定期進(jìn)行正常腸黏膜活檢，病理檢測腸黏膜中BMP-9的表達(dá)水平，來預(yù)測結(jié)直腸腫瘤發(fā)生的風(fēng)險；對于臨床上結(jié)直腸腺瘤切除或者活檢的患者，病理檢測腺瘤組織中BMP-9的表達(dá)情況，進(jìn)而推測腺瘤惡變的可能性。BMP-9的表達(dá)水平可以作為正常腸上皮和腺瘤惡變程度的一個判定指標(biāo)，在臨床上可以結(jié)合其他病理學(xué)特征，對結(jié)直腸癌的高危人群的預(yù)后做出一個綜合的判定。若BMP-9表達(dá)水平較高，我們可以考慮預(yù)防性給予抗腫瘤干預(yù)治療，來削弱或阻斷“正常腸黏膜—腸腺瘤—腺癌”這一發(fā)展過程，提前預(yù)防結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生。上述措施在結(jié)直腸癌早期發(fā)現(xiàn)和降低結(jié)直腸癌的發(fā)生率方面都有著非常重要的臨床指導(dǎo)意義。

我們的實驗通過免疫組化實驗證實了BMP-9在“正常腸黏膜—腸腺瘤—腺癌”這一結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的遞增趨勢，但BMP-9與Ki-67的表達(dá)水平對腺瘤、腺癌的大部分臨床病理學(xué)指標(biāo)的影響差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，考慮可能是納入研究的病例數(shù)不足、染色條件前后一致性不好和免疫組化染色結(jié)果評判偏差等多方面的原因。因此，在以后的實驗研究中，我們可以考慮適當(dāng)擴(kuò)大樣本量，使用組織芯片和運用Image-Pro Plus或其他圖像分析軟件對免疫組化結(jié)果進(jìn)行定量評估等實驗設(shè)計，使BMP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中呈遞增趨勢這一結(jié)論更具說服力，同時進(jìn)一步研究確定BMP-9表達(dá)水平與腺瘤、腺癌的臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性。另外，在實驗中，我們也發(fā)現(xiàn)了BMP-9在正常腸上皮黏膜組織的細(xì)胞核中有一定的表達(dá)，在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)極弱的現(xiàn)象；同時也發(fā)現(xiàn)了在腺瘤和腺癌組織中，BMP-9在細(xì)胞核中不表達(dá)，而在細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞膜中存在著一定表達(dá)的現(xiàn)象。這一現(xiàn)象也就是在“正常腸黏膜—腸腺瘤—腺癌”組織演變過程中，BMP-9出現(xiàn)了核/質(zhì)減少情況。但由于免疫組化實驗的蛋白表達(dá)定位局限性，這一BMP-9的核-質(zhì)轉(zhuǎn)變的結(jié)論也存在著較大的爭議。因此，在以后的研究中，可以考慮結(jié)合組織免疫熒光共染技術(shù)，更明確地定位BMP-9的表達(dá)；同時可考慮分別提取正常腸黏膜、腺瘤和結(jié)直腸癌的組織和（或）細(xì)胞中的核蛋白，細(xì)胞質(zhì)蛋白和膜蛋白，通過Western blot實驗對BMP-9的表達(dá)進(jìn)行定量分析，進(jìn)一步鞏固BMP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中呈遞增趨勢這一結(jié)論，同時探索BMP-9在“正常腸黏膜—腸腺瘤—腺癌”演變過程中的核-質(zhì)轉(zhuǎn)化情況，為進(jìn)一步研究BMP-9在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機(jī)制提供線索。本研究僅對BMP-9在正常腸黏膜上皮組織、腺瘤組織和結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況做了相關(guān)研究，得出了BMP-9有促進(jìn)結(jié)直腸腫瘤發(fā)生、發(fā)展的作用，但并未進(jìn)行相關(guān)機(jī)制的研究。Herrera等［19］研究發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌中BMP-9可以通過其受體活化素類似物激酶（activin like kinase，ALK）Ⅱ型受體-Smad1-Smad4途徑促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖，Li等［20］和Herrera等［21］實驗證實，BMP-9能誘發(fā)肝細(xì)胞癌的EMT，進(jìn)而影響肝細(xì)胞癌的侵襲、轉(zhuǎn)移過程，Yoshimatsu等研究發(fā)現(xiàn)，BMP-9能通過ALK1抑制腫瘤進(jìn)展過程中淋巴管形成，進(jìn)而抑制腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移過程。因此，在以后的關(guān)于結(jié)直腸癌BMP-9研究中，可以逐步探索BMP-9影響結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制。這一機(jī)制一旦明確，對臨床上更好地制訂結(jié)直腸癌患者個體化診療方案、評估腫瘤進(jìn)展情況及結(jié)直腸癌患者臨床預(yù)后等方面都會產(chǎn)生較為重大的意義。

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Expression of BMP-9 in development and progression of colorectal carcinoma and its clinical significance

FAN Yinjie， WANG Wei， SUN Hongzhi
Liaoning Medical University， Jinzhou 121001， Liaoning Province， China
Corresponding author: SUN Hongzhi. Email: cmushz@163.com

Objective To investigate the expression of BMP-9 （bone morphogenetic protein-9） in colorectal cancer （CRC） and the relationship between BMP-9 and clinicopathological characteristics of CRC. Methods The colorectal adenoma and carcinoma tissues and its corresponding normal colorectal mucosa from 65 patients with a pathologically proven diagnosis of colorectal adenoma and adenocarcinoma from the department of pathology in the First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University from May 2012 to October 2014 were examined for BMP-9 and cell proliferative factor Ki-67 expressions using immunohistochemistry. Results The positive rate of BMP-9 expression in the normal colorectal mucosa， adenoma and colorectal carcinoma was 68% （44/65）， 91%（59/65） and 95% （62/65）， respectively. The expression of BMP-9 in colorectal carcinoma tissues was significantly higher than that in adenoma tissues （P＜0.05）， and the expression of BMP-9 in adenoma tissues was higher than that in normal mucosa （P＜0.05）. However， there was no correlation between expression of BMP-9 and tumor location and types， degree of differentiation， histological type， WHO histological classification， vessel cancer embolus， TNM stage and the level of tumor marker CEA and CA19-9 in the serum of CRC （P＞0.05）. The expression of BMP-9 was not correlated to the level of cell proliferative factor Ki-67 （P＞0.05）. There was no correlation between expression of BMP-9 and clinicopathological characteristics in colorectal adenoma （P＞0.05）. Conclusion The increasing level of BMP-9 in normal colorectal mucosa- adenoma- carcinoma tissues indicates that BMP-9 may promote the development and progression of colorectal carcinoma.

bone morphogenetic protein-9； Ki-67； colorectal neoplasms； adenoma

R 735.3

A

2095-5227（2015）07-0728-06

10.3969/j.issn.2095-5227.2015.07.024

2015-02-04

基金課題：吳階平醫(yī)學(xué)基金會臨床科研專項資助基金（320.6750.1393）；遼寧省科學(xué)技術(shù)計劃項目（2013225305）

Supported by the special funds of Wu Jie-ping medical foundation of clinical research （320.6750.1393）； Science and Technology Plan Projects of Liaoning Province （2013225305）

樊銀杰，男，在讀碩士。研究方向：消化道惡性腫瘤。Email: 979920276@qq.com

孫宏治，男，博士生導(dǎo)師，教授。Email: cmushz@163. com