急性下呼吸道感染患兒病原學(xué)分析及其與哮喘發(fā)作的關(guān)系

付卓，萬莉雅，徐勇勝，郭偉，鄭躍杰

急性下呼吸道感染患兒病原學(xué)分析及其與哮喘發(fā)作的關(guān)系

付卓1，萬莉雅1，徐勇勝1，郭偉1，鄭躍杰2△

目的 研究下呼吸道感染（LRTI）患兒全年的呼吸道病毒感染情況以及呼吸道病毒感染導(dǎo)致哮喘發(fā)作的關(guān)系。方法 選擇2013年5月—2014年4月來我院的急性LRTI患兒231例為研究對象。從鼻咽抽出液中分離呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（AV）、副流感病毒（PIV）、流感病毒（IFV）和鼻病毒（RV）進行多重PCR擴增。應(yīng)用熒光免疫實驗測定血清特異性IgE水平，如果數(shù)值超過0.35 IU/mL則可認(rèn)定為特異敏感性。結(jié)果 RSV是引起住院患兒毛細(xì)支氣管炎的最常見病原，AV易導(dǎo)致肺炎。哮喘發(fā)作更易由RV和IFV感染引起，而IFV則是支氣管炎的主要病原。結(jié)論 RV和IFV與具有特應(yīng)敏感性住院患兒的哮喘急性發(fā)作有關(guān)。

哮喘；變應(yīng)原；正黏病毒科；鼻病毒屬；兒童；下呼吸道感染

兒童急性下呼吸道感染性疾?。╨ower respiratory tract infection，LRTI）多是由呼吸道病毒引起的。呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（AV）、副流感病毒（PIV）、流感病毒（IFV）和鼻病毒（RV）是導(dǎo)致兒童急性下呼吸道感染最常見的病原體。這些病毒的活性通常具有季節(jié)性，且根據(jù)宿主年齡、病毒的毒力和被感染的氣道的不同引起不同類型的下呼吸道感染［1-2］。在兒童急性LRTI中，哮喘急性發(fā)作是嚴(yán)重影響小兒身心健康的疾病［3］。過敏原引起的特應(yīng)性致敏作用是哮喘疾病進程中最主要的危險因素之一，該特應(yīng)性往往存在于3歲以上哮喘患兒中［4］。呼吸道病毒感染會阻礙機體對變應(yīng)原的耐受，誘導(dǎo)變應(yīng)原產(chǎn)生致敏作用［5］，同時增加機體對氣源性過敏原的敏感性，使炎癥長時間存在，導(dǎo)致氣道高反應(yīng)性。在哮喘發(fā)作的兒童中，特異性病毒感染與過敏原致敏作用之間的相關(guān)性少有報道。本研究通過對下呼吸道感染患兒的病原學(xué)分析，研究呼吸道病毒感染與過敏原致敏作用對兒童急性哮喘的誘發(fā)作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年5月—2014年4月我院231例急性LRTI住院患兒為研究對象，依據(jù)參考文獻［6］進行診斷。男130例，女101例。年齡16個月～10歲。其中肺炎120例、支氣管炎20例、毛細(xì)支氣管炎66例、哮喘25例。鼻咽抽提物中 RSV感染 109例（47.2%）、RV感染46例（19.9%）、AV感染36例（15.6%）、IFV感染26例（11.3%）、PIV感染14例（6.0%）。所有患兒均記錄過敏性疾病的家族史。

1.2 嗜酸性粒細(xì)胞（TEC）總數(shù)和血清總IgE水平檢測 流式細(xì)胞儀（Beckman Coulter Pasadena CA，USA）檢測血液嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)，熒光免疫實驗（ImmunoCAP 250，Phadia，Uppsala，Sweden）進行貓、狗、蟑螂、鏈格孢屬、戶塵螨、粉塵螨、草、樹、牛奶、雞蛋、大豆和花生的血清總IgE水平和特異性IgE水平。如果1個以上過敏原的特異性IgE水平達到0.35 IU/mL以上則認(rèn)為具有特應(yīng)性致敏作用。

1.3 鼻咽樣本采集和病毒分析 就診當(dāng)天，使用一次性電動吸痰器插入到鼻孔內(nèi)5～7 cm處，溫和緩慢地吸取患兒鼻咽樣本。為了避免交叉污染，使用一次性手套操作，且吸取過程中避免任何液體進入鼻腔。通過QIAamp病毒RNA小提試劑盒（Qiagen，Hilden，Germany）進行抽提鼻咽抽吸物中病毒的 RNA。使用 cDNA合成試劑盒 （Fermentas，Burlington，ON，Canada）合成cDNA。通過多重逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測5種病毒（AV、RSV、RV、PIV和IFV）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 13.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，對非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，進行對數(shù)轉(zhuǎn)換。多組間比較采用單因素方差分析，多重比較采用Bonferroni檢驗。計數(shù)資料比較采用卡方（χ2）檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同呼吸道病毒感染患者的情況比較 與AV、RV、IFV感染引起的LRTI相比，RSV病毒感染者發(fā)病年齡更小。IFV病毒主要感染大齡兒童，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。各病毒組性別差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與AV感染相比，RV感染引起的LRTI的TEC水平較高（P＜0.05）。在各病毒感染組中，血清總IgE水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

2.2 不同疾病患兒病毒的感染情況 哮喘和支氣管炎患兒的年齡高于肺炎和毛細(xì)支氣管炎患兒。毛細(xì)支氣管炎的男患兒較肺炎、支氣管炎和哮喘多。AV則易導(dǎo)致肺炎，而RSV病毒更易引起毛細(xì)支氣管炎。哮喘發(fā)作更易由RV和IFV感染引起，而IFV則是支氣管炎的主要病原（P＜0.05），見表2。

2.3 不同疾病患兒的特應(yīng)性特征 特應(yīng)性致敏作用在肺炎和哮喘患兒中發(fā)病率均高于毛細(xì)支氣管炎患兒（P＜0.05）。與肺炎和支氣管炎患兒相比，哮喘患兒血液TEC明顯增加，與肺炎患兒比較，哮喘患兒血清總IgE水平也增高（P＜0.05），見表3。

Tab.1 Comparison of clinical data between different respiratory viral infections表1 不同呼吸道病毒感染患者的情況比較

Tab.2 The different virus infections situation of children with various respiratory tract diseases表2 不同呼吸道疾病患兒病毒的感染情況

Tab.3 Atopic characteristics in children with various respiratory tract diseases表3 不同呼吸道疾病患兒的特應(yīng)性特征

3 討論

急性病毒性呼吸道感染可誘發(fā)兒童哮喘發(fā)作［4］。研究表明，引起兒童哮喘的病毒多數(shù)是RV和IFV，而引起幼兒哮喘的病毒多數(shù)是RSV和RIV［5］。高濃度過敏原引起的致敏作用與呼吸道感染所致哮喘發(fā)作之間存在協(xié)同作用［7］。

感染不同病毒的患兒，其臨床診斷是相對清楚的。本研究結(jié)果顯示，與其他病毒相比，AV感染多數(shù)表現(xiàn)為肺炎，RSV通常可在急性毛細(xì)支氣管炎患兒中檢測出來。RV導(dǎo)致哮喘加重的可能性較大，與韓國的研究結(jié)果一致［9-10］。在本研究中發(fā)現(xiàn)，與其他病毒相比，由RV病毒引起的LRTI患者血液TEC的水平較高。Kato等［11］發(fā)現(xiàn)，在哮喘兒童中RV病毒感染使TEC陽離子蛋白（ECP）表達增加。這些結(jié)果說明RV病毒與TEC炎癥有關(guān)［12］。

本研究結(jié)果證實，與其他病毒相比，RV會造成急性哮喘患兒易發(fā)生致敏化和感染。有研究表明，RV在急性哮喘加重和哮喘進程中起重要作用［4］。有一項研究將RV病毒接種至輕度哮喘者后發(fā)現(xiàn)其氣道高反應(yīng)性增加，且痰中的ECP也隨之增加［5］。過敏原致敏作用是RV導(dǎo)致學(xué)齡兒童哮喘疾病的高風(fēng)險因素［13］。過敏原敏感性兒童更易患有病毒呼吸道疾病和哮喘。而非敏感性兒童在感染時常無癥狀。本研究結(jié)果與先前的報道一致，這說明RV感染與哮喘加重之間存在相關(guān)性。RV和特應(yīng)性致敏作用之間的關(guān)系是因為低水平的干擾素（IFN）-γ使得過敏性機體對RV較為敏感，特應(yīng)性敏感可以激發(fā)RV受體和細(xì)胞間黏附分子1表達［14］。有研究證實，流感和過敏原致敏作用之間存在相關(guān)性，哮喘兒童患流感的概率也隨之增加［15］。

本研究的局限性是樣本量小、研究群體的選擇范圍小，還應(yīng)進行多中心大樣本的對比研究。另外，本研究為橫向研究，不能證實在哮喘發(fā)作時RV或IFV感染與過敏原致敏作用之間的因果關(guān)系，而不是一個群組研究。有待大規(guī)模群組研究深入探討。

［1］Ruuskanen O，Lahti E，Jennings LC，et al.Viral pneumonia［J］.Lancet，2011，377（9773）:1264-1275.doi:10.1016/S0140-6736（10）61459-6.

［2］Huijskens EG，Biesmans RC，Buiting AG，et al.Diagnostic value of respiratoryvirus detection in symptomatic children using real-time PCR［J］.Virol J，2012，9（1）:276.doi:10.1186/1743-422X-9-276.

［3］Cheng ZH，Liang M，Peng Y，et al.Relationship between the first wheezing with allergen related lower respiratory tract infection in children［J］.China Modern Doctor，2014，52（8）:138-140.［程子禾，梁敏，彭云，等.嬰幼兒下呼吸道感染伴首次喘息發(fā)作與過敏原的關(guān)系［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2014，52（8）:138-140］.

［4］Xi Y，Lai KF，Chen RC，et al.Clinical characteristics of cough variant asthma and its relationship with the classic asthma［J］.Chin J Asthma（Electronic Editi on），2011，5（3）:1-6.［席寅，賴克方，陳如沖，等.咳嗽變異性哮喘的臨床特征及其與典型哮喘的關(guān)系.中華哮喘雜志（電子版），2011，5（3）:1-6］.

［5］Liu YL.Investigate the common causes of asthmatic exacerbation in children with asthma in Qingdao area［J］.Medical Innovation of China，2013，10（9）:85-87.［劉艷麗.青島沿海地區(qū)兒童支氣管哮喘發(fā)作誘發(fā)因素分析.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（9）:85-87］.doi: 10.3969/j.issn.1674-4985.2013.09.046.

［6］Lin QQ.Clinical diagnosis and treatment of pediatric respiratory infections［J］.Medical Innovation of China，2013，10（10）:135-136.［林慶秋.兒科呼吸道感染的臨床診治措施分析［J］.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（10）:135-136］.doi:10.3939/j.issn.1674-4985.2013.10.078.

［7］Jartti T，Kuusipalo H，Vuorinen T，et al.Allergic sensitization is associated with rhinovirus-，but not other virus-，induced wheezing in children［J］.Pediatr Allergy Immunol，2010，21（7）:1008-1014.doi: 10.1111/j.1399-3038.2010.01059.x.

［8］Pedersen SE，Hurd SS，Lemanske RF Jr，et al.Global strategy for the diagnosis and management of asthma in children 5 years and younger［J］.Pediatr Pulmonol，2011，46（1）:1-17.doi:10.1002/ ppul.21321.

［9］Lim JS，Woo SI，Kwon HI，et al.Clinical characteristics of acute lower respiratory tract infections due to 13 respiratory viruses detected by multiplex PCR in children［J］.Korean J Pediatr，2010，53 （3）:373-379.doi.org/10.3346/jkms.2010.14.4.405.

［10］Reiche J，Jacobsen S，Neubauer K，et al.Human metapneumovirus: insights from a ten-year molecular and epidemiological analysis in Germany［J］.PLoS One，2014，9（2）:e88342.doi:10.1371/journal.pone.0088342.eCollection 2014.

［11］Kato M，Tsukagoshi H，Yoshizumi M，et al.Different cytokine profile and eosinophil activation are involved in rhinovirus-and RS virus-induced acute exacerbation of childhood wheezing［J］.Pediatr Allergy Immunol，2011，22（1 Pt 2）:e87-94.doi:10.1111/j.1399-3038.2010.01026.x.

［12］HU H.Cough variant asthma:progress in diagnosis and treatment ［J］.Med J Chin PLA，2014，39（5）:361-364.［胡紅.咳嗽變異性哮喘的診斷及治療進展［J］.解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2014，39（5）:361-364］.doi：10.11855/j.issn.0577-7402.2014.05.06.

［13］Olenec JP，Kim WK，Lee WM，et al.Weekly monitoring of children with asthma for infections and illness during common cold seasons ［J］.J Allergy Clin Immunol，2010，125（5）:1001-1006.e1.doi: 10.1016/j.jaci.2010.01.059.

［14］Saglani S.Viral infections and the development of asthma in children［J］.Ther Adv Infect Dis，2013，1（4）:139-150.doi:10.1177/ 2049936113497202.

［15］Kloepfer KM，Olenec JP，Lee WM，et al.Increased H1N1 infection rate in children with asthma［J］.Am J Respir Crit Care Med，2012，185（12）:1275-1279.doi:10.1164/rccm.201109-1635OC.

（2014-09-30收稿 2014-12-30修回）

（本文編輯 魏杰）

Pathogenic analysis of acute lower respiratory infections and its correlation with asthma exacerbations

FU Zhuo1，WAN Liya1，XU Yongsheng1，GUO Wei1，ZHENG Yuejie2△
1 Tianjin Children's Hospital，Tianjin 300074，China；2 Zunyi Medical University Shenzhen Children's Hospital
△Corresponding Author E-mail:yuejiez@sina.com

Objective To investigate the prevalence of year-round respiratory viral infection in children with lower respiratory tract infection（LRTI），and the relationship between respiratory viral infection and allergen sensitization in exacerbating asthma.Methods A total of 231 hospitalized children with acute LRTI were investigated from May 2013 to April 2014.The 5 most common respiratory viruses were isolated from nasopharyngeal aspirate using multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction，including respiratory syncytial virus（RSV），adenovirus（AV），parainfluenza virus（PIV），influenza virus（IFV）and rhinovirus（RV）.Atopic sensitization was defined if more than 1 serum specific immunoglobulin E level measured using immunofluorescence experiment was over 0.35 IU/mL.Results RSV was the most common pathogen of bronchiolitis in hospitalized children through the year.RV or IFV infections were more prevalent in asthma exacerbations compared to other LRTIs.AV was more likely to cause pneumonia.RV and IFV were associated with asthma exacerbations in children with atopic sensitization，but not in nonatopic children.Conclusion RV and IFV are associated with hospitalization for asthma exacerbation in children with atopic sensitization.

asthma；allergens；orthomyxoviridae；rhinovirus；child；lower respiratory infection

R725.6

A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.05.016

1天津市兒童醫(yī)院（郵編300074）；2遵義醫(yī)學(xué)院深圳兒童醫(yī)院

付卓（1977），女，主治醫(yī)師，碩士在讀，主要從事兒童呼吸疾病方面研究

△E-mail:yuejiez@sina.com