IL-- 8與乙型肝炎病毒感染的研究進(jìn)展

毛學(xué)鋒，任 蓉

玉林市中心血站檢驗科，廣西 玉林 537000

白細(xì)胞介素-8（interleukin,IL-8）作為一種最主要的趨化因子，對中性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等細(xì)胞有趨化作用，在抗病毒和局部炎癥反應(yīng)中起重要作用。乙型肝炎病毒（HBV）感染者感染后的結(jié)局可為急性肝炎、慢性肝炎、無癥狀攜帶者、也可發(fā)展為肝硬化、肝衰竭和肝細(xì)胞肝癌，此結(jié)局與IL-8緊密聯(lián)系。本文就IL-8與乙型肝炎病毒感染者的關(guān)系進(jìn)行綜述。

1 HBV感染的過程和結(jié)局

HBV屬于引起非細(xì)胞病變的嗜肝DNA病毒。HBV的感染和復(fù)制不會直接造成肝細(xì)胞的損傷［1］，而是：HBV侵入機(jī)體后，通過血液侵入肝細(xì)胞內(nèi)，復(fù)制、增殖成熟的HBV，這些成熟的HBV被釋放后，又侵入其它健康的肝細(xì)胞，如此不斷地感染和復(fù)制，從而激發(fā)自身的肝細(xì)胞發(fā)生了免疫反應(yīng)，最終誘發(fā)了肝細(xì)胞的免疫損傷。受感染的肝細(xì)胞迅速識別病毒DNA后，分泌I型干擾素（IFN-α/β）：其誘導(dǎo)肝細(xì)胞合成抗病毒蛋白，從而抑制病毒復(fù)制；IFN-α/β同時活化并誘導(dǎo)趨化肝內(nèi)的單核/巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（dendritic cells,DC）等免疫細(xì)胞，通過聚集活化的免疫細(xì)胞分泌干擾素γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、IL-8、白細(xì)胞介素12（IL-12）等細(xì)胞因子，最終控制和清除HBV,并吞噬、殺傷、溶解受感染的肝細(xì)胞；一些被吞噬的病毒顆粒和凋亡細(xì)胞碎片在溶酶體內(nèi)消化并加工成病毒抗原肽，之后呈遞給T、B淋巴細(xì)胞,從而產(chǎn)生針對HBV抗原特異性的細(xì)胞克隆，并加以增殖和分化，最后啟動適應(yīng)性免疫系統(tǒng)。病毒介導(dǎo)的免疫反應(yīng)被認(rèn)為是肝炎、肝硬化和原發(fā)性肝癌等肝臟損傷性疾病的病因［2］。

2 IL-8

2.1 IL-8簡介

IL-8又稱為趨化因子CXCL8（C-X-C motif Ligand 8），也被稱為 NAP-1（neutrophil activation protein 1），是第一個被克隆并含有ELR結(jié)構(gòu)的趨化因子，編碼基因3～10C定位于人第4號染色體（q19～q21），其堿基序列與PE4、IP-10有高度的同源性［3］。IL-8開放閱讀框架編碼一個含99個氨基酸的多肽，N端的信號肽也包括在內(nèi)。成熟的IL-8有多種分子形式，是在N端剪接的差異造成的，且最常見的是含72和78個氨基酸殘基的多肽［4］。IL-8結(jié)合趨化因子受體白細(xì)胞介素-8受體α（IL8RA，又叫CXCR1）和白細(xì)胞介素-8受體β（IL8RB,又叫CXCR2）后，不僅對中性粒細(xì)胞有很強(qiáng)的趨化作用，還對T淋巴細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞等有趨化作用［5］。中性粒細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞以及HBV感染的肝細(xì)胞等都能分泌IL-8，內(nèi)毒素（LPS）、白細(xì)胞介素1（IL-1）、TNF-α又可刺激其大量表達(dá)［6］。

2.2 IL-8與HBV的關(guān)系

IL-8是機(jī)體內(nèi)重要的炎癥遞質(zhì)，肝臟內(nèi)的肝細(xì)胞、星狀細(xì)胞、枯否細(xì)胞等細(xì)胞均能產(chǎn)生和分泌，與肝臟局部炎性反應(yīng)有關(guān)。其具有刺激細(xì)胞生長、促進(jìn)細(xì)胞分化和加速肝細(xì)胞急性期蛋白合成等功能，參與炎癥損傷過程，在HBV感染引起的肝炎、肝硬化和肝癌等肝臟損傷性疾病中起重要作用。

3 HBV感染者IL-8的表達(dá)

研究顯示，除隱匿性肝炎外，急性、慢性及重型乙型肝炎患者血清IL-8水平均高于健康對照者，這表明IL-8在清除體內(nèi)感染病毒中具有重要作用［7-10］。在慢性乙肝不同疾病階段血清細(xì)胞因子的研究中發(fā)現(xiàn)，活動期患者血清IL-8水平高于非活動期患者，而活動期患者血清IL-8與非活動期患者血清IL-8均高于健康對照者［1］，并且活動期患者外周血單個核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）中IL-8mRNA水平很高，特別是對干擾素治療無應(yīng)答的病人：病人在接受IFN-α治療治療期間，由于不能有效清除血中HBV，PBMCs中IL-8mRNA水平居高不下，導(dǎo)致肝臟炎癥損傷；而對干擾素治療有應(yīng)答的病人，其隨著治療的進(jìn)行，體內(nèi)HBV逐漸被有效清除或抑制了，PBMCs中IL-8mRNA水平逐步下降，這可能是機(jī)體的一種免疫自穩(wěn)方式［7］。HBV感染者血清中IL-8水平增高能誘導(dǎo)和促進(jìn)中性粒細(xì)胞趨向、粘附于血管內(nèi)皮細(xì)胞并損傷內(nèi)皮細(xì)胞，加重了肝臟炎癥細(xì)胞浸潤，使炎性介質(zhì)釋放更多，加劇肝臟局部炎癥反應(yīng)和肝細(xì)胞的損害［11］。

除HBV感染后的肝炎與IL-8的水平有關(guān)之外，研究表明，乙肝后肝硬化患者外周血中IL-8分子水平及其mRNA水平表達(dá)均升高，且病毒復(fù)制組較病毒非復(fù)制組高，表明患者病情嚴(yán)重程度也與IL-8的水平的高低與有關(guān)［12-13］。在HBV的作用下，除了肝細(xì)胞本身分泌IL-8外，還可誘導(dǎo)其合成大量TNF-α，過量的TNF-α可進(jìn)一步刺激肝細(xì)胞、枯否細(xì)胞、PBMCs、內(nèi)皮細(xì)胞等合成和釋放大量的IL-8；肝硬化患者存在一定程度腸內(nèi)菌群紊亂，部分腸道菌群產(chǎn)生LPS釋放入血，與TNF-α共同刺激單核/巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等合成分泌IL-8，使其血清IL-8水平偏高［14］。此外，肝硬化患者肝臟纖維組織增生可合成多種細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），并釋放致纖維化因子TGF-β和MCP-1、MIP-2等趨化因子，使血清IL-8水平進(jìn)一步升高，呈現(xiàn)明顯炎癥表現(xiàn)。隨著疾病進(jìn)程進(jìn)展，肝細(xì)胞受損加重，全身高動力循環(huán)，門脈高壓，多系統(tǒng)受累，血清IL-8水平不斷升高，以失代償期水平最高。在外周血高濃度IL-8的趨化作用下，大量淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等炎癥細(xì)胞聚集至肝臟感染部位，產(chǎn)生免疫應(yīng)答和（或）炎癥反應(yīng)［15］，在清除病毒感染的同分泌更多IL-8等炎癥因子，進(jìn)一步誘導(dǎo)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等在肝臟內(nèi)的聚集活化，肝星狀細(xì)胞在反復(fù)的炎癥刺激下分泌大量膠原蛋白，促進(jìn)肝臟纖維化，參與肝硬化疾病的進(jìn)展［16］。

還有研究發(fā)現(xiàn)IL-8與惡性腫瘤有關(guān)［17］。在以旱獺為實驗動物模型，探討IL-8在慢性乙肝和肝癌中的作用時，發(fā)現(xiàn)旱獺IL-8基因與人類IL-8基因相似，其同樣趨化中性粒細(xì)胞，可同時在肝癌組織和非肝癌組織表達(dá)，并在非肝癌組織表達(dá)高［18］。肝癌患者血清IL-8高于正常對照組，且發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的肝癌患者高于未轉(zhuǎn)移的肝癌患者［19］。原發(fā)性肝癌(PHC)患者血清IL-8水平高于對照組，HBV DNA陽性組和陰性組血清IL-8水平均高于對照組，且HBV DNA陽性組血清IL-8水平高于HBV DNA陰性組，其增高應(yīng)與HBV感染、肝細(xì)胞損害和肝纖維化有關(guān)［20］。據(jù)PHC患者手術(shù)前后血清IL-8及PMBC內(nèi)IL-8mRNA的研究結(jié)果顯示，手術(shù)前后兩者均高于對照組，且術(shù)后一周應(yīng)激性增高，3個月后仍高于正常水平［21-22］。其升高機(jī)制可能有：局部肝臟手術(shù)切除產(chǎn)生較大范圍的機(jī)械損傷，造成大量正常的肝細(xì)胞和癌細(xì)胞壞死，顯著增加入血的IL-8，致患者外周血表達(dá)短期內(nèi)應(yīng)激性增高；IL-8作為腫瘤細(xì)胞自分泌的生長因子誘導(dǎo)自身增殖，促進(jìn)腫瘤生長［23］；IL-8以旁分泌方式與白細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的趨化性因子受體結(jié)合促使白細(xì)胞進(jìn)入腫瘤組織，并引起內(nèi)皮細(xì)胞增殖形成新生血管，從而加速腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移［24］。

4 IL-8基因多態(tài)性與HBV感染的關(guān)系

細(xì)胞因子的水平與其基因多態(tài)性有關(guān)，不同的基因型有可能產(chǎn)生不同的蛋白或者改變轉(zhuǎn)錄效率，從而影響疾病的易感性及嚴(yán)重性［25］。IL-8基因定位于第4號染色體上,編碼IL-8的基因全長5.2kb,由4個外顯子和3個內(nèi)含子組成,在其轉(zhuǎn)錄起始點-251處存在A/T多態(tài)性。IL-8基因啟動子區(qū)-251A/T多態(tài)性中各基因組頻率(AA、AT、TT)和等位基因頻率在病例組與對照組差異顯著，但在慢性HBV感染輕度、中度和重度差異不明顯［26］?；蛐蜑锳A型、TA型的慢性HBV感染者其血清IL-8水平高于基因型為TT型的慢性HBV感染者［27］?；蛐蜑锳A的HBV感染者容易發(fā)展成慢性，而基因型為TT純合子的HBV感染者較難發(fā)展成慢性，A等位基因攜帶者是T等位基因攜帶者患慢性HBV感染風(fēng)險的3.08倍［26］。由于基因多態(tài)性受眾多因素（如種族背景、樣本數(shù)量等）影響，不同的人種、不同的地域、不同的病例來源都可能導(dǎo)致不一致的研究結(jié)果［27］，IL-8基因多態(tài)性與HBV感染結(jié)局的相關(guān)性，只有進(jìn)一步在更大的獨立患者樣本及家系中進(jìn)行遺傳學(xué)研究才能明確。

綜上所述，HBV感染機(jī)體后，介導(dǎo)以局部中性粒細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤為主的感染性疾病，并引起肝炎、肝硬化和肝癌等肝臟損傷性疾病。IL-8是機(jī)體最主要的炎癥因子，對多種免疫細(xì)胞有明顯趨化和功能活化作用，引起HBV感染者肝臟的局部炎癥反應(yīng)。IL-8的基因多態(tài)性對HBV感染的結(jié)局具有重要的影響。現(xiàn)IL-8的單克隆抗體已應(yīng)用于IL-8表達(dá)陽性的患者，且治療效果良好［28-29］，推測IL-8及其受體可能成為治療HBV感染的新靶位。

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