免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用分析

康淑英

(內(nèi)蒙古赤峰市寧城縣天義鎮(zhèn)政府，024200)

免疫膠體金快速診斷技術(shù)[1]最初應(yīng)用在尿液與血清絨毛膜促性腺激素的檢測中，后隨著我國科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，有專家學(xué)者提出膠體金可用于標(biāo)記物的替代酶，參與滲濾實驗，在人類免疫缺陷病毒抗體檢測試劑盒的生產(chǎn)中得到廣泛的應(yīng)用。免疫膠體金快速診斷技術(shù)具備操作方便、快捷等特點，在傳染病病原抗體、妊娠試驗中得到廣泛的應(yīng)用，但在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用處于初級階段。

1 免疫膠體金快速診斷技術(shù)的原理

固相載體通過微孔濾膜包被已知抗體或者是抗原，并加入待測樣本，通過毛細(xì)管虹吸或者是微孔膜滲濾等作用與包被后的抗體、抗原相結(jié)合，最后再與膠體金標(biāo)記物產(chǎn)生反應(yīng)。現(xiàn)階段，免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用分為兩種方法：免疫層析試驗與免疫滲濾試驗。

1.1 免疫層析試驗 將具備特異性的抗體或者是抗原固定在膜上，并將該范圍選作檢測帶。把膠體金標(biāo)記物放置于玻璃纖維結(jié)合釋放墊中進行干燥，且膠體金標(biāo)記物兩端分別連接在樣品墊與膜上，膜另外一端連接在吸水墊中。加入液體樣品，通過毛細(xì)血管發(fā)生擴散，從而移動，在此作用下，玻璃纖維中的標(biāo)記物會出現(xiàn)水化，與膠體金標(biāo)記物發(fā)生反應(yīng)，并向前泳動，一直到檢測線結(jié)束，檢測線截獲待測物與標(biāo)記物，顯示紅色。如果在樣品中部存在待測物，說明其和游離標(biāo)記物抵達質(zhì)控線位置，紅色是膠體金和質(zhì)控線發(fā)生反應(yīng)而顯示紅色。

1.2 免疫滲濾試驗 固相載體通過微孔濾膜把具備特異性的抗體或者是抗原進行固定，將吸水材料填滿滲濾裝置，并將固定好的固相載體置入，一般情況下，扁形盒上方有小孔，并在試驗過程中，把標(biāo)本盒金標(biāo)結(jié)合物分別滴在膜中，抗原抗體利用滲濾作用與膜上發(fā)生免疫結(jié)合并顯色。以待測物為基礎(chǔ)選擇不同的試驗方法，特別是在免疫球蛋白檢測試驗中，最好選擇捕獲法，而抗體檢測選擇間接法。

2 免疫膠體金快速診斷技術(shù)具備的優(yōu)勢

2.1 操作簡便 無需儀器設(shè)備輔助，利用滲濾試劑盒或者是試紙條就能夠完成試驗，且樣品在簡單處理后就可開展試驗。

2.2 特異性良好 免疫膠體金快速診斷技術(shù)在單克隆抗體的標(biāo)記中應(yīng)用較為廣泛，因而具備良好的特異性。

2.3 靈敏度良好 免疫膠體金快速診斷技術(shù)具備良好的靈敏度，并不受其特異性的影響。有的試驗操作中，靈敏度在1ng/ml或者是略低水平，少數(shù)試驗的靈敏度不在該范圍中，利用免疫金銀染色法與生物素親合素系統(tǒng)能夠有效提高銀加強試驗的敏感度。

2.4 判定難度低 由于試驗顯色顏色非常明顯，因此可通過肉眼判斷陰、陽性。

2.5 迅速、快捷 免疫膠體金快速診斷技術(shù)在5—10min內(nèi)就能顯示試驗結(jié)果，明顯短于其他方法。

3 免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用

免疫膠體金快速診斷技術(shù)應(yīng)用于獸醫(yī)診斷中，不僅能夠檢測抗體，而且能夠針對病原進行檢測。

3.1 病原檢測效果 在病原檢測過程中，標(biāo)記膠體金、NC膜分別與兩種抗體包被，如果樣品為陽性，那么病原在與膠體金標(biāo)記體、NC膜發(fā)生反應(yīng)，顯色為紅色；如果樣品為陰性就不會出現(xiàn)上述現(xiàn)象。有專家學(xué)者在PRRSV斑點檢測免疫金滲濾法構(gòu)建過程中，進行交叉試驗與特異性阻斷試驗，試驗結(jié)果均顯示具備良好的特異性，且檢出率較高，具備很高的臨床應(yīng)用價值。

3.2 抗體檢測效果 免疫膠體金快速診斷技術(shù)在抗體檢測中應(yīng)用時，抗原需包被在NC膜中，而抗原標(biāo)記則利用膠體金。如果樣品為陽性，那么抗體與NC膜或者是標(biāo)記抗原發(fā)生反應(yīng)后，顯色為紅色；如果樣品為陰性，則不出現(xiàn)上述現(xiàn)象。

隨著我國科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，免疫膠體金快速診斷技術(shù)成為三大標(biāo)記物后的發(fā)展較為成熟的一種測定技術(shù)，具備操作方便、快捷、特異性高等特點，可完成定量檢測，因此在很多試驗中代替?zhèn)鹘y(tǒng)試驗中使用的ELISA等方法。免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)診斷中使用時，所需費用較低且安全環(huán)保，符合構(gòu)建環(huán)保型社會的要求，又不受到操作空間、地點的限制，因此在獸醫(yī)臨床診斷中將得到廣泛的應(yīng)用。

結(jié)語

綜上所述，隨著我國醫(yī)療技術(shù)的不斷提高，免疫膠體金快速診斷技術(shù)得到很大發(fā)展，屬于新型的一種診斷技術(shù)，逐漸與免疫熒光技術(shù)、放射免疫技術(shù)、免疫酶標(biāo)技術(shù)稱為臨床診斷中的四大免疫標(biāo)記技術(shù)，臨床應(yīng)用價值較高。免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用，創(chuàng)新了動物疫病的新的診斷模式，指明獸醫(yī)臨床診斷的發(fā)展方向。

[1]楊雪林,張福官,楊衛(wèi)華等.膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2010,16(2):36-37.

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