張掖市小反芻獸疫免疫效果檢測與分析

車小蛟 郭慧琳 何彥春 孟林明 李勇生 包永清

(1.甘肅省動物疫病預防控制中心，甘肅 蘭州 730046；2.甘肅省張掖市動物疫病預防控制中心，甘肅 張掖 734000；3.甘肅省甘南州動物衛(wèi)生監(jiān)督所，甘肅 合作 744000)

小反芻獸疫（Pestedes petits ruminants,PPR）是由小反芻獸疫病毒（Pestedes petits ruminants virus,PPRV）引起的，以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征的急性接觸性傳染病[1]，山羊和綿羊易感，山羊發(fā)病率和病死率均較高。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為法定報告動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。

PPR主要通過直接接觸傳染，患病動物的排泄物和分泌物是主要傳染源，尤其是感染后帶毒的羊更為危險。該病常呈現(xiàn)地方流行性，當易感動物增多時，可造成爆發(fā)流行[2]。我國在2007年首次在西藏發(fā)現(xiàn)該病以來，先后在新疆、甘肅、貴州、湖南以及黑龍江等21個省、自治區(qū)、直轄市發(fā)生，給當?shù)仞B(yǎng)羊業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失。我省自古浪縣發(fā)生小反芻獸疫疫情以來，全省對14個市州重點區(qū)域的羊只進行免疫接種，構建免疫屏障。為掌握我省張掖市羊只注射小反芻獸疫疫苗后抗體水平情況，評估防控效果，為今后制定防控措施提供科學依據(jù)，特開展此次免疫效果檢測與分析。

1 材料與方法

1.1疫苗和檢測試劑

小反芻獸疫活疫苗由新疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產(chǎn)，批號為201404；檢測試劑為中國動物衛(wèi)生與流行病學中心(青島)提供的小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒，批號為201428。

1.2被檢血清

采集張掖市6縣（區(qū)）小反芻獸疫活疫苗免疫后21天的規(guī)模場（戶）和散養(yǎng)戶羊血樣共1039份，離心分離血清，編號待檢，-20℃保存。

1.3儀器

單道移液器、多道移液器、生化培養(yǎng)箱、洗板機（COLUMBUS）、酶標儀（TecanSunrise）、普通離心機、一次性移液器吸頭等均由本單位實驗室提供。

1.4檢測方法

向酶標板陽性對照孔加入陽性血清50μL，陰性對照孔加入陰性血清50μL，酶標單抗對照孔加入稀釋液50μL，樣品孔每孔加入稀釋液25μL，樣品孔每孔加入待檢血清25μL，37℃生化培養(yǎng)箱孵育60min。棄去反應孔的液體，用洗滌液洗4次，每次每孔300μL。每孔加入酶標單抗50μL，37℃孵育30min，用洗滌液洗4次。每孔加入底物溶液50μL，室溫避光作用10-15min。最后，每孔加入終止液50μL，終止反應。用酶標儀在450nm波長下測定各孔OD450nm值，計算阻斷率。

1.5判定標準

陽性對照阻斷率（PB）＞60，陰性對照阻斷率（PB）<40，試驗結果有效；否則，應重新進行試驗。待檢樣品阻斷率（PB）＞50，判為陽性；待檢樣品阻斷率（PB）≤50，判為陰性。

2 結果

對6個縣（區(qū)）采集的1039份羊血清樣品進行了小反芻獸疫免疫抗體檢測，免疫抗體合格血清925份，平均合格率為89%，詳見表1。

表1 2014年張掖市小反芻獸疫抗體檢測結果

3 討論

3.1張掖市各縣（區(qū)）的樣品小反芻獸疫免疫抗體平均合格率達到70%以上，達到了國家規(guī)定的大于70%的標準，其中4個縣（區(qū)）的群體免疫密度達到90%以上。從數(shù)據(jù)上來看，張掖市小反芻獸疫免疫效果整體較好。由此可見，我們采取的防控措施是有效的，為本病的防控具有重要作用。

3.2本次試驗是首次對張掖市羊只進行PPR疫苗強制性免疫接種后的抗體合格率檢測。本次使用新疆天康畜牧生物技術股份有限公司的PPR活疫苗對本轄區(qū)內的各種健康羊只進行免疫接種，接種后未見PPR新病例和不良接種反應，表明PPR活疫苗的副作用小，安全可靠。

3.3當前，對小反芻獸疫尚無有效的治療措施，疫苗免疫是最為有效的手段之一[3]。在防疫工作中，要嚴格按照本地區(qū)動物疫病流行情況制定科學有效的免疫方案，切實做好小反芻獸疫的免疫工作,及時開展抗體檢測,認真做好補免工作,確保有效保護。

3.4加強監(jiān)測與流行病學調查[4]。在高風險區(qū)要主動監(jiān)測，對不明原因羊只死亡和臨床可疑羊要進行檢測、診斷，對疑似疫情要快速采樣確診。

3.5野生動物亦是小反芻獸疫疫病的易感動物，因此，嚴密監(jiān)控易感野生動物的活動，加大在野生小反芻獸群的遷移路線周圍及野生小反芻獸群活動區(qū)域羊只的監(jiān)測和免疫，防止帶毒野生動物向家養(yǎng)畜傳播，做好相關工作。

3.6加強宣傳教育，進一步強化養(yǎng)殖戶的防疫責任，讓養(yǎng)殖戶全面了解小反芻獸疫的危害和防疫的必要性，提高養(yǎng)殖戶依法防疫、自覺防疫的意識。

[1]李佳,何宗霖,白正輝,等.新疆阿克蘇地區(qū)羊小反芻獸疫免疫效果檢測與分析[J].草食家畜,2015（4）:49-51.

[2]何利昆,段亞良,谷志大.遼寧省小反芻獸疫疫苗臨床免疫效果跟蹤試驗及抗體水平動態(tài)觀察[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2014（8）:14-18.

[3]祁巧芬.小反芻獸疫免疫效果監(jiān)測報告[J].當代畜牧，2015（6）:29-18.

[4]谷修萍,楊翠紅,高代宏.小反芻獸疫流行特點及其防控策略[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2014（12）:87.