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    幾種泰山中草藥浸提物的抗疲勞作用研究

    2015-08-02 00:56:40趙新娟
    湖北體育科技 2015年7期
    關(guān)鍵詞:抗疲勞糖原黃精

    張 靜,楊 陽,趙新娟

    1 研究對象與目的

    通過對泰山四葉參、黃精、楤木復(fù)方的抗疲勞效果進(jìn)行研究,探討其組方效果,通過動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)其抗疲勞性功效,制成對人體安全無害的制劑,以增強(qiáng)處于亞健康狀態(tài)的人群體質(zhì),減輕甚至消除疲勞;也可用于運(yùn)動員的抗疲勞,提高運(yùn)動水平,進(jìn)而提高運(yùn)動成績。

    泰山四葉參(見圖1)又名羊乳、泰山參,為泰山名藥之一。泰山四葉參含多種維生素、皂苷、多酮、齊墩果酸及50種揮發(fā)油,主要以根入藥,具有清熱解毒、強(qiáng)壯滋補(bǔ)、舒筋活血、健身補(bǔ)氣等作用。研究觀察泰山四葉參乙醇提取物、乙醇提取后的水提取物可明顯提高小鼠的抗疲勞能力[3]。泰山黃精(見圖2)是一種傳統(tǒng)的名貴中藥,具有寬中益氣、益腎添精、滋陰潤肺、生津補(bǔ)脾、安五臟、填精髓等功效,在抗菌、解毒、抗疲勞、抗衰老等方面均有較好效果[4]。其化學(xué)成分主要有:黃精多糖、甾體皂苷、蒽醌類化合物、生物堿、強(qiáng)心苷、維生素和多種對人體有用的氨基酸等化合物[5]。楤木(見圖3)所含的皂甙是人參的3倍,其藥理作用和使用價值都相當(dāng)可觀[6]。目前將這3種中草藥制成復(fù)方制劑研究小鼠的抗疲勞作用還未見報(bào)道。本文旨在探究3種中草藥的復(fù)方制劑對小鼠的抗疲勞作用,并為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    圖1 泰山四葉參

    圖2 泰山黃精

    圖3 楤木

    2 實(shí)驗(yàn)材料與方法

    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

    2.1.1 實(shí)驗(yàn)藥材

    2.1.2 實(shí)驗(yàn)動物

    昆明種雄性小白鼠(體重在18-22g)30只,隨機(jī)分為3個組,分別是高劑量組10只,低劑量組10只,對照組10只。

    2.1.3 儀器與試劑

    2.2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料的處理

    將四葉參、黃精切片在60℃烘干箱內(nèi)烘至恒重。楤木洗凈,取皮同樣在60℃烘干箱內(nèi)烘至恒重。將四葉參、黃精、楤木先后置中草藥粉碎機(jī)內(nèi)粉碎至15目。

    2.2.2 四葉參、黃精、楤木浸提液的制備

    原料浸泡:分別稱取加工好的四葉參180g、黃精90g、楤木30g,共計(jì)300g。(所占比例分別為60%、30%、10%)按照料水比為1:20的比例加水6 000ml放入3個2 000ml的燒杯內(nèi),混合浸泡8h。

    提取:將上述浸泡的藥物置微波爐內(nèi),微波處理12min。

    離心:將上述微波處理物置于離心機(jī)內(nèi),設(shè)轉(zhuǎn)速為4 000r/min,離心15min,離心后留取上清液。殘?jiān)? 000ml酒精浸泡,用同樣的方法提取,離心,所得上清液與之前的混勻。

    濃縮:將所得上清液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮,濃縮至600ml,相當(dāng)于每100ml溶液中含有50g生藥材。

    2.2.3 實(shí)驗(yàn)劑量設(shè)置

    實(shí)驗(yàn)分為高劑量組和低劑量組。高劑量組,藥物濃度為50%;低劑量組,藥物濃度為25%,同時設(shè)生理鹽水對照組。各組按每天0.4ml/10g(體重)經(jīng)口灌胃,30天后測定各項(xiàng)指標(biāo)。

    2.2.4 小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)

    在給藥第30天,灌藥0.5h后,于小鼠尾根部負(fù)荷8%體重的鉛絲,置于水深(30±1)cm,水溫(25±1)℃游泳箱內(nèi)進(jìn)行游,從放入水中開始計(jì)時,觀察小鼠游泳至力竭下沉?xí)r(在水下10s不能上?。?,記錄時間,這段時間為小鼠的游泳時間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

    表1 主要儀器

    表2 主要試劑

    2.2.5 肝糖原測定

    采用蒽酮法測定,末次給予受試物30min后處死動物,取肝臟,清洗吸干,制備成1.00%肝糖原檢測液;空白管測定管及標(biāo)準(zhǔn)管分別加蒽酮顯色液2.0ml,混勻后置沸水浴中煮5min,冷卻后于波長620nm處比色,測定各管OD值,計(jì)算肝糖原含量。

    2.2.6 肌糖原測定

    采用蒽酮法測定,末次給予受試物30min后處死動物,取腓腸肌,清洗吸干,制備成5.00%肌糖原檢測液;空白管測定管及標(biāo)準(zhǔn)管分別加蒽酮顯色液2.0ml,混勻后置沸水浴中煮5min,冷卻后于波長620nm處比色,測定各管OD值,計(jì)算肌糖原含量。

    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    由SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,常規(guī)方法計(jì)算均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s),進(jìn)行t檢驗(yàn),確定差異的顯著。

    3 研究結(jié)果與分析

    3.1 對小鼠負(fù)重游泳時間的影響

    經(jīng)計(jì)算得小鼠負(fù)重游泳時間數(shù)據(jù)樣本方差齊,因此進(jìn)一步分析。經(jīng)口給予小鼠不同劑量受試物30天后,各組動物游泳時間總體上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)t檢驗(yàn)分析,高、低劑量小鼠負(fù)重游泳時間都長于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),特別是低劑量小鼠負(fù)重游泳時間要明顯長于對照組(見表 3)。

    表3 抗疲勞中藥對小鼠負(fù)重游泳時間的影響

    3.2 對小鼠肝糖原含量的影響

    經(jīng)口給予小鼠不同劑量受試物30d后,各劑量組動物肝糖原含量總體上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)t檢驗(yàn)分析,經(jīng)口給予小鼠不同劑量受試物30d后,高、低劑量小鼠肝糖原含量顯著高于對照組(P<0.05),低劑量組與對照組的差異更明顯一些(見表4)。

    表4 抗疲勞中藥對小鼠肝糖原含量的影響

    3.3 對小鼠肌糖原含量的影響

    經(jīng)口給予小鼠不同劑量受試物30天后,經(jīng)t檢驗(yàn)分析,低劑量小鼠肌糖原含量顯著高于對照組(P<0.001),而高劑量小鼠肌糖原含量與對照組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p>0.05)(見表 5)。

    表5 抗疲勞中藥對小鼠肌糖原含量的影響

    3.4 實(shí)驗(yàn)分析

    運(yùn)動性疲勞是指機(jī)體生理功能不能持續(xù)在特定水平,或不能維持預(yù)期的運(yùn)動負(fù)荷強(qiáng)度,致使體力和運(yùn)動耐力下降,造成工作能力和效率的降低,屬于一種復(fù)雜的生理狀態(tài),主要由體內(nèi)能量消耗過多和尿素氮乳酸等代謝物質(zhì)的累積而導(dǎo)致疲勞[8]。運(yùn)動性疲勞也與體內(nèi)的糖原(肝糖原和肌糖原)儲備密切相關(guān)。疲勞主要體現(xiàn)為運(yùn)動耐力下降,而負(fù)重游泳時間則可作為反映運(yùn)動耐力的重要指標(biāo)[9]。

    本研究表明,抗疲勞中藥復(fù)方制劑能明顯延長小鼠負(fù)重游泳時間,表明其可以有效提高小鼠的運(yùn)動以及肌肉抗疲勞能力。分析原因可能是,3種中草藥的復(fù)方制劑有效的增加了小鼠體內(nèi)的糖原儲備,糖原儲備的提高可有效的增加運(yùn)動時的血糖水平,一定程度上提高運(yùn)動能力,延緩疲勞的發(fā)生。

    此外,本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示在高劑量和低劑量水平上,受試組小鼠游泳時間顯著延長,肝糖原和肌糖原水平顯著升高,且低劑量組升高最為顯著。分析原因可能是中藥復(fù)方制劑富含多種糖類物質(zhì)如淀粉、氨基酸、多糖等。作為外源性糖類物質(zhì),促進(jìn)了糖原的合成,使糖原含量有所增加。而且楤木中所含有的皂甙是人參的3倍,人參皂貳可以提高乳酸脫氫酶的活性,加速糖異生的生成,增強(qiáng)機(jī)體對葡萄糖的攝取和利用。體力活動時,葡萄糖為骨骼肌主要能量來源,糖原的儲備量直接影響機(jī)體的運(yùn)動能力。當(dāng)耐力運(yùn)動中消耗大量能量時,肝糖原首先分解入血,輸送到肌肉中提供能量并維持血糖正常水平,避免低血糖引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)疲勞感[10]。另外肌糖原的酵解作用是糖類供給能量的另一種方式。當(dāng)機(jī)體突然需要大量能量,而又供氧不足(如劇烈運(yùn)動時),則糖原的酵解作用能暫時滿足能量消耗的需要,糖原的含量能間接說明疲勞發(fā)生的快慢或程度。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:服用中藥復(fù)方制劑能顯著增加小鼠肝糖原和肌糖原含量,提高機(jī)體運(yùn)動能力,延緩運(yùn)動性疲勞的發(fā)生。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運(yùn)動消耗大量血糖時,肌糖原分解供能,肌糖原不能直接分解成葡萄糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,經(jīng)血液循環(huán)到肝臟,再在肝臟內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚍纸獬善咸烟牵?1]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:高劑量組小鼠肌糖原含量沒有低劑量組高,且與生理鹽水對照組并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這說明該中藥復(fù)方制劑必須在一定的劑量范圍內(nèi)使用才能收到良好的效果。負(fù)重游泳試驗(yàn)陽性以及2項(xiàng)生化指標(biāo)如肝糖原和肌糖原含量為陽性,即可判定受試物具有抗疲勞活性。

    因此,本次實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明:抗疲勞中藥復(fù)方制劑具有明顯的抗疲勞作用,主要通過提高機(jī)體對運(yùn)動負(fù)荷的適應(yīng)能力,提高運(yùn)動耐力和減少代謝廢物產(chǎn)生的途徑來實(shí)現(xiàn)的。對該藥物能否應(yīng)用到人體,還有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

    4 小結(jié)

    泰山四葉參、黃精、楤木都是泰山的名貴藥材。泰山四葉參的主要功效為補(bǔ)虛通乳、排膿解毒、舒筋活血、健身補(bǔ)氣等作用;泰山黃精是一種傳統(tǒng)的名貴中藥,具有抗疲勞、抗衰老、降血糖、抗氧化等作用;楤木所含有的皂甙是人參的3倍,其藥理作用和使用價值都相當(dāng)可觀。這3種中草藥制成的復(fù)方制劑對小鼠的抗疲勞作用都有顯著功效,一方面,該中藥復(fù)方制劑的有效成分富含多種糖類物質(zhì),如淀粉、氨基酸、多糖等,為小鼠的耐力性運(yùn)動提供了必要的糖原補(bǔ)充;另一方面,該抗疲勞中藥復(fù)方制劑使糖異生途徑相關(guān)酶免受自由基損傷,加強(qiáng)糖異的代謝途徑,從而抑制肝糖原、肌糖原和血糖含量的下降。

    泰山四葉參、黃精、楤木浸提液能有效防止小鼠肝糖原、肌糖原在運(yùn)動中的過度利用和促進(jìn)肝糖原、肌糖原的恢復(fù)。本次實(shí)驗(yàn)研究表明:該中藥復(fù)方制劑具有顯著抗疲勞的藥理作用,且低劑量的中藥復(fù)方制劑更有助于緩解小鼠的運(yùn)動性疲勞,但是關(guān)于該藥的不同劑量對抗疲勞的作用機(jī)制及能否制成中藥方劑用于人類尚待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

    [1]麻懿馨,范文今,趙翠霞,等.抗疲勞中藥對小鼠抗疲勞作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué),2013(10).

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    [4]劉 柳,鄭 蕓,董 群,等.黃精中的多糖組分及其免疫活性[J].中草藥,2006(8).

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