免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞在再生障礙性貧血細(xì)胞免疫功能紊亂中的作用

唐文玨

免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞在再生障礙性貧血細(xì)胞免疫功能紊亂中的作用

唐文玨

目的 探討免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞在再生障礙性貧血（aplastic anemia,AA）細(xì)胞免疫功能紊亂中的作用。方法 選擇初發(fā)再生障礙性貧血（AA）40例。分組：（1）初發(fā)AA，20例，臨床診斷符合小兒AA的診療建議，且入院前未接受相關(guān)治療。（2）緩解期AA，20例患者再生障礙性貧血經(jīng)免疫治療后，臨床指標(biāo)提示造血恢復(fù)。（3）對照組，選取與之匹配的正常兒童20例。檢測外周血CD4+、CD8+、NK及Treg細(xì)胞群數(shù)量及比例。結(jié)果 初發(fā)組CD4+及Treg細(xì)胞比例（26.8±3.2、3.3±1.1）較緩解組（36.6±3.0、5.9±1.4）及對照組（38.7±7.2、6.0±1.5）低（P<0.05），而CD8+的細(xì)胞的比例（38.4±6.2）、較緩解組（32.1±4.5）及對照組（28.7±7.5）高（P<0.05）；初發(fā)AA CD4-/CD8+的值為（0.74±0.2）較緩解組（1.2±0.3）及對照組（1.4±0.5）低（P<0.05）;緩解組與對照組細(xì)胞比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義。初發(fā)組（15.7±4.0）、緩解組（18.2±3.2）與對照組（19.2±5.3）的NK細(xì)胞比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 本研究顯示AA患者的造血功能的衰竭與T細(xì)胞亞群比例失衡有關(guān)，支持了細(xì)胞免疫功能紊亂參與AA發(fā)生。

再生障礙性貧血；免疫功能紊亂；免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞

再生障礙性貧血（aplastic anemia, AA）是以一種獲得性骨髓造血功能衰竭癥，臨床癥狀主要表現(xiàn)為骨髓造血功能低下、全血細(xì)胞減少和貧血、出血、感染[1]。AA發(fā)病機制復(fù)雜，目前尚未完全明確。近年來免疫紊亂成為AA發(fā)病機制主要研究方向，主要包括T淋巴細(xì)胞亞群比例失衡、細(xì)胞因子數(shù)量及功能異常等方面[2]。本文研究T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量、比例和血清細(xì)胞因子含量，探討免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞在再生障礙性貧血細(xì)胞免疫功能紊亂中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年9月～2014年9月廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院收治的初發(fā)再生障礙性貧血（AA）40例，其中男22例，女18例，年齡2個月～14歲，平均年齡6.5歲。分組：（1）初發(fā)組AA20例，臨床診斷符合小兒AA的診療建議[3]，且入院前未接受相關(guān)治療。（2）緩解期AA20例，再生障礙性貧血經(jīng)免疫治療后，臨床指標(biāo)提示造血恢復(fù)。同時，選取與之匹配的正常兒童20例作為對照組，男女各10例，年齡3個月～14歲，平均年齡7.2歲。

1.2 方法 T淋巴細(xì)胞亞群的檢測：取外周靜脈血2mL，乙二胺四乙酸(美國sigma)抗凝后備用。采用美國Beckman-Coulter公司臨床應(yīng)用型（EPICS-XLII MCL）流式細(xì)胞儀檢測外周血CD4+、CD8+、NK及Treg細(xì)胞群，其中淋巴細(xì)胞亞群測定采用SimuhestTM IMK-Lymphoeyte診斷試劑盒（美國BD公司）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，計量資料以“x±s”表示，組間比較采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

T淋巴細(xì)胞亞群的檢測結(jié)果 初發(fā)組CD4+及Treg細(xì)胞比例較緩解組及對照組低（P<0.05），而CD8+的細(xì)胞的比例、CD4+/CD8+的值較其他2組高（P<0.05）；緩解組與對照組細(xì)胞比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義。各組的NK細(xì)胞比例差異無明統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 各組T淋巴細(xì)胞亞群的檢測結(jié)果比較（x±s，n=20）

3 討論

傳統(tǒng)學(xué)說認(rèn)為，在一定的遺傳因素及后天某些致病因子的作用下，AA主要通過三種機制發(fā)?。海?）“種子”學(xué)說，即原發(fā)性、繼發(fā)性造血干細(xì)胞缺陷；（2）“土壤學(xué)說”，即造血微環(huán)境異常；（3）“蟲子”學(xué)說，即機體的免疫異常[4]。其中，免疫異常被認(rèn)為是AA的主要發(fā)病機制。T細(xì)胞是機體免疫系統(tǒng)中的主要效應(yīng)細(xì)胞，其總數(shù)、各亞群數(shù)量及比值均保持在一定的范圍內(nèi)，維持著動態(tài)平衡，維持機體免疫功能的生理狀態(tài)。研究表明，AA表現(xiàn)為外周血

T細(xì)胞亞群的失衡：CD4+細(xì)胞及Treg細(xì)胞比例的減少，CD8+比例的增高，CD4+/CD8+比值的減少[5]。CD4+細(xì)胞有多種亞群，根據(jù)其分泌的細(xì)胞因子不同可分為輔助性T細(xì)胞1（Th1）與

Th2。研究表明，雖然AA患者外周血CD4+細(xì)胞數(shù)量減低，但其亞群Th1數(shù)量異常增多，Th1主要分泌IL-2、IFN-γ等負(fù)調(diào)控因子而導(dǎo)致骨髓造血衰竭[6]。另外，CD8+細(xì)胞不但能直接抑制骨髓造血細(xì)胞，還能激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞釋放IFN-γ和腫瘤壞死因子α（TNF-α）等負(fù)調(diào)控因子而抑制造血[7]。初診AA患者CD8+數(shù)量增多，緩解期患者及正常人減少，表明其在AA發(fā)病起負(fù)調(diào)控的作用。Treg是具有免疫抑制功能的細(xì)胞群，通過抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞來阻止損傷性免疫病理的發(fā)生，維持機體免疫平衡[8]。通過分泌IL-4、IL-10及TGF-β等細(xì)胞因子調(diào)節(jié)Th1與Th2的比例平衡。當(dāng)體內(nèi)Treg減少時，可導(dǎo)致Th1與Th2的比例失衡；同時，不能抑制機體過度分泌IL-2，免疫耐受機制被破壞，自身活化性T細(xì)胞大量增殖，體液免疫亢進(jìn)，導(dǎo)致再障的發(fā)生[9-10]。本研究結(jié)果顯示，初發(fā)組CD4+及Treg細(xì)胞比例較緩解組及對照組低（P<0.05），而CD8+的細(xì)胞的比例、CD4+/CD+8的值較其他2組高（P<0.05），與國內(nèi)外報道結(jié)果基本一致。

綜上所述，AA患者的造血功能的衰竭與CD4+細(xì)胞及Treg細(xì)胞比例的減少，CD8+比例的增高有關(guān)，佐證了細(xì)胞免疫功能紊亂參與AA發(fā)生。

[1] 蔣白麗，李建平，李文倩，等.CD8+T細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子在再生障礙性貧血發(fā)病機中的作用[J].中國實驗血液學(xué)雜志，2014，22(2)：569-572.

[2] Young NS，Scheinberg P，Calado RT.Aplastic anemia[J].Curr Opin Hematol，2008，15(3)：162-168．

[3] 謝曉恬.兒童再障礙貧血的臨床診斷治療[J].實用兒科臨床雜志[J]，2012，27(15)：1141-1143.

[4] 黃國清，劉秋爽，程永紅，等.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子在再生障礙性貧血中的意義[J].中國免疫學(xué)雜志，2012，28(7)：645-647.

[5] 王方，金潤銘.再生障礙性貧血發(fā)病機制的研究進(jìn)展[J].國際兒科學(xué)雜志，2010，37(2)：128-131.

[6] 李玉云，謝揚虎.再生障礙性貧血惠者血漿IL-3和IL-8水平的檢測[J]．蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，36(3)：293-294.

[7] 王寧玲，王敏，王會平，等.再生障礙性貧血患兒外周血Treg/Th17細(xì)胞失衡的研究[J].中國小兒血液與腫瘤雜志，2014，19(4)：202-206.

[8] 陸雯萍，林贈華，劉紅，等.重型再生障礙性貧血模型小鼠脾臟CD4+CD25+T細(xì)胞凋亡影響及機制研究[J].中華血液學(xué)雜志，2013，34(11)：931-935.

[9] 趙瑞玲，胡致平，林圣云，等.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在再生障礙性貧血發(fā)病機制中的作用[J].浙江臨床醫(yī)學(xué)，2010，12(4)：421-423.

[10] 張青，周長華，杜苑苑，等.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的變化對重型再生障礙性貧血臨床轉(zhuǎn)歸的意義[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2013，13(1)：8-9.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.16.057

廣西 530000 廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院兒科（唐文玨）