嘧菌酯在西瓜和土壤中的消解動態(tài)和殘留分析

萬春燕　郭長英　梁京蕓等

摘要：為評價嘧菌酯在西瓜上使用的安全性，于2012、2013年在濟(jì)南、杭州兩地采用田間試驗和氣相分析方法研究了嘧菌酯在西瓜及土壤中的消解動態(tài)和最終殘留。結(jié)果表明：嘧菌酯在西瓜和土壤中的降解行為均符合一級降解動力學(xué)方程，其降解半衰期分別為2.2～4.7、10.0～13.7 d。嘧菌酯在西瓜和土壤中的最終殘留質(zhì)量分?jǐn)?shù)均小于最低檢出限0.01 mg/kg，低于嘧菌酯在西瓜上的最高殘留限量（MRL）1.0 mg/kg。

關(guān)鍵詞：嘧菌酯；西瓜；土壤；殘留； 降解

中圖分類號：S481+.8 文獻(xiàn)標(biāo)識號：A 文章編號：1001-4942（2015）01-0096-04

Abstract To evaluate the safety of azoxystrobin on watermelon， the final residue and degradation dynamics of azoxystrobin in watermelon and soil were studied using field test and gas chromatography （GC） method in Jinan and Hangzhou in 2012 and 2013. The degradation behavior of azoxystrobin in watermelon and soil both could be described by first-degree dynamic equation， and its half-lives were 2.2～4.7 and 10.0～13.7 days respectively. The final residues of azoxystrobin in watermelon and soil were both lower than the limit of detection （LOD） of 0.01 mg/kg and the maximum residue limit （MRL） of 1.0 mg/kg.

Key words Azoxystrobin； Watermelon； Soil； Residue； Degradation

嘧菌酯：（E）-2-{2-[6（2-氰基苯氧基）嘧啶-4-基氧]苯基}-3-甲氧基丙烯酸甲酯，化學(xué)分子式：C22H17N3O5，相對分子質(zhì)量：403.39。嘧菌酯是一種新型高效、廣譜、內(nèi)吸性殺菌劑，可用于莖葉噴霧、種子處理，也可進(jìn)行士壤處理。嘧菌酯對幾乎所有真菌綱病害都有良好的防治效果[1]。

嘧菌酯在草莓、芒果、荔枝、人參、黃瓜、水稻等作物上的殘留已有研究報道[1～10]，但有關(guān)嘧菌酯在西瓜中的殘留降解行為尚未見報道。嘧菌酯殘留的測定方法主要有GC[1～8]、HPLC[9～10]、HPLC-MS[11]。經(jīng)過比較分析，檢測西瓜、土壤中的嘧菌酯采用GC-ECD方法有較好的精確性、靈敏度，且方法簡單，便于批量樣品的處理。為進(jìn)一步闡明嘧菌酯在西瓜上的殘留及消解動態(tài)，本試驗采用GC-ECD方法進(jìn)行了嘧菌酯懸浮劑在西瓜和土壤中的消解動態(tài)及最終殘留特性研究，并分析了嘧菌酯使用后的西瓜食用安全性，為合理安全地使用嘧菌酯和風(fēng)險評估提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

氣相色譜儀：Agilent 6890N，ECD，帶自動進(jìn)樣器；超聲波提取器：昆山市超聲儀器有限公司；高速勻漿機(jī)：德國IKA WORK INC T25 Basic；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：德國Heidolph LABOROTA 4000。

1.2 試劑

嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)品（w=99.0%）、40%嘧菌酯懸浮劑由青島瀚生生物科技股份有限公司提供；丙酮、環(huán)己烷、乙酸乙酯、石油醚均為色譜純；氯化鈉、無水硫酸鈉（于 350℃灼燒4 h后備用）均為分析純；弗羅里硅土（60～100目）：650℃下灼燒4 h，臨用前于130℃烘2 h后加5%水活化，混勻。

1.3 田間試驗設(shè)計

按照《農(nóng)藥殘留試驗準(zhǔn)則》[12]和《農(nóng)藥登記殘留田間試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》[13]，試驗于2012、2013年分別在濟(jì)南和杭州兩地進(jìn)行。為避免交叉污染，試驗小區(qū)按照藥量由低到高的順序排列，小區(qū)之間設(shè)田埂進(jìn)行保護(hù)，另設(shè)對照小區(qū)。小區(qū)面積30 m2，重復(fù)3次。

1.3.1 西瓜消解動態(tài)試驗 在西瓜瓜體生長至成熟個體一半大時用手動噴霧器施藥一次：按40%嘧菌酯懸浮劑360 g a.i/hm2（制劑量900 g/hm2，推薦最高劑量的1.5倍）用藥量對水噴霧。噴霧后1 h及1、3、5、7、10、14、21 d，視瓜體大小，每次每小區(qū)隨機(jī)采集4個以上生長正常、無病害的西瓜，裝入樣本容器中，粘好標(biāo)簽，貯存于-20℃冰柜中。小區(qū)邊行和每行距離兩端0.5 m內(nèi)不采樣。

1.3.2 土壤模擬消解動態(tài)試驗 在西瓜瓜體生長至成熟個體一半大時用手動噴霧器施藥一次：按40%嘧菌酯懸浮劑360 g a.i/hm2（制劑量900 g/hm2，推薦最高劑量的1.5倍）用藥量對水噴霧。噴霧后1 h及1、3、5、7、10、14、21、30、45、56、70 d，隨機(jī)多點（6～12個采樣點）采集0～10 cm土壤樣本，每小區(qū)每次采集土壤樣本1～2 kg，除去碎石、雜草和植物根莖等雜物，裝入樣本容器中。

1.3.3 西瓜和土壤中最終殘留試驗 采用240、360 g a.i/hm2兩個劑量，分別施藥3～4次，施藥間隔期7 d。最后一次施藥后3、5、7、14、21 d，視瓜體大小，每次每小區(qū)隨機(jī)采集4個以上生長正常、無病害的西瓜。將采集的西瓜沿縱向均勻地切成4～8瓣（雙數(shù)），取不相鄰的瓜瓣，分成2組。第一組用于制備全瓜樣品，第二組用于制備瓜肉樣品。采集0～15 cm 的土壤1～2 kg，四分法處理，于-20℃冰柜中保存?zhèn)溆?。同時采集西瓜和土壤空白樣品。endprint

1.4 樣品處理

1.4.1 提取 稱取25 g西瓜樣品于廣口瓶中，加入100 mL乙酸乙酯+環(huán)己烷（1+1），于高速勻漿機(jī)中高速勻漿30 s，轉(zhuǎn)移到加有10 g氯化鈉的具塞量筒中，搖勻，待靜置30 min后，準(zhǔn)確移取20 mL上層浸提液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮近干，待凈化。

稱取20 g土壤樣品（稱取后土壤樣品如果水分含量低可加入少量的水）于廣口瓶中，加入50 mL丙酮+石油醚（1+1），超聲波提取15 min，過濾于100 mL平底燒瓶中，用50 mL丙酮分兩次重復(fù)上述步驟提取殘渣，一并過濾于原平底燒瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮近干，待凈化。

1.4.2 凈化 采用層析柱法，依次裝入脫脂棉、無水硫酸鈉2 cm高、弗羅里硅土5 g、無水硫酸鈉1 cm高。用20 mL左右石油醚預(yù)淋，棄去淋洗液，將濃縮過的提取液用10、20、30 mL丙酮∶乙酸乙酯（1∶1，V∶V）分3次淋洗，收集淋洗液，35℃減壓濃縮，用石油醚定容至5 mL，待測。

2 結(jié)果與分析

2.1 前處理方法的確定

提取液可以有效提取西瓜和土壤中的嘧菌酯，但是提取液中含有一定量的雜質(zhì)，因此本試驗采用了弗羅里硅土凈化方法，去雜效果很好，同時能夠獲得良好的回收率和重現(xiàn)性。

2.2 色譜分析

色譜條件：色譜柱：BPX608，25 m × 0.32 mm × 0.25 μm；柱 溫：230℃保持6.5 min，以30℃/min升至280℃，保持29 min；進(jìn)樣口溫度：250℃；檢測器溫度：350℃； 柱壓力：138 kPa；進(jìn)樣量：5 μL，分流比： 5∶1。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將一定量的嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)品用丙酮溶解后，配制0.005、0.05、0.5、1.0、4.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述氣相色譜條件下進(jìn)行測定，以嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與監(jiān)測離子峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性關(guān)系良好。測定標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 13592x-1309.5，R2=0.9978。

2.4 回收率

在土壤和西瓜全瓜、西瓜瓜肉樣品中分別定量加入0.01、0.5、1.0 mg/kg嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，回收率85.9%～107.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～6.0%，符合農(nóng)藥殘留痕量分析要求（表1）。色譜圖見圖1。

2.5 西瓜和土壤中的消解動態(tài)

濟(jì)南、杭州兩地嘧菌酯在西瓜、土壤中降解均符合一級降解動力學(xué)方程模式，消解方程、相關(guān)系數(shù)和半衰期見表2，動態(tài)消解曲線分別見圖2、圖3。從兩年檢測結(jié)果來看，嘧菌酯在西瓜中消解較快，消解半衰期2.2～4.7 d，在施藥后10 d，濟(jì)南、杭州兩地的消解率均達(dá)到90%以上；嘧菌酯在土壤中的消解半衰期為10.0～13.7 d，藥后45 d的消解率均達(dá)到90%以上。嘧菌酯在西瓜和土壤中的半衰期均較短（T1/2<30 d），屬于易降解農(nóng)藥。

2.6 在西瓜和土壤中的最終殘留

2.6.1 西瓜全瓜最終殘留 從濟(jì)南試驗點兩年結(jié)果來看，嘧菌酯在西瓜全瓜上的殘留量小于0.039 mg/kg，藥后14 d及以后最終殘留量均小于0.01 mg/kg。從杭州試驗點兩年結(jié)果看，嘧菌酯在西瓜全瓜上的殘留量小于0.036 mg/kg，藥后7 d及以后最終殘留量均小于0.01 mg/kg。

2.6.2 西瓜瓜肉最終殘留 從濟(jì)南試驗點兩年結(jié)果來看，嘧菌酯在西瓜瓜肉上的殘留量小于0.018 mg/kg，藥后5 d及以后最終殘留量均小于0.01 mg/kg。從杭州試驗點兩年結(jié)果看，嘧菌酯在西瓜瓜肉上的殘留量小于0.015 mg/kg，藥后5 d及以后最終殘留量均小于0.01 mg/kg。

2.6.3 土壤最終殘留 從濟(jì)南試驗點結(jié)果來看，嘧菌酯在土壤上藥后21 d殘留量及以后最終殘留量，2012年時均小于0.01 mg/kg，2013年時均小于0.101 mg/kg。杭州試驗點兩年結(jié)果看，嘧菌酯在土壤上藥后21 d及以后最終殘留量均小于0.01 mg/kg。

3 結(jié)論

嘧菌酯在濟(jì)南、杭州兩地西瓜和土壤中的降解行為符合一級動力學(xué)方程，在西瓜中的半衰期為2.2～4.7 d，藥后10 d消解90%以上；土壤中的半衰期為10.0～13.7 d，藥后45 d消解90%以上。嘧菌酯在西瓜及土壤中半衰期較短，屬于易降解農(nóng)藥（T1/2<30 d）。

根據(jù)有關(guān)資料，歐盟、澳大利亞、日本均規(guī)定西瓜中嘧菌酯最高允許量（MRL）值為1.0 mg/kg，我國尚未制定嘧菌酯在西瓜中的最高殘留允許量（MRL）值。因此，本試驗參照歐盟在西瓜中的殘留限量為1.0 mg/kg。按照推薦劑量195～240 g a.i/hm2和推薦次數(shù)3次用藥時，3 d以后西瓜中嘧菌酯殘留量均小于1.0 mg/kg；在施藥劑量為推薦劑量1.5倍（360 g a.i/hm2）及增加一次用藥情況下，3 d以后西瓜中嘧菌酯殘留量均小于1.0 mg/kg，此劑量下使用該藥是安全的。

參 考 文 獻(xiàn)：

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