川崎病合并感染時(shí)臨床特征及淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白水平變化

湯昔康 陳澤楷 李汝霞 麥友剛 覃麗君

臨床研究論著

川崎病合并感染時(shí)臨床特征及淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白水平變化

湯昔康 陳澤楷 李汝霞 麥友剛 覃麗君

目的探討川崎病合并感染時(shí)的臨床特征及淋巴細(xì)胞亞群、Ig水平的變化。方法收集29例合并感染的川崎病患兒為感染組，同期未合并感染的35例川崎病患兒為非感染組，21例腹股溝疝患兒為對(duì)照組。比較感染組與非感染組患兒臨床特征、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果、丙種球蛋白治療效果及冠狀動(dòng)脈損傷情況，比較3組患兒外周淋巴細(xì)胞亞群及血清Ig水平。結(jié)果感染組與非感染組的臨床特征、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、丙種球蛋白治療效果及近期冠狀動(dòng)脈損傷比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，感染組遠(yuǎn)期冠狀動(dòng)脈損傷率高于非感染組(P<0.05)。與對(duì)照組相比，2組川崎病患兒CD4+、CD4+/CD8+、CD19+T細(xì)胞比例較高且IgG、IgA、IgM水平升高(P均<0.05)，CD8+T細(xì)胞水平下降(P<0.05)。感染組與非感染組間外周淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。結(jié)論感染并未影響川崎病患兒的臨床特征、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果、丙種球蛋白治療反應(yīng)及近期冠狀動(dòng)脈損傷發(fā)生率，可能與感染并未進(jìn)一步影響機(jī)體免疫水平有關(guān)，但合并感染可能增加遠(yuǎn)期冠狀動(dòng)脈損傷的風(fēng)險(xiǎn)，需注意隨訪。

川崎?。桓腥?；免疫；冠狀動(dòng)脈病變

川崎病是以全身血管炎病變?yōu)橹鞯募毙园l(fā)熱出疹性疾病。其發(fā)病機(jī)制至今尚未明確。多項(xiàng)研究表明，川崎病可能是由病原體入侵具有遺傳易感性的個(gè)體后，通過(guò)超抗原、熱休克蛋白等觸發(fā)體內(nèi)異常免疫反應(yīng)引起。鑒于目前對(duì)病原體感染后川崎病的臨床表現(xiàn)及免疫狀態(tài)的變化研究較少，為此本研究收集了合并感染的川崎病患兒的臨床資料，總結(jié)其臨床特征及免疫狀態(tài)情況，并與無(wú)合并感染的川崎病患兒及非川崎病兒童作對(duì)比，現(xiàn)報(bào)告如下。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

2009年6月至2014年3月中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院兒科收治的川崎病患兒中，選擇合并感染的29例患兒為感染組，以同期經(jīng)檢驗(yàn)未合并感染的35例患兒為非感染組。入組標(biāo)準(zhǔn)：①符合日本川崎病委員會(huì)發(fā)布的關(guān)于川崎病診斷修訂案的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②入組前均未使用任何影響免疫功能藥物；③無(wú)合并腫瘤及其他自身免疫性疾病[1]。感染組男18例，女11例；年齡6個(gè)月～7歲，中位年齡2.3歲；非感染組男21例，女14例；年齡9個(gè)月～8歲，中位年齡2.5歲。另選擇同期中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院外科收治的21例腹股溝疝患兒為對(duì)照組，男13例，女8例；年齡1歲～6歲，中位年齡2.4歲。3組患兒的性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并征得患兒監(jiān)護(hù)人知情同意。

二、方法

于3組患兒入院當(dāng)日抽取靜脈血送檢。采用免疫熒光法檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD19+T細(xì)胞)，檢測(cè)儀器為Cytomics FC500型流式細(xì)胞儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司)，所有試劑和光路校正品、質(zhì)控品均為原裝配套試劑。采用散射比濁法檢測(cè)IgG、IgA、IgM水平，檢測(cè)儀器為德國(guó)西門(mén)子公司BN Prospec 型全自動(dòng)蛋白分析儀，試劑由德靈公司提供。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、感染組川崎病患兒的病原體檢測(cè)結(jié)果

29例合并感染的川崎病患兒中，支氣管肺炎合并小兒腸炎3例，支氣管肺炎合并敗血癥2例，單純支氣管肺炎19例，化膿性扁桃體炎3例，單純小兒腸炎2例。經(jīng)血清學(xué)支原體、衣原體-IgM檢測(cè)肺炎支原體陽(yáng)性11例、衣原體感染1例；經(jīng)糞便檢查輪狀病毒陽(yáng)性1例；血培養(yǎng)肺炎鏈球菌陽(yáng)性1例，沙門(mén)菌陽(yáng)性1例。

二、感染組與非感染組川崎病患兒的臨床特征比較

2組川崎病患兒經(jīng)確診后均予丙種球蛋白1 g/(kg·d)治療2 d，以及阿司匹林、護(hù)心等治療，感染組與非感染組患兒的臨床表現(xiàn)、對(duì)丙種球蛋白治療的時(shí)間及反應(yīng)、發(fā)病1個(gè)月內(nèi)冠狀動(dòng)脈損傷發(fā)生率及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，但2組間發(fā)病2個(gè)月后冠狀動(dòng)脈損傷率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)， 見(jiàn)表1。

表1 感染組與非感染組患兒臨床特征比較

續(xù)表

臨床特征感染組(29例)非感染組(35例)χ2/t值P值冠狀動(dòng)脈損傷(病程2月后)[例(%)]5(17)1(3)3.8620.049白細(xì)胞(×109/L)14.5±4.615.8±5.11.0560.295血小板(×109/L)342±112358±1300.5210.604CRP(mg/L)41.9±14.538.1±13.71.0760.286ESR(mm/h)50.3±27.448.1±19.60.3740.710血清白蛋白(g/L)28.7±12.830.5±15.20.5060.615

三、2組川崎病患兒與對(duì)照組兒童的外周淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平比較

與對(duì)照組比較，2組川崎病患兒CD4+、CD4+/CD8+、CD19+T細(xì)胞比例均有升高，且IgG、IgA、IgM水平亦升高(P均<0.05)，CD8+T細(xì)胞比例下降(P均<0.05)，感染組與非感染組其外周淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 2組川崎病患兒與對(duì)照組兒童的外周淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平比較

注：與對(duì)照組相比，CD3+CD4+t感染組=4.778、t非感染組=3.236，CD3+CD8+t感染組=3.070、t非感染組=2.759，CD4+/ CD8+t感染組=2.110、t非感染組=2.102，CD19+t感染組=3.113、t非感染組=3.247，IgGt感染組=5.503、t非感染組=6.173，IgAt感染組=4.081、t非感染組=4.347，IgMt感染組=3.785、t非感染組=2.720，aP<0.05

討 論

川崎病的病因和發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前觀點(diǎn)主要集中在感染、遺傳易感、超抗原三大因素上，也有學(xué)者認(rèn)為可能是以上三者的聯(lián)合作用。川崎病臨床癥狀類似感染性疾病，且其發(fā)病有明顯季節(jié)性，多見(jiàn)于5歲以下嬰幼兒，實(shí)驗(yàn)室檢查中白細(xì)胞、CRP、ESR升高等均提示該病可能與感染有關(guān)[2]。近年發(fā)現(xiàn)，與川崎病發(fā)病密切相關(guān)的病原體有細(xì)菌(如葡萄球菌、鏈球菌)、病毒(如腺病毒、冠狀病毒、EB病毒、微小病毒、腸道病毒)、支原體等其他病原微生物[2-7]。更有研究提出，病原體感染對(duì)川崎病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有重要意義[6-7]。目前，對(duì)于感染如何參與川崎病的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。為此，本研究比較了合并感染與非感染患兒的臨床特征及細(xì)胞、體液免疫的不同點(diǎn)，進(jìn)一步分析感染在川崎病發(fā)病過(guò)程中的作用。

聶抒等[8]發(fā)現(xiàn)川崎病合并感染者后期發(fā)生嚴(yán)重冠狀動(dòng)脈損傷幾率增加[8-9]。國(guó)外研究顯示，合并感染與未合并感染川崎病患兒比較，其冠狀動(dòng)脈損傷發(fā)生率比較差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 認(rèn)為是否合并感染并不影響冠狀動(dòng)脈損傷的發(fā)生[10]。本研究顯示，合并感染的川崎病患兒炎癥指標(biāo)并未比非感染者增高，2組間對(duì)丙種球蛋白反應(yīng)也無(wú)差異；提示合并感染后并不影響川崎病的臨床表現(xiàn)及對(duì)丙種球蛋白的治療反應(yīng)。合并感染者在發(fā)病1個(gè)月內(nèi)冠狀動(dòng)脈損傷發(fā)生率并未比非感染者明顯升高，而2個(gè)月后冠狀動(dòng)脈損傷發(fā)生率明顯高于非感染組，提示感染并不增加川崎病近期冠狀動(dòng)脈損傷的發(fā)生，但可加重后期冠狀動(dòng)脈損害程度。

T細(xì)胞是參與細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞，分為輔助性T細(xì)胞(Th)和抑制性T細(xì)胞(Ts)2個(gè)主要亞群，CD4+/CD8+T細(xì)胞為T(mén)h和Ts細(xì)胞比值，比值升高提示川崎病患兒急性期Th細(xì)胞功能異?；罨琓s細(xì)胞功能減弱，細(xì)胞免疫處于高度活化狀態(tài)。另外，T細(xì)胞活化后通過(guò)釋放各種淋巴因子，促使B細(xì)胞多克隆活化、增殖，分化為漿細(xì)胞，從而分泌更多的免疫球蛋白及抗體。而B(niǎo)細(xì)胞是體液免疫的主要細(xì)胞，CD19+為活化B細(xì)胞，可分泌IgG、IgA、IgM多種免疫球蛋白和抗體，介導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答。本研究顯示，2組川崎病患兒CD4+/CD8+T細(xì)胞比值升高，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[11]。感染組與非感染組患兒各細(xì)胞免疫指標(biāo)比較差異均未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可見(jiàn)合并感染并未增強(qiáng)川崎病患兒細(xì)胞活化強(qiáng)度。感染組與非感染組川崎病患兒CD19+T細(xì)胞水平均高于對(duì)照組，IgG、IgA、IgM水平也有升高，提示川崎病同時(shí)存在活化B細(xì)胞參與，而2組川崎病患兒CD19+T細(xì)胞以及IgG、IgA、IgM水平相近，表明兩者體液免疫并無(wú)明顯區(qū)別。由上可見(jiàn)，合并感染并未加重川崎病患兒細(xì)胞、體液免疫水平，與其臨床特征、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果、治療反應(yīng)等結(jié)果一致。由此推測(cè)，合并感染后因機(jī)體免疫水平并未增強(qiáng)，導(dǎo)致臨床表現(xiàn)等無(wú)明顯差異；而對(duì)于合并感染后遠(yuǎn)期冠狀動(dòng)脈損傷增加可追蹤其免疫狀態(tài)進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上所述，合并感染并未影響川崎病患兒的臨床特征、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果、丙種球蛋白治療反應(yīng)及近期冠狀動(dòng)脈損傷發(fā)生率，可能與感染并未進(jìn)一步影響機(jī)體免疫水平有關(guān)。但合并感染可能增加遠(yuǎn)期冠狀動(dòng)脈損傷的風(fēng)險(xiǎn)，需注意隨訪。

[1]JCS Joint Working Group. Guidelines for diagnosis and management of cardiovascular sequelae in Kawasaki disease (JCS 2013). Digest version.Circ J,2014,78(10):2521-2562.

[2]杜忠東. 川崎病.北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,2009:23-30.

[3]高樹(shù)英,李新愛(ài),李瑞燕.病毒感染與川崎病的相關(guān)性探討.山東醫(yī)藥，2014,54(10)：66-67.

[4]Chang LY, Lu CY, Shao PL, Lee PI, Lin MT, Fan TY, Cheng AL, Lee WL, Hu JJ, Yeh SJ, Chang CC, Chiang BL, Wu MH, Huang LM.Viral infections associated with Kawasaki disease.J Formos Med Assoc, 2014,113(3):148-154.

[5]Jaggi P, Kajon AE, Mejias A, Ramilo O, Leber A.Human adenovirus infection in Kawasaki disease: a confounding bystander?Clin Infect Dis，2013，56(1):58-64.

[6]王小川,蔡雯雯,賈蒼松.261例川崎病合并感染的臨床分析.中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志(電子版)，2012,8(1):32-35.

[7]陳靈紅,李樺,滕海麟.呼吸道病毒感染對(duì)川崎病發(fā)病影響的研究.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2010,13(12):3999-4001.

[8]聶抒,韓燕燕,韓立志.川崎病合并重癥感染患兒的預(yù)后分析.中國(guó)婦幼保健，2012,27(2):209-211.

[9]崔彥芹,于明華,黃萍,張麗.初診時(shí)病原體感染對(duì)川崎病患兒治療反應(yīng)及冠狀動(dòng)脈損傷預(yù)后的影響.實(shí)用兒科臨床雜志，2009,24(5):1179-1181.

[10]Benseler SM, McCrindle BW, Silverman ED, Tyrrell PN, Wong J, Yeung RS. Infections and Kawasaki disease: implications for coronary artery outcome. Pediatrics，2005，116(6):e760-e766.

[11]Franco A, Shimizu C, Tremoulet AH, Burns JC. Memory T-cells and characterization of peripheral T-cell clones in acute Kawasaki disease.Autoimmunity，2010，43(4):317-324.

ClinicalcharacteristicsandchangesinlymphocytesubsetsandimmunoglobulinlevelinchildrenwithKawasakidiseasecomplicatedwithinfection

TangXikang，ChenZekai，LiRuxia，MaiYougang，QinLijun.

DepartmentofPaediatrics，SunYat-SenMemorialHospitalofSunYat-senUniversity,Guangzhou510120,China

ObjectiveTo investigate the clinical characteristics and changes in the lymphocyte subsets and immunoglobulin levels in children with Kawasaki disease complicated with infection.MethodsTwenty nine Kawasaki disease children complicated with infection were enrolled in the infection group, thirty five Kawasaki disease children with no infection were recruited in the non-infection group, and twenty one children with inguinal hernia were included in the control group. The clinical characteristics, laboratory data, therapeutic effect of gamma globulin and short-term coronary artery lesion were statistically compared between the infection and non-infection groups. The lymphocyte subsets and immunoglobulin levels were statistically compared among all three groups.ResultsThe clinical characteristics, laboratory data, therapeutic effect and short-term coronary artery lesion did not significantly differ between the infection and non-infection groups (allP>0.05), whereas the incidence of long-term coronary artery lesion in the infection group was considerably higher compared with that in the non-infection group (P<0.05) Compared with the control group, the levels of CD4+,CD4+/CD8+and CD19+were significantly higher, IgG, IgA and IgM were significantly elevated, whereas the level of CD8+was dramatically decreased in children with Kawasaki disease (allP<0.05). The lymphocyte subsets and immunoglobulin levels did not significantly differ between the infection and non-infection groups (bothP>0.05).ConclusionsInfection did not affect the clinical characteristics, laboratory data, therapeutic effect or short-term coronary artery lesion in children diagnosed with Kawasaki disease, probably because the infection did not influence the host immunity. However, the infection possibly increased the risk of coronary artery lesion in the long term and such patients should be closely followed up.

Kawasaki disease; Infection; Immunity; Coronary artery lesion

10.3969/g.issn.0253-9802.2015.09.010

510120 廣州，中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院兒科 (湯昔康，陳澤楷，麥友剛，覃麗君)；510630 廣州，中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院急診科(李汝霞)

2015-05-13) (本文編輯：林燕薇)