銀杏葉黃酮注射液對ACI患者腦損傷因子影響研究

趙磊，牟麗，劉彥青，李文濤

(1.濰坊市益都中心醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)二科，山東 濰坊 262500；2.濰坊醫(yī)學(xué)院 解剖教研室，山東 濰坊 261053)

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銀杏葉黃酮注射液對ACI患者腦損傷因子影響研究

趙磊1，牟麗1，劉彥青1，李文濤2

(1.濰坊市益都中心醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)二科，山東 濰坊 262500；2.濰坊醫(yī)學(xué)院 解剖教研室，山東 濰坊 261053)

目的 探討銀杏葉黃酮注射液對急性腦梗死(acute cerebral infarction，ACI)患者腦損傷因子的影響及意義。方法 選取2014年6月～2015年2月已確診為急性腦梗死的患者180例，根據(jù)隨機數(shù)字表法隨機分為2組：對照組88例，行臨床常規(guī)療法治療；實驗組92例，在與對照組相同的臨床常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用銀杏葉黃酮注射液，檢測2組患者的臨床療效、神經(jīng)功能缺損評分、及血清HIF-1α、TNF-α、Caspase-3水平，進(jìn)而對比分析2種治療方法的臨床療效。結(jié)果 實驗組患者經(jīng)治療后臨床療效更優(yōu)于對照組，有效率顯著優(yōu)于對照組(P<0.05)；神經(jīng)功能缺損評分顯著低于對照組(P<0.05)；血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平低于對照組(P<0.05)，均有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 銀杏葉黃酮對急性腦梗死患者據(jù)有較好的臨床療效，且能有效改善患者神經(jīng)功能缺損癥狀，對臨床治療腦梗死具有重要意義。

銀杏葉黃酮；急性腦梗死；神經(jīng)功能缺損；HIF-1α；TNF-α；Caspase-3

腦梗死(cerebral infarction，CI)又可稱之為缺血性腦卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)，是由于各種原因所致腦部血液供應(yīng)障礙，導(dǎo)致局部腦組織缺血、缺氧性壞死，而引起神經(jīng)功能缺損的一類臨床綜合征[1]。據(jù)相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)[2]，我國每年大約有200萬患者被診斷為腦梗死。有文獻(xiàn)證實[3]，高血壓、高血脂、高血糖即“三高”病與本病的發(fā)生具有非常密切的聯(lián)系，男性因其吸煙、飲酒發(fā)病率也高于女性，且隨著年齡的增高其發(fā)病率也隨之上升。祖國醫(yī)學(xué)將腦梗死歸之于“中風(fēng)”范疇，治療當(dāng)予益氣活血、祛瘀通絡(luò)之法。銀杏葉黃酮(GinkgobilobaP.E.)是提取自銀杏干燥葉的有效成分，亦被稱為銀杏葉提取物，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其注射液具有增加腦血管流量、降低腦血管阻力、改善血液循環(huán)以及保護(hù)腦組織細(xì)胞的藥理作用[4]，臨床已有將之應(yīng)用于治療急性腦梗死的報道，并取得了較為理想的療效。低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、血清腫瘤壞死因子(TNF-α)作為腦損傷因子在急性腦梗死早期具有重要意義，但銀杏葉黃酮對急性腦梗死患者的HIF-1α、Caspase-3、TNF-α影響的相關(guān)的報道卻較為鮮見，因此通過對臨床腦梗死患者觀察，探討急性腦梗死患者經(jīng)銀杏葉黃酮治療急性腦梗死的臨床機制，為臨床醫(yī)生的診段和治療提供新的思路和方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 病例來源選擇2014年6月～2015年2月于濰坊市益都中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科以急性腦梗死為診斷而收入院的患者180例，采用隨機數(shù)字表法隨機分為實驗組和對照組。其中實驗組92例，男性58例，女性34例，38～79歲，平均年齡(67.2±8.4)歲；對照組88例，男性52例，女性36例，42～79歲，平均年齡(65.3±7.9)歲。診斷及排除標(biāo)準(zhǔn)：參照2010年中國急性缺血性腦卒中診治指南[5]中診斷標(biāo)準(zhǔn)而擬定以下納入標(biāo)準(zhǔn)：①初次發(fā)作的腦梗死患者；②發(fā)病24 h內(nèi)接受治療的患者；③CT或核磁共振等影像檢查確診為急性腦梗死患者；意識清醒同意并自愿參與本實驗的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①不愿參與本研究或不符合納入標(biāo)準(zhǔn)者；②患有心肌梗死、周圍血管性病變、較大手術(shù)病史者；③患有乙肝、艾滋病等具有較重傳染性疾病患者；④合并有嚴(yán)重肝、腎功能不全疾病患者；⑤對銀杏葉提取物注射液過敏者；⑥年齡超過80周歲者；⑦患有精神類疾病不能配合研究者。

1.2 治療方法 對照組嚴(yán)格按《2010年中國急性缺血性腦卒中診治指南》，予以臨床常規(guī)治療，奧扎格雷鈉注射液(沈陽藥大藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H20093279)80 mg，250 mL氯化鈉注射液稀釋，每天2次靜脈滴注；小牛血去蛋白提取物注射液(長春天誠藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20003820)800 mg，250 mL氯化鈉注射液稀釋，每天1次靜脈滴注；阿司匹林腸溶片(哈爾濱泰華藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H23020521)100 mg，1晚1次口服，共治療2周。

實驗組在與對照組相同的臨床常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用銀杏葉提取物注射液(悅康藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20070226)20 mL，以5%葡萄糖注射液250 mL稀釋，每天1次靜脈滴注，共治療2周。

1.3 觀察指標(biāo)及檢測方法 通過觀察治療前后2組患者臨床療效、神經(jīng)功能缺損評分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平變化比較研究。

1.3.1 療效評判標(biāo)準(zhǔn)：參照2004年第六屆全國腦血管病學(xué)術(shù)會議制定的標(biāo)準(zhǔn)[6]判定，顯效：神經(jīng)功能缺損評分減少90%以上；有效：神經(jīng)功能缺損評分減少45%～90%；進(jìn)步：神經(jīng)功能缺損評分減少18%～45%；不進(jìn)步：神經(jīng)功能缺損評分減少17%～0%：惡化：神經(jīng)功能缺損評分增加18%以上；死亡。

1.3.2 神經(jīng)功能缺損評分：參照1995年全國第四屆腦血管病會議制定的評分方法[7]進(jìn)行2組患者的神經(jīng)功能缺損評分，最低為0分，最高為45分。

1.3.3 血清指標(biāo)采集：所有研究對象均在治療前、后，空腹8 h后從肘靜脈抽取靜脈血3 mL，置于真空采血管中，4 ℃低溫環(huán)境下靜置1 h后用水平離心機以3000 r/min轉(zhuǎn)速離心 20 min， 分離血清，行雙抗體夾心ELISA法檢測血清中HIF-1α、Caspase-3、TNF-α濃度水平(試劑盒均由康泰生物科技有限公司提供)，試劑盒使用方法按其說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

2 結(jié)果

2.1 患者的一般資料 在各項人口學(xué)基本特征數(shù)據(jù)中，2組患者的性別、年齡、病程、收縮壓、舒張壓、高血壓、冠心病、糖尿病人數(shù)的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 2組患者一般資料的比較Tab.1 Comparison of the gerenal data of two groups

2.2 治療2周后2組患者療效比較 經(jīng)2周治療后，對照組死亡6例，惡化15例，實驗組死亡3例，惡化8例，其余患者均有較好的治療效果。實驗組患者總有效率顯著高于對照組(χ2=4.363，P<0.05)，見表 2。

表2 治療2周后2組患者療效比較[n(%)]Tab.2 Comparison of clinical effect of two groups after two weeks treatment [n(%)]

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.3 2組患者治療前后神經(jīng)功能缺損評分情況比較 治療前2組神經(jīng)功能缺損評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義；經(jīng)2周治療后，實驗組患者神經(jīng)功能缺損評分顯著低于對照組(P<0.05)，見表 3。

表3 2組患者治療前后神經(jīng)功能缺損評分比較±s)Tab.3 Comparison of MESS of two groups before and after ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較,compared with before treatment in the same group；#P<0.05，與對照組比較,compared with control group

2.4 治療2周后2組患者血清各指標(biāo)情況比較 經(jīng)2周治療后，2組患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平均有所降低，但實驗組顯著優(yōu)于對照組(P<0.05)，見表 4。

表4 治療2周后2組患者血清HIF-1α、Caspase-3與TNF-α比較Tab.4 Comparison of HIF-1α，Caspase-3 and TNF-α of two groups after two weeks ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with before treatment in the same group；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

3 討論

急性腦梗死是一種具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的臨床常見病，且由于人口老齡化的加劇、飲食結(jié)構(gòu)等因素的變化，不僅其好發(fā)人群逐漸年輕化，其發(fā)病率亦也呈逐年上升的趨勢。據(jù)相關(guān)流行病學(xué)發(fā)現(xiàn)，高血脂、高血糖、高血壓都是促進(jìn)本病發(fā)生的主要因素，且與吸煙、飲酒以及高壓力的工作環(huán)境有較大聯(lián)系。急性腦梗死是腦部動脈及其分支發(fā)生粥樣硬化的主要結(jié)局，當(dāng)機體發(fā)生急性腦梗死后，其腦部組織的生物氧化功能隨即發(fā)生異常改變，產(chǎn)生大量自由基，腦組織細(xì)胞因其細(xì)胞膜脂質(zhì)被大量自由基發(fā)生過氧化反應(yīng)而死亡，臨床即形成神經(jīng)功能受損癥狀[8]。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)將急性腦梗死歸屬于“中風(fēng)”范疇，治療當(dāng)以益氣活血、祛瘀通絡(luò)為主要治療方法[9]。銀杏葉提取物注射液是近年來新興的藥物，提取自銀杏科植物銀杏的干燥葉，其主要有效成分為銀杏葉黃酮?，F(xiàn)在臨床主要將之應(yīng)用于治療冠心病、心絞痛、腦動脈硬化以及高血壓等心腦血管疾病。據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報道[10]，銀杏葉黃酮具有多種藥理作用，不僅能增加腦血流量、改善腦部組織血液循環(huán)、擴張冠狀動脈，還能抑制血小板聚集、抗衰老、提高免疫力的功能。臨床雖有將銀杏葉黃酮用于治療急性腦梗死的文獻(xiàn)報道，但并沒有從HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等血清指標(biāo)的角度進(jìn)行分析研究。因此，本研究通過對急性腦梗死患者應(yīng)用銀杏葉提取物注射液，進(jìn)一步探究其對患者神經(jīng)功能缺損評分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指標(biāo)的影響，以明確其臨床療效，并得出相關(guān)結(jié)論。

本研究結(jié)果表明，銀杏葉黃酮能有效改善急性腦梗死患者神經(jīng)功能缺損癥狀，提高治療率。實驗組患者經(jīng)2周治療后，其有效率明顯優(yōu)于對照組，死亡率明顯低于對照組。其原因可能是銀杏葉黃酮能有效增加受損腦部組織的血流量，改善其缺血程度，以及還能抑制血小板聚集，防治血栓形成、缺血加劇，從而降低神經(jīng)功能缺損評分，提高治療有效率，降低死亡率[11]。亦有學(xué)者研究證明[12]，銀杏葉黃酮具有降低血液黏稠度、清除自由基、改善腦功能的作用，在急性腦梗死發(fā)生早期可及時有效地清除大量自由基，在一定程度上防治神經(jīng)功能缺損癥狀的加劇，這一結(jié)論也可能是實驗組患者有效率、神經(jīng)功能缺損評分優(yōu)于對照組的原因。

本研究結(jié)果表明，銀杏葉黃酮能有效調(diào)節(jié)急性腦梗死患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指標(biāo)水平。HIF-1α是在人體缺氧的條件下而產(chǎn)生的一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，在正常氧氣充足條件下并不表達(dá)，只有當(dāng)機體組織發(fā)生缺氧時，才會被誘導(dǎo)激活并發(fā)揮其特有的生理作用，是人體在缺氧條件下維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的主要物質(zhì)[13]。研究發(fā)現(xiàn)[14]，HIF-1α主要通過調(diào)節(jié)缺氧反應(yīng)性基因表達(dá)的分子通路而發(fā)揮其生理作用，據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)統(tǒng)計，HIF-1α的下游基因多達(dá)百余種，在缺氧發(fā)生時不僅可以促進(jìn)紅細(xì)胞、血管的生成，還能調(diào)節(jié)糖代謝、維持人體微環(huán)境穩(wěn)態(tài)。但其發(fā)揮作用的具體機制目前仍未十分清楚，各家觀點亦不十分相同[15]。在本研究中治療前2組患者HIF-1α水平均較高，其原因可能與腦組織突發(fā)梗死急劇缺氧、缺血促進(jìn)其大量表達(dá)有關(guān)，而治療結(jié)束后實驗組明顯低于對照組，其原因可能是實驗組在應(yīng)用銀杏葉黃酮后，病變部腦組織的血流量增加，其缺血、缺氧程度得到有效改善，因此血清HIF-1α水平也隨之恢復(fù)。Caspase-3是一種能夠促使細(xì)胞凋亡的蛋白酶，在急性腦梗死發(fā)生時具有促進(jìn)病變區(qū)神經(jīng)元凋亡的重要作用。人體在正常生理條件下，Caspase-3以沒有活性的酶原形式存在，并不發(fā)揮其生理作用，只有被細(xì)胞開始凋亡的信號激活后，才會活化并發(fā)揮其加速誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。研究發(fā)現(xiàn)[16]，急性腦梗死患者在應(yīng)用Caspase-3抑制劑后，能夠明顯減輕病變區(qū)腦組織缺血神經(jīng)元的損傷，且通過抑制Caspase-3表達(dá)亦可減輕腦缺血的損傷程度，降低致殘率。在本研究中，2組患者在新發(fā)病時，Caspase-3皆高度表達(dá)，而治療結(jié)束后實驗組患者血清Caspase-3水平明顯低于對照組，這一結(jié)果可能與實驗組在應(yīng)用銀杏葉黃酮后體內(nèi)Caspase-3表達(dá)受到相應(yīng)抑制有關(guān)，結(jié)合“抑制Caspase-3表達(dá)亦可減輕腦缺血的損傷程度”的結(jié)論，本研究中實驗組患者療效及神經(jīng)功能缺損評分低的結(jié)果能夠得以解釋。TNF-α是一種早期炎性因子，主要由單核-巨噬細(xì)胞活化產(chǎn)生，在腦梗死急性期可加重患者腦缺血局部組織的損害，實驗組患者經(jīng)治療后其血清TNF-α水平明顯低于對照組，其原因可能與銀杏葉黃酮調(diào)節(jié)免疫的功能有關(guān)，但其具體抗炎、調(diào)節(jié)免疫的機制目前尚不十分清楚。

本研究通過對180例急性腦梗死患者的治療療效及血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平變化進(jìn)行分析，證實了銀杏葉黃酮對急性腦梗死患者具有更好的療效。因此，對于急性腦梗死患者及時地應(yīng)用銀杏葉黃酮進(jìn)行治療具有重要意義。在未來的研究中，將對銀杏葉黃酮影響患者免疫功能的實質(zhì)原因進(jìn)行更深入的研究，為本實驗所得出的結(jié)果做出進(jìn)一步的論證和分析。

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(編校：王冬梅)

Study on effect of brain injury factor in patients with acute cerebral infarction by Ginkgetin injection

ZHAO Lei1, MOU Li1, LIU Yan-qing1, LI Wen-tao2

(1.The Second Department of Neurology, Weifang YiDu Central Hospital, Weifang 262500, China; 2.Department of Anatomy, Weifang Medical University, Weifang 261053, China)

ObjectiveTo explore effect of ginkgetin injection on brain damage factor in patients with acute cerebral infarction.Methods180 cases of acute cerebral infarction patients were selected from June 2014 to February 2015, and divided into experiment group and control group.88 cases in control group were treated with clinical routine therapy, 92 cases in experimental group were treated on base of the control with ginkgetin injection, 2 weeks for a course.The clinical efficacy, MESS and serum HIF-1α, TNF-α, Caspase-3, were detected and compared.ResultsThe clinical efficacy of the experiment group was better than that of control group(P<0.05),and the MESS of the experiment group was lower than the control group(P<0.05).Serum HIF-1α, Caspase-3, TNF-α levels were lower than the control group(P<0.05).ConclusionGinkgetin injection can effectively improve the patient’s neurological symptoms, it is of great significance to the clinical treatment of cerebral infarction.

ginkgetin injection; acute cerebral infarction;MESS HIF-1α;TNF-α;caspase-3

趙磊，男，本科，住院醫(yī)師，研究方向：神經(jīng)內(nèi)科，E-mail：sjkzlei@163.com。

R74

A

1005-1678(2015)05-0150-04