牙痛寧酊輔助根管植入對患者齦溝液內(nèi)IL-8、CD4及HSP70水平的影響

王香蕓，張夫波

(浙江省余姚市第二人民醫(yī)院 口腔科，浙江 余姚 315400)

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牙痛寧酊輔助根管植入對患者齦溝液內(nèi)IL-8、CD4及HSP70水平的影響

王香蕓Δ，張夫波

(浙江省余姚市第二人民醫(yī)院 口腔科，浙江 余姚 315400)

目的 探究牙痛寧酊輔助根管植入對牙周炎患者血清白細(xì)胞介素-8(interleukin 8，IL-8)、白細(xì)胞分化抗原4(cluster of differentiation 4，CD4)及熱休克蛋白70 (heat shock protein 70，HSP70)水平影響。方法 收集2013年12月～2015年9月浙江省余姚市第二人民醫(yī)院口腔科收治的牙周炎患者64例，根據(jù)治療方法不同分為對照組和治療組，治療組33例，對照組31例，2組患者均實(shí)施根管植入治療，治療組在此基礎(chǔ)上實(shí)施速效牙痛寧酊治療方案，治療結(jié)束后對比分析2組患者臨床療效、疼痛發(fā)生率、IL-8、CD4及 HSP70水平。結(jié)果 治療組臨床總有效率為96.97%(32例)，顯著高于對照組的80.65%(31例)(χ2=4.373，P<0.05)。治療組疼痛發(fā)生率為30.30%(10例)，顯著低于對照組的58.06%(18例)(χ2=5.006，P<0.05)。治療后，2組血清IL -8水平均明顯升高，CD4、HSP70水平顯著降低(P<0.05)，與對照組相比，治療組血清IL -8水平顯著升高，CD4、HSP70水平顯著降低(P<0.05)。結(jié)論 牙痛寧酊輔助根管植入提高根管治療效果，緩解牙組織損傷，改善手術(shù)后患者疼痛。

牙痛寧酊；根管植入；牙周炎；白細(xì)胞介素-8；白細(xì)胞分化抗原4；熱休克蛋白70

牙周炎是一種破壞性疾病，與微生物、宿主和環(huán)境有關(guān)，是導(dǎo)致成年人牙齒喪失的主要原因[1]。在局部致病因素中，以菌斑多見，吸煙和肥胖則是眾多全身因素中的高危因素。臨床以根管治療為主要治療手段，采取機(jī)械或者化學(xué)等手段，清除根管內(nèi)大部分感染物，通過根管填充防止反復(fù)感染的發(fā)生，應(yīng)用生物相容性較好的人工材料，用充填材料長期嚴(yán)密地封閉根管，預(yù)防根尖周病變的發(fā)生或促進(jìn)根尖周病變的愈合[2]。研究發(fā)現(xiàn)[3]，采用速效牙痛寧酊輔助根管植入具有較好的鎮(zhèn)痛療效。本文基于大量數(shù)據(jù)研究，探究牙痛寧酊輔助根管植入對牙周炎患者血清白細(xì)胞介素-8(interleukin 8，IL-8)、白細(xì)胞分化抗原4(cluster of differentiation 4，CD4)及熱休克蛋白70 (heat shock protein 70，HSP70)水平影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年12月～2015年9月浙江省余姚市第二人民醫(yī)院口腔科收治的牙周炎患者64例，男性30例，女性34例，年齡45～74歲，平均年齡(60.18±7.56)歲，29顆上頜磨牙，35顆下頜磨牙。采用隨機(jī)數(shù)字分配法分為治療組與對照組，治療組33例，男性15例，女性18例，年齡48～74歲，平均年齡(61.45±8.11)歲，14顆上頜磨牙 ，19顆下頜磨牙；對照組31例，男性15例，女性16例，年齡45～73歲，平均年齡(59.84±7.59)歲，15顆上頜磨牙 ，16顆下頜磨牙。2組患者一般資料相仿，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究獲得本院倫理協(xié)會批準(zhǔn)。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合以下條件：①診斷符合中華醫(yī)學(xué)會《臨床診療指南——口腔醫(yī)學(xué)分冊》[4]中牙周炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)具備以下臨床特點(diǎn)：齒齦出血、腫脹以及疼痛等癥狀；②牙齒有觸痛感，刷牙容易出血；③患者均為自愿參與本實(shí)驗(yàn)，并簽署知情同意書。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①藥物過敏史，治療前1周內(nèi)接受抗生素治療的患者，根管再治療者；②感染、嚴(yán)重高血壓、糖尿病以及嚴(yán)重心、肝、腎等多臟器功能障礙或衰竭；③惡性腫瘤、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：患者入院后均進(jìn)行X片、血常規(guī)、尿常規(guī)等常規(guī)檢查，根據(jù)患者根管形狀、走向以及主要的病理改變類型等，實(shí)施根管治療，具體方法如下，實(shí)施2%鹽酸普魯卡因注射液(重慶迪康長江制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H50020914)或者利多卡因(鹽酸利多卡因注射液，國藥準(zhǔn)字H11020558)進(jìn)行局部麻醉患牙，打開牙髓腔并剔除冠髓，將根髓抽出，根管預(yù)備完成，將患牙隔濕，吸除根管內(nèi)液體，充填根管應(yīng)用氧化鋅丁香油碘仿糊劑配合牙膠尖側(cè)方加壓法，X線片檢測根管，預(yù)防異樣的出現(xiàn)。應(yīng)用維生素C以及抗生素等藥物進(jìn)行常規(guī)治療，療程為4周，并進(jìn)行復(fù)查。治療組在此基礎(chǔ)上實(shí)施速效牙痛寧酊(湖北午時(shí)藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字Z42020010)治療方案，棉簽蘸取藥液適量，均勻涂于患處，每天3次，重癥患者可多次反復(fù)使用。

1.2.2 觀察指標(biāo)：

① 療效評定標(biāo)準(zhǔn)：療效評定標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《中醫(yī)病證診療常規(guī)》中胃火牙痛癥狀進(jìn)行評價(jià)[5]，治療結(jié)束后患牙無疼痛感，牙齒咀嚼正常，不存在不適感、叩擊痛以及牙齦紅腫等情況為顯效；患牙疼痛感基本消失，咀嚼功能除稍不適其余恢復(fù)正常，牙齦紅腫等癥狀改善為有效；患牙臨床表現(xiàn)無緩解或加重，顯示嚴(yán)重牙周炎癥狀為無效?？傆行?(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。根據(jù)疼痛視覺模擬評分(VAS)評價(jià)[6]，分為無痛、輕痛、中痛以及重痛，疼痛的發(fā)生率=(輕痛例數(shù)+中痛例數(shù)+重痛例數(shù))/總例數(shù)×100%。

② 2組患者IL-8、CD4及HSP70水平檢測：采集齦溝液1 mL，選擇2組患者單側(cè)1位、4位以及6牙位，使用periopaper置于中牙周袋插進(jìn)入齦溝底，直至遇輕微阻力，持續(xù)30 s，測量其長度并稱重，3位點(diǎn)periopaper放置同一消毒EP管，于-70 ℃冰柜內(nèi)冷凍保存，檢測前放置室溫內(nèi)解凍，使用500 μL PBS液洗脫齦溝液內(nèi)的樣品，震蕩取上清液，應(yīng)用晶美生物工程有限公司生成的ELISA試劑盒，實(shí)施酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)(M600酶標(biāo)儀，上海研卉生物科技有限公司) 檢測患牙齦溝液內(nèi)IL-8、CD4以及HSP70水平。

2 結(jié)果

2.1 2組患者療效比較 治療組臨床總有效率為96.97%(32例)，顯著高于對照組的80.65%(31例)(χ2=4.373，P<0.05)。見表1。

表1 2組患者療效比較[n(%)]Tab.1 Comparison of efficacy between two groups[n(%)]

#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 2組患者疼痛發(fā)生率比較 治療組疼痛發(fā)生率為30.30%(10例)，顯著低于對照組的58.06%(18例)(χ2=5.006，P<0.05)。見表2。

表2 2組患者疼痛發(fā)生率結(jié)果[n(%)]Tab.2 Comparison of pain incidence between two groups[n(%)]

#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.3 2組齦溝液內(nèi)IL-8,CD4及HSP 70水平比較 治療后，2組IL -8水平均明顯升高，CD4、HSP70水平顯著降低(P<0.05)，與對照組相比，治療組IL -8水平顯著升高，CD4、HSP70水平顯著降低(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者齦溝液內(nèi)IL-8,CD4及HSP 70水平比較Tab.3 Comparison of IL-8, CD4 and Hsp70 levels in gingival crevicular fluid between two ±s，pg/mL)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

人類牙齒容易出現(xiàn)血液循環(huán)障礙，出現(xiàn)牙周炎。牙周炎分為急性牙周炎以及慢性牙周炎，急慢性牙周炎患者無法自愈，牙齒未受到滋養(yǎng)，導(dǎo)致局部組織膿腫以及骨質(zhì)受損，牙器官缺失。現(xiàn)代臨床對于根管治療研究較多，并隨著治療醫(yī)師手術(shù)熟練程度、麻醉效果、醫(yī)療器械以及方法的更新?lián)Q代，臨床治療例數(shù)得到穩(wěn)步提高，獲得臨床醫(yī)療人員的廣泛應(yīng)用[7]。根管治療的術(shù)中器械的使用、根管細(xì)菌、碎屑等微生物較多導(dǎo)致清洗不徹底，術(shù)后感染、紅腫等不良反應(yīng)較多[8]，預(yù)后較差，患者依從性較差，導(dǎo)致術(shù)后炎癥反應(yīng)發(fā)生率高達(dá)10%。研究表明[9]，運(yùn)用速效牙痛寧酊進(jìn)行輔助治療可預(yù)防各種并發(fā)癥以及預(yù)后療效較高。牙痛寧酊由芫花根以及地骨皮等中藥組成，并應(yīng)用現(xiàn)代工藝提取、提煉和制備生成的酊劑[10]。芫花根是瑞香科植物芫花的根莖，具有利水消腫，解毒散結(jié)，祛風(fēng)盛濕的療效，應(yīng)用于局部水腫、瘰疬、乳癰、風(fēng)濕筋骨痛以及跌打損傷等疾病;地骨皮是一種茄科植物枸杞的根皮部位，蕪花采用醋酸乙酯進(jìn)行分離純化具有涼血除蒸，清肺祛火的療效，應(yīng)用于治療高血脂、高血糖、免疫力降低、疼痛、瘀滯以及疥瘡等疾病。此方諸藥合用具有消腫化淤，祛風(fēng)止痛的療效，臨床用于急慢性牙痛、牙本質(zhì)過敏以及牙周炎等癥。本研究顯示，治療后與對照組相比，治療組臨床總有效率較高，疼痛發(fā)生率較低(P<0.05)，證實(shí)牙痛寧酊輔助根管植入對牙周炎患者明顯降低患者術(shù)后疼痛，提高患者生活質(zhì)量，強(qiáng)化了臨床根管植入治療的效果，提高患者依從性。

與對照組相比，治療組IL -8水平較高，CD4水平較低(P<0.05)，證實(shí)牙痛寧酊輔助根管植入對牙周炎患者具有改善牙周，緩解牙組織損傷，有效治療疾病，改善牙齦免疫應(yīng)答功能。IL-8是中性粒細(xì)胞的主要功能調(diào)節(jié)因子之一，對中性粒細(xì)胞具有很強(qiáng)的活化和趨化作用，通過調(diào)節(jié)中性粒細(xì)胞在牙齦組織中的補(bǔ)充和激活而在牙周炎病變的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[11]。發(fā)病初期，牙齦內(nèi)皮細(xì)胞受IL-1β以及TNF和細(xì)菌等多種因素刺激產(chǎn)生IL - 8，導(dǎo)致IL-8水平增高；若趨化以及激活中性粒細(xì)胞減弱與IL-8水平降低共同發(fā)生，吞噬微生物作用減弱，感染物質(zhì)在齦溝液內(nèi)無法清除，炎性因子增多，牙周組織遭到嚴(yán)重?fù)p壞，牙槽骨受損。CD4是一種由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞分泌產(chǎn)生的分化抗原，是脂多糖/脂多糖結(jié)合蛋白( LPS/LBP)復(fù)合物的受體蛋白，其中內(nèi)毒素即脂多糖 (LPS)是一種以革蘭氏陰性細(xì)胞壁為主的內(nèi)毒素[12]。牙周炎患者纖維蛋白原水平增高，口腔內(nèi)病菌增多，患者體內(nèi)LBP與CD4作用增強(qiáng)，使單核細(xì)胞激活，免疫應(yīng)答以及免疫病理發(fā)生，細(xì)胞因子分泌增多，體內(nèi)出現(xiàn)病理損傷，CD4基因中具有急慢性牙周炎的患病風(fēng)險(xiǎn)因子。曾有研究顯示，HIV陽性牙周炎患者與健康人相比機(jī)體CD4陽性表達(dá)率較高[13]。

HSP70具有誘發(fā)牙周炎發(fā)生發(fā)展以及免疫應(yīng)答發(fā)生的作用，是臨床經(jīng)典外源抗原，作為宿主細(xì)胞免疫以及體液免疫產(chǎn)生應(yīng)答的抗體，具有很強(qiáng)的佐劑性,在體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答中均可產(chǎn)生作用[14]。細(xì)菌源性的 HSP70由于其同源性能夠被宿主作為抗原識別，在毒物應(yīng)激及致癌物質(zhì)應(yīng)激中反應(yīng)增強(qiáng)[15]。激活對自身HSP70的交叉反應(yīng)，促使過度的免疫調(diào)節(jié)導(dǎo)致牙周炎等自身免疫疾病的發(fā)生。本研究顯示，與對照組相比，治療組HSP70水平較低(P<0.05)，證實(shí)牙痛寧酊輔助根管植入改善患者過度自身免疫，緩解疼痛。

本研究通過對本院口腔科收治的64例牙周炎患者的臨床療效、疼痛發(fā)生率、IL-8、CD4及 HSP70水平進(jìn)行研究，證實(shí)了牙痛寧酊輔助根管植入提高根管治療效果，緩解牙組織損傷，改善手術(shù)后患者疼痛。在下一步研究中，本課題組將進(jìn)行藥理學(xué)方面研究，對本實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)現(xiàn)象做進(jìn)一步研究。

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(編校：王儼儼)

Effect of Yatongning tincture root canal implantation on IL-8,CD4 and HSP70 levels in gingival crevicular fluid of patients with periodontitis

WANG Xiang-yunΔ, ZHANG Fu-bo

(Department of Stomatology, Yuyao Second People’s Hospital, Yuyao 315400, China)

ObjectiveTo explore the effect of Yatongning tincture root canal implantation on interleukin 8 (IL-8), cluster of differentiation 4(CD4) and heat shock protein 70(HSP70) in in gingival crevicular fluid of patients with periodontitis.Methods64 patients with periodontitis from December 2013 to September 2015 in stomatology department of Yuyao Second People’s Hospital were selected and according to the different treatment methods divided into treatment group and control group, 33 cases in treatment group, 31 cases in control group. Patients received root canal implantation in two groups, the treatment group received Yatongning tincture root canal implantation on the basis of control group. The clinical curative effect, incidence of pain, IL-8, CD4 and HSP70 levels were compared between two groups.ResultsThe clinical curative effect of treatment group was 96.97% (32 cases), which was higher than 80.65% (31 cases) of control group (χ2=4.373,P<0.05). The pain incidence of treatment group was 30.30% (10 cases), which was higher than 58.06% (18 cases) of control group (χ2=5.006，P<0.05). After treatment, the IL -8 levels were higher and CD4, HSP70 levels were lower in two groups than those pre-treatment(P<0.05), compared with control group, the IL -8 levels were higher and CD4, HSP70 levels were lower in treatment group(P<0.05).ConclusionYatongning tincture root canal implantation could enhance the clinical efficacy, relieve tooth tissue damage and improve the post-operative pain in patients.

Yatongning tincture; root canal implantation; periodontitis; interleukin 8; cluster of differentiation 4; heat shock protein 70

王香蕓，通信作者，女，本科，研究方向：口腔綜合偏口腔外科，E-mail：wxykqk@163.com。

R782.3

A

1005-1678(2015)12-0160-03