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    雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響

    2015-07-07 14:58:02曹萍于成功
    中國生化藥物雜志 2015年6期
    關(guān)鍵詞:內(nèi)毒素雙歧感染性

    曹萍,于成功

    (1.南京醫(yī)科大學(xué)鼓樓臨床醫(yī)學(xué)院 消化內(nèi)科,江蘇 南京 210000;2.南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 消化內(nèi)科,江蘇 南京 210008)

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    雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響

    曹萍1,于成功2Δ

    (1.南京醫(yī)科大學(xué)鼓樓臨床醫(yī)學(xué)院 消化內(nèi)科,江蘇 南京 210000;2.南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 消化內(nèi)科,江蘇 南京 210008)

    目的 研究雙歧桿菌三聯(lián)活菌散(小培菲康)對感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響。方法 選取2010年10月~2014年10月期間收治120例急性腹瀉患者作為研究對象,選取同一時期來進(jìn)行健康查體的30例作為健康對照組,將患者分為2組:其中小培菲康組60例(小培菲康1 g/次,3次/d),對照組60例(常規(guī)治療)。比較患者治療的臨床療效和治療前后腸道菌群和血清炎癥因子的變化。結(jié)果 小培菲康組治療有效率100.00%,對照組有效率96.67%,2組患者的臨床療效比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.52,P<0.05)。2組患者的腹瀉、嘔吐和發(fā)熱消失時間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),2組患者脫水癥狀的消失時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與健康對照組相比,治療前小培菲康組和對照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值較低,腸桿菌計數(shù)較高(P<0.05);治療后,小培菲康組和對照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值均較治療前顯著上升,腸桿菌計數(shù)顯著下降(P<0.05),小培菲康組患者腸桿菌、B/E改善較對照組顯著(P<0.05)。治療前小培菲康組和對照組患者的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平顯著高于健康對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);治療后,2組患者治療后的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平顯著下降(P<0.05),其中小培菲康組下降程度較對照組顯著(P<0.05)。結(jié)論 雙歧桿菌三聯(lián)活菌散可以通過調(diào)整腸道菌群和免疫調(diào)節(jié)作用而發(fā)揮作用,促進(jìn)感染性腹瀉患者的恢復(fù)。

    感染性腹瀉;雙歧桿菌三聯(lián)活菌散;腸道菌群;炎癥因子

    急性感染性腹瀉是常見的消化內(nèi)科疾病,臨床上既往將控制感染、消滅病原體作為重要的治療措施[1]。研究發(fā)現(xiàn),急性感染性腹瀉患者多存在腸道菌群的紊亂和細(xì)菌內(nèi)毒素吸收,故微生態(tài)制劑在該疾病治療中的應(yīng)用價值引起了臨床上的重視[2]。本次研究旨在研究雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2010年10月~2014年10月期間南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院消化內(nèi)科收治120例急性腹瀉患者作為研究對象,所有患者均符合《中國腹瀉病診斷治療方案》[3]中的成人感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)。所有患者均在腹瀉48 h內(nèi)入院,伴有不同程度的腹痛、發(fā)熱、惡心嘔吐等癥狀。根據(jù)就診順序?qū)颊哌M(jìn)行編號并采用隨機數(shù)字表法將患者分為2組:小培菲康組60例,其中男性39例,女性21例,患者年齡21~49歲,平均(38.6±4.8)歲;對照組60例,其中男性41例,女性19例,患者年齡20~50歲,平均(39.7±5.5)歲。2組患者的年齡、性別和病情嚴(yán)重程度比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

    選取同一時期來本院進(jìn)行健康查體的30例作為健康對照組,其中男性19例,女性11例,年齡22~47歲,平均(38.8±5.1)歲。

    1.2 治療方法 2組患者均采取對癥,根據(jù)病情給予抗炎、降溫、止吐和補液治療,注意維持患者的水電解質(zhì)平衡。患者住院期間嚴(yán)格注意飲食衛(wèi)生,禁止食用生冷、辛辣刺激和油膩食物,保證熱量和蛋白質(zhì)充足。

    小培菲康組患者在上述治療的基礎(chǔ)上口服雙歧桿菌三聯(lián)活菌散(上海信誼藥廠,批號:20100602),每次1 g,3次/d,飯后溫水沖服。上述治療持續(xù)3 d。

    1.3 觀察指標(biāo)

    1.3.1 臨床療效:評價標(biāo)準(zhǔn)參照《中國腹瀉病診斷治療方案》[3]。顯效:治療72 h后糞便性能及次數(shù)恢復(fù)正常,全身癥狀消失;有效:治療72 h糞便性能及次數(shù)明顯好轉(zhuǎn),全身癥狀明顯好轉(zhuǎn);無效:治療72 h后,糞便性能及次數(shù)無明顯改變或增多,全身癥狀無明顯改善或加劇??傆行?(顯效+有效)/總病例數(shù)×100.00%。記錄患者的腹瀉、嘔吐、發(fā)熱及脫水等癥狀的消失時間。

    1.3.2 腸道菌群的變化[4]:患者治療前后均采用收集濕便樣本置于無菌便盒內(nèi),保溫后于30 min內(nèi)送檢。腸道菌群檢測采用活菌平板計數(shù)法,將雙歧桿菌、乳桿菌培養(yǎng)基置于厭氧罐中,放入?yún)捬醢l(fā)生劑然后封閉, 再放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48~72 h;腸桿菌、腸球菌培養(yǎng)基直接放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48 h。計數(shù)并記錄每個平板上的菌落數(shù),可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30~300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)。腸道定植抗力(colonization resistance, CR)計算采用B/E 值,即雙歧桿菌與腸桿菌數(shù)值之比[5]。采用相同方法檢測健康對照組患者的腸道菌群。

    1.3.3 血清炎癥因子水平的變化:所有患者入院時和治療3 d后均抽取靜脈血5 mL置于抗凝試管中,離心后分離血清并做好標(biāo)記,于-80 ℃下保存樣本,批量送檢。血清內(nèi)毒素水平檢測采用光度測量法,試劑盒由湛江博康海洋生物有限公司(20100807)提供。采用ELISA方法檢測大鼠的血清IL-6和TNF-α水平,試劑盒由鄭州安塞生物科技有限公司提供(批號:20101007)。CRP測量采用免疫增強比濁法,試劑盒由南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司提供(批號:20100902)。同時檢測健康對照組患者血清炎癥因子水平。上述操作由本院檢驗科協(xié)助完成。

    2 結(jié)果

    2.1 2組患者的臨床療效比較 治療后,小培菲康組47例患者治療顯效,13例患者治療有效,治療有效率100.00%,對照組34例患者治療有效,24例患者治療顯效,有效率96.67%,2組患者的臨床療效比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.52,P<0.05),見表1。

    表1 2組患者的臨床療效比較 [n(%)]Tab.1 Comparison of clinical efficacy between the two groups [n(%)]

    △P<0.05,與對照組相比,compared with control group after treatment

    2.2 癥狀消失時間 2組患者的腹瀉、嘔吐和發(fā)熱消失時間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),脫水癥狀的消失時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,見表2。

    表2 2組患者的癥狀消失時間±s,h)Tab.2 Comparison of symptom disappearance time between two groups ±s,h)

    △P<0.05,與對照組相比,compared with control group after treatment

    2.3 各組的腸道菌群比較

    治療前與健康對照組相比,小培菲康組和對照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值較低,患者腸桿菌計數(shù)較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后,小培菲康組和對照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值均較治療前顯著上升,腸桿菌計數(shù)顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),小培菲康組患者腸桿菌、B/E改善較對照組顯著,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

    表3 各組的腸道菌群比較濕便)Tab.3 Comparison of intestinal flora among different groups ±s,logCFU/g wet excrement)

    #P<0.05,與健康對照組相比,compared with healthy control group;*P<0.05,與治療前相比,compared with before treatment;△P<0.05,治療后與對照組相比,compared with control group after treatment

    2.4 各組血清炎癥因子水平比較 治療前與健康對照組相比,小培菲康組和對照組患者的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后,2組患者治療后的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平較治療前顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其中小培菲康組下降程度較對照組顯著,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 見表4。

    表4 各組血清炎癥因子水平比較±s)Tab.4 Comparison of inflammation factors level among different ±s)

    #P<0.05,與健康對照組相比,compared with healthy control group;*P<0.05,與治療前相比,compared with before treatment;△P<0.05,治療后與對照組相比,compared with control group after treatment

    3 討論

    急性感染性腹瀉是由病原微生物感染引起的腹瀉,患者常存在嚴(yán)重的菌群失調(diào),腸道內(nèi)環(huán)境發(fā)生紊亂,腸道屏障功能下降[6]。本次研究中,旨在研究雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響。

    研究中,與健康人群相比,感染性腹瀉患者的雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量下降,而腸桿菌數(shù)量上升,患者B/E值下降。B/E值即為雙歧桿菌和腸球菌的比值,可以反映內(nèi)源性厭氧菌對致病菌的抑制能力,用以反映生物學(xué)屏障功能。B/E值小于1提示腸道的抗感染能力受損。感染性腹瀉的患者腸道B/E值平均值明顯降低,提示患者的腸道生物學(xué)屏障作用受損[7-8]。

    研究結(jié)果顯示,感染性腹瀉患者血清中的內(nèi)毒素水平和炎性因子水平明顯上升。C反應(yīng)蛋白是衡量炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo),作為一種急性時相反應(yīng)蛋白,它對感染,損傷等非特異性的炎癥反應(yīng)具有較高的診斷價值[9]。與健康人相比,感染性腹瀉患者的CRP水平明顯上升,說明患者體內(nèi)存在嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。其原因如下:腸道內(nèi)的微生物代謝持續(xù)產(chǎn)生內(nèi)毒素,當(dāng)機體防御功能下降時,病原體可以侵入腸道上皮刷狀緣,在細(xì)胞外繁殖產(chǎn)生腸毒素。正常情況下,腸道黏膜的屏障功能可以阻止內(nèi)毒素的吸收,但感染性患者存在腸道菌群紊亂,內(nèi)毒素可以通過腸道黏膜上皮進(jìn)入血液[10-11]。既往研究顯示,內(nèi)毒素是TNF-α產(chǎn)生的最強誘導(dǎo)因子。由于細(xì)菌、炎癥反應(yīng)和內(nèi)毒素的共同刺激,機體巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞活化,大量TNF釋放入血。TNF-α在機體感染性疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用,可以促進(jìn)機體釋放IL-6、IL-8和血小板活化因子,而后者可以正反饋作用于單核巨噬系統(tǒng),促進(jìn)TNF的釋放,放大機體炎癥反應(yīng)[12]。因此,糾正腸道菌群紊亂、清除內(nèi)毒素和控制炎癥反應(yīng)在急性感染性腹瀉的治療中具有重要意義。

    本次研究中,經(jīng)過抗炎、降溫、止吐和補液等治療后,患者的病情明顯好轉(zhuǎn),治療具有一定的效果。與對照組相比,小培菲康組患者療效更為明顯,患者治療后的腸桿菌計數(shù)、TNF-α、IL-6和CRP下降更為明顯,而B/E值基本恢復(fù)至正常水平。小培菲康內(nèi)含有雙歧桿菌、乳桿菌和腸道糞球菌,上述菌群分口服后分別定植于腸道上、中、下部,改善腸道的屏障功能,從而抑制內(nèi)毒素的吸收并減輕與內(nèi)毒素相關(guān)的腸粘膜損傷[13]。同時,雙歧桿菌、乳桿菌和腸道糞球菌等益生菌可以激活腸道局部的淋巴組織,增強腹腔內(nèi)的巨噬細(xì)胞活性,發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,抑制機體的炎性反應(yīng)[14]。綜上所述,小培菲康可以通過調(diào)整腸道菌群和免疫調(diào)節(jié)作用而發(fā)揮作用,改善感染性腹瀉患者的癥狀。

    [1] 繆曉輝,冉陸,張文宏,等.成人急性感染性腹瀉診療專家共識[J].中華傳染病雜志,2013,31(12):705-714.

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    [3] 方鶴松, 魏承毓. 中國腹瀉病診斷治療方案[J]. 中國實用兒科雜志, 1998, (6):381-384.

    [4] 劉慧.非酒精性脂肪性肝病患者腸道菌群變化與胰島素抵抗及血清LPS、TNF-α、IL-6的相關(guān)性研究[D].安徽醫(yī)科大學(xué),2013.

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    (編校:譚玲)

    Effect of triple viable bacterium of bacillus on intestinal microflora and inflammation factors in patients with infectious diarrhea

    CAO Ping1, YU Cheng-gong2Δ

    (1. Department of Gastroenterology, Drum Tower of Clinical Medicine, Nanjing Medical University, Nanjing 210000, China; 2. Department of Gastroenterology, The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School, Nanjing 210008, China)

    ObjectiveTo study effect of triple viable bacterium of bacillus (small peifeikang) on the intestinal microflora and inflammation factors in patients with infectious diarrhea. MethodsFrom October 2010 to October 2014, 120 patients with infectious diarrhea were chosen as study objects, 30 cases of health examination were selected as healthy control group, All patients were divided into 2 groups: 60 patients in small peifeikang group and 60 patients in control group. The therapeutic effect and the change of intestinal microflora and inflammation factors were compared between two groups. ResultsThe effective rate of small peifeikang groupwas 100.00%, while that of control group was 96.67%,the difference had statistical significance(χ2=5.52,P<0.05). The symptom disappearance time of diarrhea, vomiting and fever had statistical difference between two groups (P<0.05), that of dehydration had no statistical significance. After treatment, in small peifeikang group and control group, the number of bifidobacterium, lactobacillus, and B/E value had decreased significantly (P<0.05), and the number of intestinal bacteriahad increased significantly(P<0.05).The distribution of intestinal flora in small peifeikang group was better than that of control group, and the difference had statistical significance(P<0.05).After treatment, in small peifeikang group and control group, the level of endotoxin, IL - 6, TNF-α and CRP had decreased significantly(P<0.05). The extent of decreasing in small peifeikang group was more significant than that of control group, and the difference had statistical significance(P<0.05).ConclusionThe triple viable bacterium of bacillus can promote the recurrence of patients with infectious diarrhea by adjusting the distribution of intestinal microflora, and by its immune regulation function.

    infectious diarrhea; triple viable bacterium of bacillus;intestinalmicroflora; inflammation factors

    曹萍,女,碩士,研究方向:炎癥性腸病與腸道菌群的關(guān)系,E-mail: caoping0513@163.com;于成功,通訊作者,男,博士,教授,研究方向:炎癥性腸病,E-mail:yuchenggong0110@163.com。

    R574

    A

    1005-1678(2015)06-0062-04

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