吳葆華
(青海省人民醫(yī)院消化科,青海 西寧 810007)
肝細(xì)胞癌患者真核生物翻譯起始因子-5A2、P53和上皮型黏附素表達(dá)及意義
吳葆華
(青海省人民醫(yī)院消化科,青海 西寧 810007)
目的 檢測(cè)肝細(xì)胞癌中真核生物翻譯起始因子(EIF)-5A2、突變型P53基因(P53)和上皮型黏附素(E-cadherin)的表達(dá),關(guān)注三者在不同臨床特征中的差別及相關(guān)性。方法 90例肝細(xì)胞癌臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為觀察組,以57例距腫物邊緣>5 cm的非腫瘤性肝組織作為對(duì)照組,采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)兩組EIF-5A2、P53和E-cadherin的表達(dá)。結(jié)果 兩組EIF-5A2、P53和E-cadherin的表達(dá)差異顯著。觀察組EIF-5A2、P53和E-cadherin的表達(dá)在不同腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)量、直徑、分化程度、轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)中的差異顯著。相關(guān)性分析顯示觀察組中EIF-5A2和P53的表達(dá)具有正相關(guān)性、EIF-5A2和E-cadherin的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性。結(jié)論 肝細(xì)胞癌組織中EIF-5A2和P53高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)對(duì)腫瘤進(jìn)展有促進(jìn)作用,EIF-5A2在作用過(guò)程中不僅對(duì)P53基因突變有一定作用,還對(duì)以E-cadherin為主的黏附蛋白有一定調(diào)節(jié)。
肝細(xì)胞癌;真核生物翻譯起始因子(EIF)-5A2;P53;上皮型黏附素(E-cadherin)
肝細(xì)胞癌是一種起源于肝細(xì)胞的惡性腫瘤,病變進(jìn)展較快,其基因和蛋白表達(dá)失調(diào)是重要的促進(jìn)因素〔1〕。真核生物翻譯起始因子(EIF)-5A2是在人卵巢癌UACC-1598細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的原癌基因,其表達(dá)上調(diào)后可以促進(jìn)腫瘤發(fā)生〔2,3〕。P53基因分為野生型和突變型,而突變型P53基因(P53)由于自身突變喪失了對(duì)于突變細(xì)胞的抑制作用,繼而獲得了癌基因的功能,從而促使腫瘤發(fā)生〔4,5〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是維持上皮正常形態(tài)和功能的蛋白,在正常細(xì)胞中高表達(dá),而當(dāng)腫瘤獲得轉(zhuǎn)移潛能后,使腫瘤的連接松散,易于遷移〔6,7〕。本文關(guān)注肝細(xì)胞癌中EIF-5A2、E-cadherin和P53的表達(dá),探討其相關(guān)性。
1.1 臨床資料 2011年1月至2013年12月行肝細(xì)胞癌根治手術(shù)后留取的蠟塊組織及臨床資料90例作為觀察組,納入均符合WHO關(guān)于肝細(xì)胞癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男50例,女40例;年齡56~84歲,平均(68.7±5.6)歲。其中高分化21例,中分化14例,低分化40例,未分化15例,術(shù)前均未進(jìn)行放、化療。同時(shí)選取距腫物邊緣>5 cm的非腫瘤性肝組織57例作為對(duì)照組,其中男30例,女27例;年齡58~79歲,平均(67.8±7.6)歲。兩組一般資料差異不顯著。
1.2 免疫組化檢測(cè)EIF-5A2、P53和E-cadherin蛋白的表達(dá) EIF-5A2、P53和E-cadherin蛋白均為濃縮液??贵w按不同比例稀釋后進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),選擇最佳配比濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。采用免疫組化二步法檢測(cè)組織中EIF-5A2、P53和E-cadherin蛋白的表達(dá),嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行,并均由同一技師操作,嚴(yán)格質(zhì)控。
1.3 EIF-5A2、P53和E-cadherin的判定方法 EIF-5A2陽(yáng)性部位為細(xì)胞質(zhì),P53陽(yáng)性部位為細(xì)胞核,E-cadherin陽(yáng)性部位為細(xì)胞膜,均以出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞,每張切片選擇上皮細(xì)胞密集的區(qū)域,共選擇5個(gè)400倍的高倍視野,計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量和總體上皮細(xì)胞數(shù)量,取其平均值作為樣本最終的陽(yáng)性表達(dá)率,以陽(yáng)性細(xì)胞≥5%定為陽(yáng)性,以陽(yáng)性細(xì)胞<5%定為陰性。計(jì)算組間陽(yáng)性率的差別。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。
2.1 兩組EIF-5A2、P53和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率的比較 兩組EIF-5A2、P53和E-cadherin中表達(dá)陽(yáng)性率差異顯著(P<0.000 1)。見(jiàn)表1。
2.2 觀察組中不同臨床特征患者EIF-5A2、P53和E-cadherin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較 觀察組中EIF-5A2、P53和E-cadherin的表達(dá)在不同腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)量、直徑、分化程度、轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)中的差別顯著。見(jiàn)表2。
表1 兩組EIF-5A2、P53和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率比較〔n(%)〕
表2 觀察組中不同臨床特征患者EIF-5A2、P53和E-cadherin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕
2.3 觀察組中EIF-5A2、P53和E-cadherin表達(dá)的相關(guān)性 觀察組EIF-5A2和P53的表達(dá)具有正相關(guān)性(r=0.49,P=0.019 0),EIF-5A2和E-cadherin的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性(r=-0.48,P=0.027 8)。
肝細(xì)胞癌臨床常見(jiàn),腫瘤由類似肝細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞構(gòu)成,間質(zhì)由襯覆單層內(nèi)皮細(xì)胞的血竇樣腔隙所組成。腫瘤細(xì)胞常排列呈條索狀、腺樣,部分細(xì)胞呈多形性及肉瘤樣變特征,分化程度低時(shí)呈彌漫分布,惡性潛能高〔8〕。病變發(fā)展過(guò)程中多種基因和蛋白表達(dá)異?!?〕。EIF-5A2作為EIF的重要成員,與EIF-5A有82%的結(jié)構(gòu)同源性〔10〕。研究認(rèn)為EIF-5A在生物合成后,其分子上的賴氨酸即被催化成8-羧基2,7,10-三氨基癸酸,使EIF-5A2活化并促進(jìn)細(xì)胞增殖〔11,12〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為EIF-5A2是蛋白質(zhì)合成過(guò)程中的上游調(diào)控因子,當(dāng)細(xì)胞快速增殖時(shí),可以使蛋白合成酶活性上調(diào),細(xì)胞內(nèi)大量參與翻譯的相關(guān)因子高表達(dá),打破蛋白的平衡,使細(xì)胞異質(zhì)化,增殖及轉(zhuǎn)移潛能增加〔13,14〕。野生型P53是機(jī)體中的腫瘤抑制基因,可以阻滯細(xì)胞周期、維持基因組穩(wěn)定性、促進(jìn)細(xì)胞凋亡,發(fā)揮腫瘤抑制功能〔15,16〕。但是p53基因突變后,p53基因由抑癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)樵┗?,即突變型P53,此時(shí)不僅對(duì)腫瘤的增殖作用明顯,還對(duì)凋亡起一定的拮抗作用。由于野生型P53在體內(nèi)半衰期短,因此常規(guī)方法極難檢測(cè)到,而正常檢測(cè)到的P53均為突變型,且能穩(wěn)定地聚集于細(xì)胞核內(nèi),也是臨床常用的觀察指標(biāo)〔17,18〕。E-cadherin是機(jī)體內(nèi)最經(jīng)典的黏附調(diào)節(jié)蛋白,不僅可以調(diào)節(jié)組織的發(fā)育,還對(duì)細(xì)胞間連接和信息傳遞起重要作用〔19,20〕。在癌播散過(guò)程中,E-cadherin 的表達(dá)下降,上皮細(xì)胞松動(dòng),易于發(fā)生轉(zhuǎn)移。學(xué)者認(rèn)為E-cadherin高表達(dá)是腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的抑制劑,當(dāng)誘導(dǎo)因素使E-cadherin表達(dá)下降后,可以激發(fā)相關(guān)的轉(zhuǎn)移因子高表達(dá),如基質(zhì)金屬蛋白酶等,為腫瘤轉(zhuǎn)移提供快捷途徑〔21,22〕。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示肝細(xì)胞癌中EIF-5A2、P53高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá),提示三者異常表達(dá)是腫瘤發(fā)生的重要促進(jìn)因素。三種蛋白異常表達(dá)對(duì)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、分化、轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)有重要價(jià)值。由于以上因素均為腫瘤生物學(xué)行為發(fā)展中的重要因素,且是臨床判斷腫瘤預(yù)后的相關(guān)指標(biāo),因此EIF-5A2、P53和E-cadherin的異常表達(dá)可能在一定程度上提示患者預(yù)后,即EIF-5A2、P53高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)患者的預(yù)后不良。Yang等〔23〕認(rèn)為EIF-5A2是腫瘤的獨(dú)立預(yù)后因素。Xie等〔24〕認(rèn)為EIF-5A2是引發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移的重要蛋白,因此EIF-5A2蛋白異常表達(dá)對(duì)判斷預(yù)后及轉(zhuǎn)移潛能有重要意義。EIF-5A2和P53、EIF-5A2和E-cadherin具有一定協(xié)同作用,也提示EIF-5A2在促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)及播散過(guò)程中可能與對(duì)P53和E-cadherin的調(diào)節(jié)有關(guān)。EIF-5A2引起突變型P53上調(diào)后,使腫瘤的增殖作用明顯,腫瘤的生長(zhǎng)活躍,腫瘤的異質(zhì)性更強(qiáng)。同時(shí)EIF-5A2高表達(dá)引起E-cadherin的表達(dá)下調(diào)后,細(xì)胞間的連接松散,腫瘤細(xì)胞易與原發(fā)腫瘤脫離,播散及轉(zhuǎn)移潛能升高。但EIF-5A2與E-cadherin的負(fù)向協(xié)同作用并非EIF-5A2作用經(jīng)典通路,因此二者協(xié)同作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步驗(yàn)證。
綜上,肝細(xì)胞癌組織中EIF-5A2和P53高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)對(duì)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展有促進(jìn)作用,EIF-5A2在作用過(guò)程中不僅對(duì)P53基因突變有一定作用,還對(duì)以E-cadherin為主的黏附蛋白有一定的調(diào)節(jié)。
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〔2013-11-17修回〕
(編輯 苑云杰)
吳葆華(1976-),女,主治醫(yī)師,主要從事胃腸、肝膽、胰腺疾病研究。
R73
A
1005-9202(2015)12-3330-03;
10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.066