ABCG2表達(dá)與浸潤(rùn)性乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

何建明 黃 偉 黃 湛

(韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普通外科，廣東 韶關(guān) 512026)

ABCG2表達(dá)與浸潤(rùn)性乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

何建明 黃 偉1黃 湛2

(韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普通外科，廣東 韶關(guān) 512026)

目的 探討ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體基因2(ABCG2)組織表達(dá)程度與浸潤(rùn)性乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并分析其與其他臨床參數(shù)的關(guān)系。方法 采用免疫組化二步法檢測(cè)187例浸潤(rùn)性乳腺癌組織中ABCG2蛋白表達(dá)，分析乳腺癌中ABCG2組織表達(dá)程度與浸潤(rùn)性乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并分析其與患者年齡、月經(jīng)、組織學(xué)分級(jí)、臨床分期、病灶大小、術(shù)前淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER、PR、Her-2表達(dá)程度及三陰性乳腺癌(TNBC)等的關(guān)系。結(jié)果 乳腺癌組織中ABCG2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為58.8%(110/187)，隨著分化程度的增加，ABCG2陽(yáng)性率降低；術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者中ABCG2陽(yáng)性率為73.1%(38/52)，明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組的53.3%(72/135)，TNBC組患者中ABCG2陽(yáng)性率為73.7%(28/38)，高于non-TNBC組的55%(82/149)(χ2=6.254，P=0.012；χ2=4.536，P=0.033)；ABCG2表達(dá)程度與患者的臨床分期(TNM)、病理分級(jí)相關(guān)(χ2=5.425，P=0.020；χ2=4.077，P=0.043)，但與乳腺癌患者年齡、月經(jīng)狀況、病灶大小、ER、PR及Her-2表達(dá)程度等無(wú)明顯相關(guān)性(均P>0.05)。結(jié)論 浸潤(rùn)性乳腺癌組織中存在ABCG2蛋白高表達(dá)，其陽(yáng)性程度與患者的術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。

浸潤(rùn)性乳腺癌；ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體基因2；三陰性乳腺癌

乳腺癌患者通常由于對(duì)化療藥物耐藥而預(yù)后不佳〔1〕。ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體基因2(ABCG2)是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員之一，對(duì)保護(hù)干細(xì)胞避免細(xì)胞毒性殺傷具有重要意義〔2〕。最新研究還發(fā)現(xiàn)，伴ABCG2蛋白表達(dá)的患者具有特殊的臨床特點(diǎn)和生物學(xué)行為〔3〕，但ABCG2是否可以作為判斷乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移及預(yù)后的重要因子目前尚無(wú)統(tǒng)一報(bào)道。本文將進(jìn)一步探討ABCG2組織表達(dá)程度與乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普通外科、汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬粵北人民醫(yī)院頭頸乳腺外科2010年4月至2012年3月收治的浸潤(rùn)性乳腺癌患者187例，所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)。腫瘤直徑1～7 cm，平均(3.87±0.67)cm，病理類型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌138例，浸潤(rùn)性小葉癌31例，黏液癌9例，硬癌5例，髓樣癌4例；組織學(xué)分級(jí)：Ⅰ級(jí)40例，Ⅱ～Ⅲ級(jí)147例，TNM分期：Ⅰ期38例，Ⅱ～Ⅲ期149例；患者年齡30～80歲，平均(53.18±10.96)歲，所有患者術(shù)前均未接受新輔助放療、化療或分子靶向治療。所有病例均為女性，手術(shù)方式：?jiǎn)渭冃匀榉壳谐g(shù)19例，改良根治術(shù)168 例?；颊咝g(shù)后均接受輔助治療。

1.2 ABCG2免疫組化 常規(guī)切片，切片常規(guī)65℃烤片脫蠟后，再行二甲苯3次5 min脫蠟，梯度酒精水化，PBS沖洗5 min×3，微波中低火條件下行EDTA抗原修復(fù)，PBS沖洗5 min×3，滴加ABCG2兔抗人多克隆抗體，37℃孵育1 h PBS沖洗5 min×3，滴加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的廣譜二抗，37℃孵育30 min，PBS沖洗5 min×3，DAB顯色，鏡下觀察控制顯色效果，放入自來(lái)水終止顯色，蘇木素復(fù)染、中性樹(shù)膠封片。判斷標(biāo)準(zhǔn)：ABCG2陰性：腫瘤細(xì)胞質(zhì)未著色或陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<25%，陽(yáng)性：腫瘤細(xì)胞質(zhì)呈棕褐色且陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>25%。

1.3 隨訪 通過(guò)臨床隨診和電話隨訪獲得隨訪資料。記錄復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移并隨訪至患者死亡或至隨訪截止日期。將局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移皆稱為乳腺癌復(fù)發(fā)。無(wú)病生存時(shí)間(DFS)是由確診至第一次發(fā)現(xiàn)(臨床或影像學(xué)證明)復(fù)發(fā)的時(shí)間。隨訪截止日期為2014年月11月。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0軟件行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 浸潤(rùn)性乳腺癌組織中ABCG2蛋白的表達(dá)及與腫瘤復(fù)發(fā)、組織分化程度及三陰性乳腺癌(TNBC)的關(guān)系 187例浸潤(rùn)性乳腺癌組織中ABCG2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為58.8%，隨著分化程度的增加，ABCG2陽(yáng)性率降低；術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者中ABCG2陽(yáng)性率明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者53.3%；TNBC組患者中ABCG2陽(yáng)性率亦高于non-TNBC組(均P<0.05)，見(jiàn)表1，圖1。

2.2 ABCG2蛋白的表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 ABCG2與患者的臨床分期(TNM)相關(guān)(P<0.05)，與乳腺癌患者年齡、病灶大小、ER、PR及 Her-2陽(yáng)性狀態(tài)等無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表2。

A：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的形態(tài)學(xué)變化(HE，×100)；B：ABCG2蛋白在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)(IHC，×100)；C：ABCG2蛋白在乳腺癌組織中的陰性表達(dá)(IHC，×100)

表1 乳腺癌組織中ABCG2蛋白表達(dá)與腫瘤復(fù)發(fā)、組織分化程度與TNBC的關(guān)系〔n(%)〕

病理參數(shù)n187ABCG2組陰性(n=77)ABCG2組陽(yáng)性(n=110)χ2/P值分化程度 Ⅰ級(jí)4011(27 5)29(72 5)4 077/0 043 Ⅱ～Ⅲ級(jí)14766(44 9)81(55 1)復(fù)發(fā) 是5214(26 9)38(73 1)6 254/0 012 否13563(46 7)72(53 3)TNBC 是3810(26 3)28(73 7)4 536/0 033 否14967(45 0)82(55 0)

表2 ABCG2蛋白的表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系〔n(%)〕

3 討 論

ABCG2是腫瘤細(xì)胞株中分離的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族之一，并被認(rèn)為與腫瘤耐藥有關(guān)，特別是在乳腺癌多藥耐藥中發(fā)揮重要作用〔4〕。大量基礎(chǔ)研究證實(shí)，轉(zhuǎn)染ABCG2基因后細(xì)胞編碼的蛋白具有促進(jìn)細(xì)胞增生、修復(fù)、抗凋亡及誘導(dǎo)多藥耐藥的特點(diǎn)〔5〕，對(duì)多種化療藥物如柔紅霉素、順鉑等均耐藥。在多種腫瘤如乳腺癌、骨肉瘤、食道鱗狀細(xì)胞癌、宮頸癌、膠質(zhì)瘤及肝癌等多種腫瘤細(xì)胞中均可分離出ABCG2基因陽(yáng)性表達(dá)的腫瘤干細(xì)胞〔5〕。研究認(rèn)為，ABCG2是參與腫瘤生長(zhǎng)、分化和侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的重要因子，大量研究證實(shí)了乳腺癌中存在ABCG2的高表達(dá)，并參與腫瘤的增殖與凋亡及多藥耐藥〔6〕。國(guó)外有學(xué)者認(rèn)為，腫瘤組織中ABCG2基因的陽(yáng)性率可以作為判斷腫瘤患者轉(zhuǎn)移和預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)〔7〕。在食管癌中，有研究認(rèn)為ABCG2的表達(dá)是腫瘤干細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的重要原因，并且認(rèn)為組織中ABCG2高表達(dá)可以作為食管鱗狀細(xì)胞癌腫瘤耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移的不良指標(biāo)〔8，9〕，進(jìn)一步基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在對(duì)耐藥的鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株阻斷ABC蛋白表達(dá)后，腫瘤細(xì)胞恢復(fù)了對(duì)化療藥物的敏感性〔10〕。但ABCG2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌腫瘤復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)的相關(guān)性目前尚不明確。

本研究結(jié)果基本證實(shí)了ABCG2參與腫瘤的惡性進(jìn)展，增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞的侵襲性。研究認(rèn)為，ABCG2過(guò)表達(dá)的患者，其生物學(xué)行為具有特殊性，表現(xiàn)為化療效果差、患者預(yù)后不佳等〔11〕。TNBC是一種特殊類型的乳腺癌，分化低、組織學(xué)分級(jí)高，侵襲性強(qiáng)，惡性程度高，極易復(fù)發(fā)，總生存期短〔12，13〕，易耐藥，臨床預(yù)后差，目前尚缺乏有效治療方法。乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移是患者預(yù)后不良的重要因素，其侵襲性主要與腫瘤干細(xì)胞的耐藥性、浸潤(rùn)能力等有關(guān)〔14〕。因此，通過(guò)研究ABCG2在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用，對(duì)判斷腫瘤的生物學(xué)特性和預(yù)后均具有重要意義。

綜上所述，乳腺癌組織中存在ABCG2蛋白高表達(dá)，其陽(yáng)性程度與患者的術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，可作為判斷乳腺癌患者預(yù)后的重要指標(biāo)。

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〔2013-10-10修回〕

(編輯 李相軍)

廣東省醫(yī)學(xué)科研基金(No.A2011646)

何建明(1966-)，男，副教授，主要從事外科臨床及教學(xué)研究。

R739

A

1005-9202(2015)12-3244-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.025

1 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬粵北人民醫(yī)院病理科

2 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬粵北人民醫(yī)院頭頸乳腺外科