糖及其代謝物測定

王威威

【摘要】本文對糖及其一些代謝物的測定進(jìn)行論述。

【關(guān)鍵詞】糖；代謝物；測定

【中圖分類號】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1671-8801（2015）03-0270-01

一、空腹葡萄糖檢測

臨床上所稱的血糖專指血液中的葡萄糖而言。每個(gè)個(gè)體全天血糖含量隨進(jìn)食、活動(dòng)等情況會(huì)有被動(dòng)。一般在空腹時(shí)的血糖水平較為恒定。臨床檢測時(shí)采用葡萄糖氧化酶的方法可以特異地測出真實(shí)的血糖濃度。

（一）方法和原理

1.葡萄糖氧化酶法 葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖糖酸，并產(chǎn)生過氧化氫：

葡萄糖+2H20→葡萄糖酸+2H20

在色原性氧受體的存在下，過氧化物酶催化過氧化氫氧化色素原，生成有色化合物。

2.已糖激酶法 在已糖激酶催化下，葡萄糖和三磷腺苷發(fā)生磷酸化反應(yīng)，生成葡萄糖-6-磷酸與二磷酸腺苷。前者在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶催化下脫氫，生成6-磷酸葡萄糖酸，同時(shí)使氧化型輔酶還原成還原型輔酶。

3.鄰中苯胺法 葡萄糖與鄰甲苯胺在強(qiáng)酸溶液中加熱，葡萄糖的醛基與鄰甲苯胺縮合成葡萄糖基胺，后者脫水生成席夫堿，再經(jīng)結(jié)構(gòu)重排，生成有色化合物，吸收峰630nm。

（二）參考值

葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法（HK）、鄰甲苯胺法：3.9—6.4mmol/L。

（三）臨床意義

血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和激素的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定。當(dāng)這些調(diào)節(jié)失去原有的相對平衡時(shí)，則出現(xiàn)高血糖或低血糖。

1.生理性高血糖 見于飯后1—2小時(shí)；攝入高糖食物；也可由運(yùn)動(dòng)、情緒緊張等因素引起。

2.病理性南血糖

（1）糖尿病是造成高血糖最常見的原因之一；（2）顱內(nèi)壓力宿，如顱內(nèi)出血、顱外傷等；（3）由于脫水引起的高血糖，如嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度升高。

3.生理性低血糖 如饑餓或劇烈運(yùn)動(dòng)。

4.病理性低血糖

（1）胰島β細(xì)胞增生或癌瘤等，使贖島素分泌過多。（2）對抗胰島素的激素分泌不足，如垂體前葉機(jī)能減退、腎上腺皮質(zhì)機(jī)能減遲等（3）嚴(yán)重肝病患者，肝臟不能有效地調(diào)節(jié)血糖。

二、口服葡萄糖耐量試驗(yàn)

（一）方法和原理

葡萄糖耐量試驗(yàn)是檢查人體血糖調(diào)節(jié)機(jī)能的一種方法。正常人在服用一定量葡萄糖后，血糖濃度暫時(shí)升高（一般不超過8.88mmol/L或160mg/d1），但在2小時(shí)內(nèi)又恢復(fù)到空腹水平，稱為耐糖現(xiàn)象。在服用一定量葡萄糖后，間隔一定時(shí)間測定血糖和尿糖，觀察血糖水平及有無尿船出現(xiàn)，稱為糖耐量試驗(yàn)。若因內(nèi)分泌失調(diào)等因素引起糖代謝失常時(shí)，食入大量糖后，血糖濃度可急劇升高或升高極不明顯，短時(shí)間內(nèi)不能恢復(fù)原值者即稱為耐糖現(xiàn)象失常。臨床上常對癥狀不明顯的患者采用糖耐量試驗(yàn)來診斷有無糖代謝異常。

（二）實(shí)驗(yàn)步驟

（1）檢測前3天患者可正常飲食（每天進(jìn)食糖類不得不少于150g，且維持正常活動(dòng)，停用胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素等藥物治療，不抽煙，不喝咖啡和茶，試驗(yàn)前一天晚餐后即不再進(jìn)食。

（2）次晨空腹抽靜脈血2mI，抗凝或否，并同時(shí)收集尿液標(biāo)本，測定血液與尿液中的葡萄糖含量。

（3）將75g葡萄糖溶于250ml溫開水中，令受檢者5分鐘內(nèi)服下，服后每隔60分鐘各取血1次，共4次，每隔lh留尿液，測定血糖及尿糖。若疑為反應(yīng)性低血糖病例，可適當(dāng)延長標(biāo)本收集時(shí)間。

（4）將各次測得的血糖和尿糖數(shù)值，以數(shù)字或曲線報(bào)告。

（四）臨床意義

1.糖尿病 空腹的血糖常超過正常值，服糠后血糖更高.而且維持高血糖時(shí)間較長，尿中可檢測到尿糖。 、

2.肝病患者 服糖后半小時(shí)或一個(gè)半小時(shí)之間血糖急劇升高，一個(gè)半小時(shí)到三小時(shí)之間血糖迅速下降至正?；虻陀诳崭寡?。血糖升高時(shí)可以現(xiàn)尿糖。

3.腎病患者 糖耐量曲線正常，服糖后尿內(nèi)可出現(xiàn)尿糖。

4.某些內(nèi)分泌疾病 如垂體前葉機(jī)能亢進(jìn)，腎上腺皮質(zhì)、腎上腺髓質(zhì)腫瘤低于正常人，進(jìn)食大量糠后，血糖升高不明顯，糖耐量減低。

三、糖化血紅蛋白檢測

糖化血紅蛋白是血紅蛋白與領(lǐng)萄糖經(jīng)非酶促反應(yīng)結(jié)合而成的，其含量的多少取決于血糖濃度以及血糖與血紅蛋白接觸時(shí)間的長短。

（一）方法和原理

糖化血紅蛋白檢測方法很多，常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。

離子交換層析，分手工和儀器兩種。手工微柱有Bio—BaD和西班牙BIOSYSYEMS

等多家公司產(chǎn)品，手工微柱操作受到人工因素影響，可能會(huì)洗脫不完全或過度洗脫，并受外界環(huán)境溫度的影響，而某些紅蛋白如HbF異常增加時(shí)，也會(huì)與糖化血紅蛋白同時(shí)洗脫而使結(jié)果產(chǎn)生偏差。采用微柱法離子交換層析和梯度洗脫技術(shù)可全自動(dòng)分離血紅蛋白的變異體與亞型，除可測定糖化血紅蛋白外，還可同時(shí)檢測出HbS與HbC的存在與否，在計(jì)算糖化血紅蛋白值時(shí)會(huì)自動(dòng)扣除變異體產(chǎn)生的影響，從而使結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠，CV值小于2%。

親和層法是目前糖化血紅蛋白檢測的新方法，該方法特異性強(qiáng)，不受異常血紅蛋白的干擾。DS1糖化血紅蛋白分析儀已經(jīng)獲得美國儀器藥品管理署（FDA）的認(rèn)可獲準(zhǔn)上市，作為目前世界唯一的快速床邊糖化血紅蛋白儀，它采用硼酸親和層析法，只需10?1全血即可在4分鐘內(nèi)快速分離檢測糖果化血紅蛋白，為臨床提供即時(shí)的化驗(yàn)結(jié)果，從而使醫(yī)生在患者就診的第一時(shí)間明確診斷并制定相應(yīng)的治療方案，特別適合于臨床科室使用，尤其對小兒患者而言更有優(yōu)勢。其檢測結(jié)果也完全達(dá)到并超過臨床要求，CV值5%以內(nèi)。

離子捕獲法亦是新近發(fā)展起來的新方法，其原現(xiàn)是糖化血紅蛋白與相應(yīng)抗體結(jié)合后，聯(lián)以熒光標(biāo)記物，而在IMX反應(yīng)孔中的玻璃纖維預(yù)先包被了高分子的四膠合物，使纖維表面帶正電，使前述的反應(yīng)復(fù)合物吸附在纖維表面，經(jīng)過一系列的清洗后測定其熒光強(qiáng)度，從而得到糖化血紅蛋白的濃度，該方法適用于成批糖化血紅蛋白標(biāo)本的檢測。

電泳方法如毛細(xì)管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質(zhì)的變異體，但目前尚無商品化、具有批量樣本通過能力的儀器面世，相當(dāng)程度地限制了該方法的臨床應(yīng)用。

綜上所述，糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一項(xiàng)良好的指標(biāo)，糖尿病患者應(yīng)定期檢測糖化血紅蛋白，并據(jù)此制定，修正相關(guān)治療方案。

（二）臨床意義

CHb升高主要見于糖尿病及其他高血糖患者的血液中，由于糖化過程比較緩慢、一

旦形成后不再解離、并持續(xù)于紅細(xì)胞生命周期中，故測定糖化血紅蛋白所占的百分比率能反映測定前1—2月內(nèi)的血糖水平。對血糖和尿糖波動(dòng)較大的糖尿病患者；進(jìn)行CHb測定不但可用于診斷，。而且是監(jiān)測病情的良好指標(biāo)。

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