四種常用梅毒檢測試驗(yàn)在基層醫(yī)院的合理應(yīng)用

劉建俠

(天津西青醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津 300380)

梅毒是由梅毒螺旋體 (Treponema pallidum，T P)所引起的一種經(jīng)典的慢性性傳播疾病。梅毒主要通過性接觸傳播，亦可通過血液和垂直傳播，是傳染性極強(qiáng)的疾病，且發(fā)病率呈逐年遞增趨勢[1]。近年來我國該病的發(fā)病率也呈逐年上升趨勢，至2013年報告發(fā)病率達(dá)32.86/10萬，居全國甲乙類傳染病發(fā)病排序第三位，已成為我國重要的公共衛(wèi)生和社會問題之一[2，3]。梅毒臨床表現(xiàn)復(fù)雜，其中隱性梅毒有隱匿性，病原體長期在體內(nèi)潛伏，又成為流行的重要傳染介質(zhì)[4]。梅毒幾乎能侵犯全身各個器官，包括骨、關(guān)節(jié)、眼及中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成不可逆的損失和破壞，孕婦感染尚可造成胎傳梅毒，嚴(yán)重影響患者及家人身心健康，因此梅毒的早期診斷和治療具有重要意義。梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)在梅毒的篩查及診斷中起著重要的作用。為探討基層醫(yī)院常用的四種血清學(xué)試驗(yàn)在梅毒診斷中的合理應(yīng)用，本文做如下研究。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 110例梅毒明膠顆粒凝聚試驗(yàn)(TPPA)陽性標(biāo)本和200例標(biāo)本均來自2013年1月至2014年7月本院性病門診及住院篩查的患者，其中，男186例，女124例。

1.2 儀器與試劑 TECAN洗板機(jī)、TECAN Sunrise全自動酶標(biāo)儀、微量震蕩儀 、RPR旋轉(zhuǎn)儀 。TPELISA和RPR試劑選用上?？迫A生物技術(shù)有限公司，TPPA試劑為選用日本富士瑞必歐株式會社，TP-RT試劑選用北京萬泰生物藥業(yè)有限公司，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法 將每份標(biāo)本均進(jìn)行TP-ELISA、RPR、TP-RT檢測。所有試驗(yàn)嚴(yán)格按照廠家提供的試劑說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 將 TP-ELISA、RPR、TP-RT與TPPA結(jié)果進(jìn)行比較，采用 SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。

2 結(jié)果

2.1 TPPA、TP-ELISA、RPR、TP-RT 檢測結(jié)果 本次研究中出現(xiàn)的9種不同組合見表1。

表 1 TPPA、TP-ELISA、RPR、TP-RT 檢測結(jié)果

2.2TP-ELISA、TP-RT、RPR的結(jié)果比較 TPELISA、TP-RT與TPPA方法一致性檢驗(yàn)的KAPPA值分別為0.94，0.95。RPR的檢出率的為61.82%。見表2。

3 討論

梅毒血清學(xué)試驗(yàn)方法分梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)和非梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)。人感染梅毒螺旋體后，出現(xiàn)特異性IgM約需2周，隨后出現(xiàn)出現(xiàn)IgG，IgG抗體常伴隨終身；而非特異性抗體臨床療效觀察的出現(xiàn)較特異性 抗 體 約 晚 2~3周[5]。ELISA與TPPA法檢測的是梅毒IgG和IgM的混合抗體，IgG抗體在治愈后相當(dāng)長的時間仍可為陽性，所以不能作為療效監(jiān)測指標(biāo)[6]。非特異抗體是抗類脂質(zhì)抗體，其滴度檢查用于判斷療效和復(fù)發(fā)。為了準(zhǔn)確診斷梅毒，這兩類試驗(yàn)都必不可少。

表2 TP-ELISA、RPR、TP-RT與TPPA結(jié)果比較

本組資料中，TP-ELISA、TP-RT與TPPA方法一致性檢驗(yàn)的KAPPA值分別為0.94，0.95，證明梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)之間一致性較好。由于RPR檢測的類脂質(zhì)抗體，檢出率為61.82%，假陽性率0.05%。

目前，梅毒血清學(xué)檢測策略有兩種程序，程序一：以非梅毒螺旋體的抗原血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行初篩，再以梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)。程序二：是先進(jìn)行梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)，陽性的再進(jìn)行非梅毒螺旋體的抗原血清學(xué)試驗(yàn)。如果按程序一進(jìn)行，本研究110例TPPA陽性的患者中RPR陽性為68例，32例漏診的患者中包括梅毒早期患者。這是由于對于一期梅毒早期、晚期梅毒、隱性梅毒，RPR缺乏足夠的敏感性。此外，高滴度的血清樣品也會由于前帶現(xiàn)象而導(dǎo)致RPR假陰性。因此，以非梅毒螺旋體的抗原血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行初篩不符合篩查方法高敏感性的要求。以程序二進(jìn)行，既客服漏檢，又節(jié)約了人力和試劑。TPPA檢測原理是將梅毒螺旋體Nichol株的精制菌體成分包被于明膠顆粒上，致敏顆粒與檢測樣中的抗T P抗體特異性結(jié)合可發(fā)生凝聚反應(yīng)[7]。TPPA敏感度高，能同時檢測IgG型和IgM型抗體，不需要特殊儀器，操作簡便，適合于小批量標(biāo)本，2~3h出報告，用于甄別生物學(xué)假陽性結(jié)果穩(wěn)定可靠、易判斷，是目前公認(rèn)的梅毒確認(rèn)試驗(yàn)，在臨床上值得推廣及應(yīng)用[8，9]。因此，對于小批量標(biāo)本，基層醫(yī)院適合選擇TPPA作為篩查方法。對于大批量標(biāo)本，適合選用TPELISA作為篩查方法。EL ISA法采用雙抗原夾心法檢測血清中的梅毒螺旋體抗體，利用酶的放大系統(tǒng)，且具有雙重識別機(jī)制使假陽性和假陰性不易出現(xiàn)，故敏感性和特異性均較高，許多學(xué)者認(rèn)為E LISA法是梅毒血清學(xué)診斷的首選方法[10]。大量的試驗(yàn)表明其與TPPA有較好的一致性[11，12]，但其存在假陽性和假陰性，本研究發(fā)現(xiàn)仍有7例不符。因此，TP-ELISA陽性后，需再用TPPA進(jìn)行確認(rèn)或動態(tài)觀察。對于性病門診等高危人群，適合TPPA和RPR同時檢測。對于梅毒病人療效觀察，則可直接進(jìn)行RPR定量試驗(yàn)。

TP-RT多采用金標(biāo)記的雙抗原夾心法，操作簡便，快速，單人份使用，特異性好，但敏感度較TPPA和TP-ELISA略低，尤其使用于急診，對于TPPA較高滴度的病人可以作為TPPA結(jié)果的復(fù)核，這樣既節(jié)省了時間，有排除了試驗(yàn)因素引起的假陽性，如與TPPA不符，仍需復(fù)查TPPA。

此外，在梅毒篩查中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)老年人TPPA陽性，RPR陰性或低滴度陽性，近年來很多學(xué)者提出且報道了老年患者梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果假陽性率高的現(xiàn)象[13，14]。對于這種情況，應(yīng)結(jié)合接觸史，臨床表現(xiàn)，治療史進(jìn)行綜合分析，并按照性病診療規(guī)范要求，以動態(tài)觀察；對不確定標(biāo)本應(yīng)當(dāng)用WB法做最后的確認(rèn)。不能輕易做臨床診斷，否則很可能給患者帶來不必要的藥物治療以及社會壓力和心理壓力[15]。

綜上所述，正確認(rèn)識梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)方法的特點(diǎn)并合理應(yīng)用非常重要，基層醫(yī)院由于條件所限，標(biāo)本量小，有的醫(yī)院尚未購置酶標(biāo)儀及洗板機(jī)，適合先用TPPA進(jìn)行篩選，陽性的再進(jìn)行非梅毒螺旋體的抗原血清學(xué)試驗(yàn)。大批量查體標(biāo)本可選用TP-ELISA篩查，陽性的再進(jìn)行非梅毒螺旋體的抗原血清學(xué)試驗(yàn)和TPPA確認(rèn)。

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