SysmexXT-5000i全自動(dòng)血液分析儀的性能評(píng)價(jià)及復(fù)檢條件探討

張七二 ，蒲榮 ，鐘錦開 ，王占科 ，祝仲珍

(1、東莞市寮步醫(yī)院，廣東 東莞523400；2、南昌市解放軍第九四醫(yī)院，江西 南昌330002)

Sysmex XT-5000i是臨床實(shí)驗(yàn)室常用的全自動(dòng)血液分析儀。以使用半導(dǎo)體激光器的流式細(xì)胞計(jì)數(shù)為基礎(chǔ)[1,2]。具有分析速度快、準(zhǔn)確率高、能進(jìn)行血液多參數(shù)分析等特點(diǎn)，能很好的滿足臨床需要[3,4]。但XT-5000i全自動(dòng)血液分析儀的檢驗(yàn)結(jié)果也會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性[5]，其復(fù)檢的選擇條件的確定仍有待于探討，本文參照國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ICSH)相關(guān)文件進(jìn)行了研究，以確定XT-5000i的臨床檢測(cè)性能并提出我院復(fù)檢條件，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 日本Sysmex公司生產(chǎn)的XT-5000i血細(xì)胞分析儀，該分析系統(tǒng)采用原廠配套試劑。XT-2000i血液分析儀及配套試劑均為日本Sysmex公司生產(chǎn)。

1.2 標(biāo)本來源 300例住院病人標(biāo)本均來自本院就診病人的新鮮靜脈EDTA-K2抗凝全血標(biāo)本。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 質(zhì)控 比對(duì)儀器及試驗(yàn)儀器定期校準(zhǔn),每日隨機(jī)用各儀器生產(chǎn)廠商指定或提供的高、中、低值全血質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)控,以保證儀器性能的穩(wěn)定性。

1.3.2 精密度實(shí)驗(yàn) 定量分析5項(xiàng)參數(shù)(WBC、RBC、Hb、PLT和Ret)，采用高值和低值兩種濃度的質(zhì)控品連續(xù)進(jìn)行15次檢測(cè)，求出平均值、SD、CV。

1.3.3 攜帶污染率試驗(yàn) 分別對(duì)5項(xiàng)參數(shù)高值和低值血樣進(jìn)行試驗(yàn)，先取高值樣本連續(xù)檢測(cè)三次，結(jié)果為H1,H2,H3，然后立即對(duì)低值樣本連續(xù)檢測(cè)三次，結(jié)果為 L1,L2,L3，按公式 (L1-L3/H3-L3×100%)求攜帶污染率。

1.3.4 干擾試驗(yàn) 高低值質(zhì)控標(biāo)本中加入高膽紅素(BIL=220.18μmol/L)及高血脂(TG=7.78mmol/L)，再用XT-5000i測(cè)定的前后5項(xiàng)參數(shù)結(jié)果比較。

1.3.5 正確度及可比性實(shí)驗(yàn) 隨機(jī)選取20份抗凝靜脈血標(biāo)本采用XT-2000i及XT-5000i測(cè)定白細(xì)胞分別類準(zhǔn)確性5次取其平均值，并計(jì)算相關(guān)系數(shù)。 采用XT-2000i及XT-5000i測(cè)定WBC、RBC、Hb、PLT和Ret，總體均值為靶值，計(jì)算偏倚%。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，配對(duì)t檢驗(yàn)。

1.3.6 人工閱片及復(fù)檢規(guī)則 依照 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[6]進(jìn)行血涂片制作瑞氏染色和顯微鏡閱片。對(duì)每份血涂片進(jìn)行顯微鏡雙盲檢查，按美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) (CLSI)推薦的鏡檢方法進(jìn)行血涂片的WBC分類，同時(shí)觀察WBC、RBC、PLT和Ret的形態(tài)計(jì)數(shù)結(jié)果與XT-5000i結(jié)合分析統(tǒng)計(jì)，提出血液鏡檢復(fù)查條件。

2 結(jié)果

2.1 精密度實(shí)驗(yàn) 定量分析5項(xiàng)參數(shù)(WBC、RBC、Hb、PLT 和 Ret)，的均數(shù)(x)、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV)，結(jié)果見表1。顯示各項(xiàng)指標(biāo)精密度小于4.5%。

2.2 攜帶污染率 通過以上5項(xiàng)參數(shù)(WBC、RBC、Hb、PLT和Ret)攜帶污染率測(cè)定，XT-5000i血液分析儀攜帶污染率很小，結(jié)果見表2。

2.3 抗干擾實(shí)驗(yàn) 高低值質(zhì)控標(biāo)本中加入高膽紅素(BIL=220.18μmol/L)及高血脂(TG=7.78mmol/L)，再用XT-5000i測(cè)定的前后5項(xiàng)參數(shù)結(jié)果比較，結(jié)果見表3。

表1 5項(xiàng)參數(shù)的均數(shù)()、標(biāo)準(zhǔn)差(s)、變異系數(shù)(CV)

表1 5項(xiàng)參數(shù)的均數(shù)()、標(biāo)準(zhǔn)差(s)、變異系數(shù)(CV)

組別 RBC(1012/L)Ret(%)高值質(zhì)控物WBC(109/L)Hb(g/L)PLT(109/L)低值質(zhì)控物平均值6.80 SD 0.13 CV(%)1.91平均值2.42 SD 0.09 CV(%)3.72 16.58 0.32 1.94 2.85 0.12 4.21 170.5 2.15 1.26 80.8 1.2 1.49 435.2 10.8 2.49 85.20 4.1 4.81 3.293 0.112 3.40 1.942 0.08 4.12

表2 XT-5000i攜帶污染率測(cè)定

表3 高BIL和高TG對(duì)XT-5000i測(cè)定的前后5項(xiàng)參數(shù)結(jié)果比較(BIL=220.18μmol/L，TG=7.78mmol/L)

2.4 白細(xì)胞分類準(zhǔn)確性 XT-2000i及XT-5000i測(cè)定白細(xì)胞及Ret分類準(zhǔn)確性比較見表4。XT-2000i及XT-5000i測(cè)定白細(xì)胞分類及Ret分類準(zhǔn)確性比較(以相關(guān)系數(shù)表示)。

表4 XT-2000i及XT-5000i測(cè)定白細(xì)胞及Ret分類準(zhǔn)確性比較

2.5 人工閱片 300例樣品涂片經(jīng)人工鏡檢,以文獻(xiàn)中標(biāo)準(zhǔn)判別,陰性有282例,其中過篩組(檢測(cè)結(jié)果在國際血涂片復(fù)審準(zhǔn)則范圍外者)255例,在篩組27例,陽性18例,其中在過篩組6例,在篩組12例.所以真陰性率為85%,假陽性率為15%,假陰性率為3%,真陽性率為6%,準(zhǔn)確率為94%。結(jié)果見表5。

表5 XT-5000i檢測(cè)WBC、RBC和PLT與手工閱片比較

3 討論

Sysmex XT-5000i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀檢測(cè)功能、檢測(cè)參數(shù)較希森美康公司之前產(chǎn)品有極大的擴(kuò)展和提高[7]。該血球儀采用鞘流電阻抗／射頻法、流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)原理，用直流電法檢測(cè)細(xì)胞的大小，射頻技術(shù)測(cè)量細(xì)胞核的大小及核與胞質(zhì)的密度。因而在以射頻信號(hào)為縱軸，直流電信號(hào)為橫軸的散點(diǎn)網(wǎng)上，不同的細(xì)胞體積和核密度大小的細(xì)胞占據(jù)的位置不同[8]。值得一提的是XT-5000i在PLT和Ret計(jì)數(shù)中采用電阻抗雙方法結(jié)合核酸熒光染色法通過半導(dǎo)體激光和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)，尤其是它檢測(cè)Ret彌補(bǔ)了顯微鏡計(jì)數(shù)Ret繁瑣，影響因素多，誤差較大等缺點(diǎn)，因而提高了Ret分析的準(zhǔn)確度和靈敏度，并且能提供多種有臨床價(jià)值的Ret參數(shù)[9,10]。

本文試驗(yàn)結(jié)果顯示：Sysmex XT-5000i計(jì)數(shù)5項(xiàng)參數(shù)(WBC，RBC，Hb，PLT 和 Ret)具有較好的精密度，高、低值的CV都在較理想的范圍內(nèi)，定量分析5項(xiàng)參數(shù)，采用高值和低值兩種濃度的質(zhì)控品連續(xù)進(jìn)行20次檢測(cè)，測(cè)得5項(xiàng)參數(shù)的均數(shù)(X)、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV)，各項(xiàng)指標(biāo)精密度小于4.5%，能滿足臨床需要；高膽紅素及高血脂對(duì)各參數(shù)基本無干擾且攜帶污染率很低[11]；評(píng)估周期內(nèi)兩次比對(duì)均滿足室內(nèi)比對(duì)要求，各參數(shù)在允許范圍內(nèi)比對(duì)樣本檢測(cè)結(jié)果的最大偏倚：WBC5.30%，RBC2.65%，Hb3.05%，PLT9.55%，Ret 6.62%。 表明Sysmex XT-5000i可以很好地滿足臨床檢測(cè)血液標(biāo)本的需要。

但Sysmex XT-5000i還存在一些不足的地方:(1)未能對(duì)血液中異常細(xì)胞進(jìn)行全方位識(shí)別，只能作簡(jiǎn)單提示。(2)對(duì)血液中的非血細(xì)胞成分不能識(shí)別。例如異常細(xì)胞成分及寄生蟲等。(3)不能有效識(shí)別人為原因造成的誤差[12]。但是理想的血液檢查應(yīng)為儀器記數(shù)細(xì)胞,鏡檢觀察形態(tài),因此筆者根據(jù)國際血涂片復(fù)審準(zhǔn)則，初步評(píng)估了Sysmex XT-5000i的復(fù)檢條件,供同行專家討論指正，本文顯示300例樣品涂片經(jīng)人工鏡檢,陰性有282例,其中過篩組255例,在篩組27例,陽性18例,其中在過篩組6例,在篩組12例，真陰性率為85%,假陽性率為15%,假陰性率為3%,真陽性率為6%,準(zhǔn)確率為94%。根據(jù)使用XT-5000i一年來的總結(jié)并且查閱大量文獻(xiàn)[13]，筆者提出自己的看法，當(dāng)儀器狀態(tài)良好,檢測(cè)結(jié)果在以下范圍時(shí)須鏡檢[14]：無WBC自動(dòng)分類結(jié)果；WBC 總數(shù)>30×109/L 或者<2.0×109/L；WBC自動(dòng)分類結(jié)果某種細(xì)胞百分比結(jié)果嚴(yán)重異常,中性分葉粒細(xì)胞>85%,淋巴細(xì)胞>50%；或者與病情不符時(shí)則必需鏡檢,確保發(fā)出的檢驗(yàn)結(jié)果是可靠的。另外，Dotson MA[15]在論述血片復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)時(shí)建議,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)自行規(guī)定復(fù)查的條件,這反映了當(dāng)前國外較普遍的看法[16]。

總之，通過對(duì)Sysmex XT-5000i具有分析速度快，準(zhǔn)確度高，精密度，線性相關(guān)性好以及血液標(biāo)本中抗雜質(zhì)干擾性強(qiáng)，可提供參數(shù)多等優(yōu)點(diǎn)，能很好地滿足臨床需要。但是到目前為止任何一臺(tái)先進(jìn)地血液分析儀都不能代替顯微鏡涂片鏡檢，血液分析儀測(cè)定都是一個(gè)過篩過程，我們?cè)谌粘９ぷ髦斜仨毤訌?qiáng)鏡下功夫，發(fā)現(xiàn)一些特殊的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)及時(shí)鏡檢，在過篩組篩檢的包括以下幾種情形：白細(xì)胞計(jì)數(shù)或分群異常、紅細(xì)胞和血紅蛋白異常、血小板異常及異常細(xì)胞警報(bào)提示等，以避免漏診或誤診。

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