生脈注射液防治放射性肺炎的實(shí)驗(yàn)研究

燕忠生，李 俊，魏千程，石 鯤，馬平平，田種澤，錢 震

蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050

生脈注射液防治放射性肺炎的實(shí)驗(yàn)研究

燕忠生，李 俊，魏千程，石 鯤，馬平平，田種澤，錢 震

蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050

目的:探討生脈注射液防治放射性肺炎的作用。方法：將60只雌性SD大鼠隨機(jī)分為空白組、生脈組、地塞米松組及模型組，每組15只。除空白組外其余各組用直線加速器對大鼠雙肺進(jìn)行單次照射25Gy造模，照射后生脈組、地塞米松組分別用相應(yīng)藥物灌胃，另2組均用生理鹽水灌胃，觀察各組大鼠2、4、6周時(shí)外觀、體質(zhì)量、肺系數(shù)及肺組織病理變化。結(jié)果：模型組大鼠照射2周后開始出現(xiàn)毛色無光澤，隨著時(shí)間延長癥狀逐漸加重，出現(xiàn)照射區(qū)脫毛，同時(shí)體質(zhì)量增長緩慢，肺系數(shù)逐漸增大，生脈組及地塞米松組明顯優(yōu)于模型組（P＜0.05）。模型組肺組織病理呈放射性肺炎改變，并隨著時(shí)間的延長，肺組織病理評(píng)分逐漸加重，生脈組及地塞米松組明顯較輕（P＜0.05），在第2、4周時(shí)生脈注射液組治療效果優(yōu)于地塞米松組（P＜0.05），但在第6周時(shí)兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：生脈注射液可明顯減輕大鼠放射性肺炎肺組織病理改變，反向驗(yàn)證了氣陰兩虛是放射性肺炎的主要中醫(yī)病機(jī)之一。

生脈注射液；放射性肺炎；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

放射性肺炎較為公認(rèn)的中醫(yī)病機(jī)主要為熱毒、肺燥、陰虛、氣虛，津虧、血瘀、痰阻，益氣養(yǎng)陰、清熱解毒、化痰祛瘀為其主要治法［1］。因此，按“未病先防”的原則，我們擬對益氣養(yǎng)陰中藥生脈注射液、清熱解毒中藥痰熱清注射液、活血化瘀中藥丹參注射液單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用防治放射性肺炎的作用進(jìn)行研究，擬比較不同治法方藥對放射性肺炎的作用，優(yōu)選最佳治法方藥，為臨床進(jìn)一步研究應(yīng)用中醫(yī)藥防治放射性肺炎提供依據(jù)。本文探討益氣養(yǎng)陰中藥生脈注射液單獨(dú)應(yīng)用對放射性肺炎大鼠的防治作用，并以方測證，反向驗(yàn)證放射性肺炎的中醫(yī)病機(jī)及證型。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)環(huán)境 健康雌性S D大鼠60只，體質(zhì)量(200±20)g，由蘭州軍區(qū)總醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SC X Y(軍)2012-0020，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)使用許可證號(hào)：SC X Y(軍) 2012-0029，飼養(yǎng)于S P F級(jí)大鼠飼養(yǎng)室，受試前籠養(yǎng)1周以適應(yīng)環(huán)境。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 生脈注射液(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：Z20053993)；地塞米松注射液(國藥集團(tuán)容生制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：H41020036)。

1.3 動(dòng)物分組 在照射前1周將60只大鼠隨機(jī)分為空白組、生脈組、地塞米松組及模型組，每組15只。

1.4 模型建立及藥物使用方法 除空白組外，其余各組大鼠均腹腔注射2%戊巴比妥鈉0.001 2m L/g進(jìn)行麻醉，麻醉后的大鼠每5只固定于木板之上，保持大鼠肺在同一平面，用6M V-X線直線加速器，對準(zhǔn)大鼠上至兩腋窩、下至胸骨劍突的位置進(jìn)行單次照射，屏蔽大鼠其余身體。照距為100 cm，其劑量率為250 cGy/m in，總劑量25Gy［2］。生脈組于照射后第1天即開始每日1次灌胃生脈注射液0.004 m L/g；地塞米松組于照射后第1天開始按成人用量的10倍，即0.002mg/g，每日1次灌胃地塞米松。模型組和空白組予等體積生理鹽水灌胃。

1.5 大鼠外觀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 4分：無脫毛、有光澤；3分：無脫毛、光澤差；2分：照射區(qū)脫毛，照射區(qū)范圍外無脫毛；1分：照射區(qū)外有脫毛。

1.6 大鼠肺組織病理觀察 分別于照射后2、4、6周，觀察大鼠毛色并測量其體質(zhì)量，同時(shí)每組各隨機(jī)取5只大鼠，斷頸處死，并迅速開胸取肺，全肺均在主支氣管上環(huán)甲膜處離斷，濾紙吸去肺表面血水，電子天平稱重，肺濕重除以鼠體質(zhì)量乘以100得肺系數(shù)。然后將大鼠右上肺組織固定于 4%緩沖性甲醛溶液中，常規(guī)石蠟包埋制片，HE染色后隱藏分組信息進(jìn)行光鏡觀察病理改變，每標(biāo)本評(píng)分3張切片，隨機(jī)4個(gè)以上視野，進(jìn)行病理評(píng)分。肺泡壁腫脹和炎性細(xì)胞浸潤評(píng)分0～4分：0分為正常；1分為肺泡壁稍增寬，有少許炎性細(xì)胞浸潤，高倍視野下＜10個(gè)炎性細(xì)胞；2分為肺泡壁明顯增寬，有明顯炎性細(xì)胞浸潤，高倍視野下10～20個(gè)炎性細(xì)胞；3分為肺泡壁明顯增寬，炎性細(xì)胞浸潤布滿肺泡壁；4分為除炎性細(xì)胞浸潤布滿肺泡壁外，明顯的肺泡內(nèi)浸潤［2］。

2 結(jié)果

2.1 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠的外觀評(píng)分 空白組大鼠外觀評(píng)分為4分，其余各組大鼠照射后外觀評(píng)分由高到低依次為生脈組、地塞米松組、模型組，單因素方差分析4組間在第2、4、6周差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)外觀評(píng)分 分

2.2 大鼠體質(zhì)量變化 各造模大鼠于照射后出現(xiàn)不同程度呼吸加快，活動(dòng)減少，食欲下降，體質(zhì)量下降，第2周后體質(zhì)量逐漸增加，生脈組及地塞米松組大鼠的體質(zhì)量增加幅度較空白組低，但較模型組高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。模型組在第2、4周體質(zhì)量也輕度增加，在第6周時(shí)大鼠體質(zhì)量與第4周時(shí)相比有所下降，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。生脈組體質(zhì)量在第2、4周均較地塞米松組高，在第6周時(shí)地塞米松組體質(zhì)量超過生脈組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表2。

表2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)體質(zhì)量比較 g

2.3 肺大體改變 在6周終止觀察時(shí)，模型組中有4只出現(xiàn)雙側(cè)大量胸腔積液，而生脈組、地塞米松組和空白組均無明顯胸腔積液。模型組肺系數(shù)隨著時(shí)間延長逐漸升高，并且在第2、4、6周3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯高于生脈組、地塞米松組及空白組(P＜0.05)，同時(shí)在各時(shí)間點(diǎn)地塞米松組肺系數(shù)均高于生脈組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)肺系數(shù)變化

2.4 各組大鼠肺組織病理學(xué)改變 照射后第2、4和6周肺組織病理評(píng)分，由高到低順序均為模型組、地塞米松組、生脈組、空白組(圖1)，且在各時(shí)間點(diǎn)空白組肺組織病理評(píng)分遠(yuǎn)低于其他3組(P＜0.05)，模型組顯著高于其他各組(P＜0.05)；在照射后第2、4周地塞米松組肺組織病理評(píng)分高于生脈組(P＜0.05)，但在第6周時(shí)地塞米松組肺組織病理和生脈注射液組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.139)。見圖1。

圖1 各組不同時(shí)間點(diǎn)肺組織病理評(píng)分

3 討論

我們前期臨床流行病學(xué)調(diào)查研究的結(jié)果表明，熱毒(火)、肺燥、陰虛、氣虛、津虧、血瘀、痰阻為其放射性肺炎病機(jī)關(guān)鍵［1-2］。另一項(xiàng)臨床流行病學(xué)調(diào)查研究的結(jié)果表明，放射性肺炎治療應(yīng)以養(yǎng)陰益氣潤肺法、清熱解毒法為主，活血化瘀法、補(bǔ)腎納氣法次之［3］。實(shí)驗(yàn)研究表明放射性肺損傷的病因是熱毒侵襲，病證早期為熱傷肺絡(luò)、晚期為瘀阻肺絡(luò)，而且經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)涼血活血藥物對放射性肺損傷有較好的防治作用［4］。為此，我們對益氣養(yǎng)陰中藥生脈注射液、清熱解毒中藥痰熱清注射液、活血化瘀中藥丹參注射液單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用防治放射性肺炎的作用進(jìn)行研究，擬比較不同治法方藥對放射性肺炎的作用，優(yōu)選最佳治法方藥，并以方測證，反向驗(yàn)證放射性肺炎的中醫(yī)病機(jī)及證型，為臨床進(jìn)一步研究應(yīng)用中醫(yī)藥防治放射性肺炎提供依據(jù)。

生脈注射液主要由紅參、麥冬、五味子組成，3藥相合，一補(bǔ)一清一斂，具有益氣養(yǎng)陰、生津止渴、斂陰止汗之功，使氣復(fù)津回、汗止而陰存。生脈注射液防治放射性肺炎的研究，國內(nèi)已有報(bào)道［5］。本研究擬進(jìn)一步觀察其對放射性肺炎的防治作用，并以方測證，反向驗(yàn)證氣陰兩虛是放射性肺炎的中醫(yī)病機(jī)及證型之一。本研究發(fā)現(xiàn)，放射性肺炎模型大鼠經(jīng)生脈注射液治療后其脫毛癥狀較模型組明顯減輕，而且其作用優(yōu)于地塞米松。同時(shí)在各時(shí)間點(diǎn)生脈注射組大鼠體質(zhì)量較模型組明顯增加，但其作用未明顯優(yōu)于地塞米松組，這可能與地塞米松能調(diào)節(jié)脂肪代謝，引起脂肪組織的聚集而導(dǎo)致體質(zhì)量增加有關(guān)。模型組肺組織病理呈放射性肺炎改變，并隨著時(shí)間延長，肺組織病理評(píng)分逐漸加重，生脈組及地塞米松組明顯較輕，在第2、4周時(shí)生脈注射液組治療效果優(yōu)于地塞米松組，但在第6周時(shí)兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果提示生脈注射液能有效減輕大鼠放射性肺炎肺組織病理變化及全身不良反應(yīng)，且效果和地塞米松相當(dāng)。益氣養(yǎng)陰中藥生脈注射液對放射性肺炎有較好的療效，同時(shí)以方測證，反向驗(yàn)證了氣陰兩虛是放射性肺炎的主要中醫(yī)病機(jī)之一。

［1］ 燕忠生，張慧源，徐進(jìn)，等.放射性肺炎辨證分型臨床報(bào)道分析［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28(9)：2005-2006.

［2］ 李澎濤，張娜，朱曉磊.痰熱清注射液抗內(nèi)毒素所致急性肺損傷的試驗(yàn)研究［J］.中國藥學(xué)雜志，2005，40(7)：518-521.

［3］ 王文成.放射性肺炎中醫(yī)辨識(shí)初探［J］.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，30(5)：482-483.

［4］ 竇永起，楊明會(huì)，林明雄，等.早期應(yīng)用涼血活血中藥對大鼠放射性肺損傷中醫(yī)證侯學(xué)演變的影響［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15(5)：42-45.

［5］ 劉哲峰，楊明會(huì)，孫艷，等.生脈注射液對放射性肺損傷防治作用的臨床研究［J］.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2005，21(2)：112-115.

The T rialof ShengMai In jection on Preventing and T reating Radiation Pneum onia

YAN Zhongsheng,LIJun,WEIQiancheng,SHIKun,MA Pingping,TIAN Zhongze,QIAN Zhen
Lanzhou General Hospital of Lanzhou Military Command,Lanzhou 730050,China

Objective:To explore the function of Shengmai injection on preventing and treating radiation pneumonia.Methods:All60 female ratswere random ly allocated to the blank group,Shengmai injection group,dexamethasone group and themodelgroup equally w ith 15 cases in each.Except the blank group,the single irradiation of 25Gy was implemented to other rats to establishmodels by linearaccelerator.A fter irradiation,corresponding drugs were given to rats in ShengMai injection and dexamethasone group and normal salines for other two groups by gavage.Appearance,bodymass,lung index and pathological changes of lung tissue of all ratswere observed at the end of 2nd,4th and 6th week.Results:Being irradiated for two weeks,the lackluster fur occurred in rats in themodel group.Symptomsaggravated gradually as timewentonwhich presented as follows:epilation in exposed region,slow weightgrow th and increase of lung index.The symptoms in ShengMai injection and dexamethasone group were obviouslym ilder than themodelgroup(P＜0.05).Pathological changesof lung tissuewere found in themodelgroup and pathological score of lung tissue increased w ith prolonged time.The symptomswere obviouslym ilder than that of Shengmai injection and dexamethasone group (P＜0.05).The therapeutic effect in Shengmai injection group at 2nd and 4th week wasbetter than thatof dexamethasone group(P＜0.05),while the difference between two groups in the 6th week had no statisticalmeaning (P=0.139).Conclusion:ShengMai injection has the significanteffecton relieving pathological changes of lung tissue in rats of radiation pneumonia,which,in turn,verifies that Qi and Yin deficiency isoneof thepathogenesisof radiation pneumonia in TCM.

Shengmai injection;radiation pneumonia;animal trial

R285.5

A

1004-6852(2015)04-0015-03

2015-05-27

2013年度軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)CLZ13JB07)。

燕忠生(1968—)，男，碩士學(xué)位，副主任醫(yī)師。研究方向：腫瘤疾病的中西醫(yī)結(jié)合診治。