細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞聯(lián)合多西他賽、卡鉑治療晚期卵巢癌的療效及安全性

高翔，劉永軍，李曉丹，于華

(邯鄲市第一醫(yī)院，河北邯鄲056002)

晚期卵巢癌患者機(jī)體耐受性差，化療往往損害機(jī)體免疫功能，降低患者的生活質(zhì)量，縮短生存期。因此，化療結(jié)束后如何提高機(jī)體的免疫功能顯得尤為重要。目前，細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK)能夠?qū)Χ喾N腫瘤產(chǎn)生強(qiáng)大的抗腫瘤效應(yīng)，對(duì)提高機(jī)體免疫力、抑制腫瘤細(xì)胞增殖有重要作用，被認(rèn)為是新一代腫瘤過(guò)繼免疫治療的首選方案［1，2］。近年來(lái)，我們采用多西他賽、卡鉑化療結(jié)束后輸注CIK治療晚期卵巢癌取得良好療效?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2008年1月～2012年1月收治的晚期卵巢癌患者91例，均經(jīng)組織病理學(xué)檢查或腹水檢測(cè)找到癌細(xì)胞證實(shí)為晚期卵巢上皮癌。患者均為初次治療，治療前心電圖、血常規(guī)、肝腎功檢測(cè)均無(wú)異常，無(wú)化療禁忌證;體能狀況評(píng)分0～2級(jí)，預(yù)計(jì)生存時(shí)間≥6個(gè)月。采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為兩組。治療組46例，年齡(62.3±2.6)歲，其中漿液性腺癌14例、黏液性腺癌19例、未分化癌13例，合并腹水31例;對(duì)照組45例，年齡(61.7±3.2)歲，其中漿液性腺癌20例、黏液性腺癌17例、未分化癌8例，合并腹水33例。兩組臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 治療組給予TC方案化療聯(lián)合CIK治療，對(duì)照組給予TC方案化療。TC方案:多西他賽75 mg/m2靜滴，d1，卡鉑300 mg/m2給予腹腔灌注，有腹水者灌注前將腹水抽取干凈，無(wú)腹水者直接灌注。將卡鉑溶入1 000 mL生理鹽水中加溫后，經(jīng)導(dǎo)管注入腹腔，每隔30 min變換1次體位，使藥物在腹腔內(nèi)均勻分布?；熎陂g定期查血常規(guī)及肝腎功能。兩組均給予4～6個(gè)周期化療。CIK培養(yǎng)及回輸:化療前取外周血50 mL，肝素鈉抗凝，采用Ficoll密度梯度離心法獲得單個(gè)核細(xì)胞，用 RPMI1640培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度，加入IFN-γ，培養(yǎng)24 h后加入CD3單抗和IL-2，每2～3 d換液1次，培養(yǎng)6 d后獲得CIK。取少量CIK用流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫檢測(cè)，當(dāng)細(xì)胞數(shù)≥50%細(xì)胞≥30%，且CIK培養(yǎng)基中細(xì)菌、真菌及內(nèi)毒素檢測(cè)均為陰性時(shí)，將CIK用生理鹽水洗滌3次，加入含1%人血白蛋白的生理鹽水中于4～6個(gè)周期化療結(jié)束后回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，1次/d，連輸5 d。

1.2.2 檢測(cè)方法 治療前2 d及治療結(jié)束后2周用流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩組NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群(

1.2.3 療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 近期療效:根據(jù)影像學(xué)檢查結(jié)果按實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，完全緩解(CR):全部病灶消失，維持4周以上;部分緩解(PR):病灶縮小至少30%，維持4周以上;穩(wěn)定(SD):介于PR和PD之間;進(jìn)展(PD):病灶增加超過(guò)20%或出現(xiàn)新病灶?？陀^(guān)有效(RR)=CR+PR。參考Karnofsky(KPS)評(píng)分［3］變化評(píng)價(jià)患者的生存質(zhì)量，以治療后KPS增加≥10分為生存質(zhì)量改善，變化＜10分為生存質(zhì)量穩(wěn)定，減少≥10分為生存質(zhì)量降低。生存期:從治療開(kāi)始至死亡或末次隨診時(shí)間。不良反應(yīng)評(píng)價(jià):按照WHO抗癌藥物急性與亞急性不良反應(yīng)的表現(xiàn)及分度標(biāo)準(zhǔn)，分為0～Ⅳ度。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用率和構(gòu)成比表示，差異比較采用χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料以±s表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)。應(yīng)用 Kaplan-Meier法計(jì)算總生存率。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組近期療效比較 治療結(jié)束2個(gè)月后評(píng)價(jià)，治療組CR 22例，PR 18例，SD 4例，PD 2例，CR率為47.8%，RR率為87.0%;對(duì)照組CR 19例，PR 16例，SD 5例，PD 5例，CR率為 42.2%，RR率為77.8%，兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。

2.2 兩組免疫功能比較 治療組治療結(jié)束后T細(xì)胞亞群中的 CD+3、CD+4、CD+16CD+56、CD+4/CD+8均不同程度地升高，治療前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＜0.05);對(duì)照組治療前后無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組治療前后免疫功能的變化(±s)

表1 兩組治療前后免疫功能的變化(±s)

注:與本組治療前比較，*P＜0.05;與對(duì)照組治療后比較，*P＜0.05。

組別 n CD+3(%) CD+4(%) CD+8(%) CD+4/CD+8 CD+16CD+56(%)46治療前 47.11±7.45 35.37±1.28 34.61±2.08 1.02±0.62 33.09±4.34治療后 52.05±3.47* 39.29±4.32* 26.64±3.85 1.47±1.12 40.13±4.81*對(duì)照組 45治療前 46.84±3.52 36.10±4.72 34.78±5.36 1.04±0.88 31.82±5.05治療后 44.02±2.37 34.20±2.16 34.97±3.02 0.98±0.72治療組28.30±3.18

2.3 兩組生存質(zhì)量改善情況比較 治療結(jié)束后1個(gè)月，治療組生存質(zhì)量改善35例，穩(wěn)定9例，降低2例，改善率為76.1%;對(duì)照組改善20例，穩(wěn)定17例，降低8例，改善率為44.4%。兩組生存質(zhì)量改善率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。

2.4 兩組生存率比較 至2014年1月30日，治療組失訪(fǎng)3例，對(duì)照組失訪(fǎng)4例，隨訪(fǎng)率為92.3%(84/91)。治療組與對(duì)照組的1年生存率分別為81.4%(35/43)和61.0%(25/41)，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);2年生存率分別為62.8%(27/43)和41.5%(17/41)，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。

2.5 兩組不良反應(yīng)比較 兩組不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為骨髓抑制(白細(xì)胞下降、血小板下降和貧血)，胃腸道反應(yīng)(惡心、嘔吐及腹痛)，多為Ⅰ～Ⅱ級(jí)，經(jīng)對(duì)癥治療后均好轉(zhuǎn)，未出現(xiàn)治療相關(guān)性死亡。治療組白細(xì)胞下降發(fā)生率為80.4%(37/46)，貧血發(fā)生率為69.6%(32/46)，惡心、嘔吐發(fā)生率為87.8%(40/46)，腹痛發(fā)生率為54.3%(25/46);對(duì)照組白細(xì)胞下降發(fā)生率為 86.7%(39/45)，貧血發(fā)生率為80.0%(36/45)，惡心、嘔吐發(fā)生率為91.1%(41/45)，腹痛發(fā)生率為64.4%(29/45)，兩組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＞0.05)。

3 討論

晚期卵巢癌的治療主要為腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)和以鉑類(lèi)藥物為基礎(chǔ)的化療。20世紀(jì)90年代以來(lái)，紫杉醇聯(lián)合卡鉑成為晚期卵巢癌化療的標(biāo)準(zhǔn)一線(xiàn)方案，但該方案的嚴(yán)重神經(jīng)毒性限制了其應(yīng)用。隨著新藥的研發(fā)，第二代紫杉烷類(lèi)半合成抗腫瘤藥物多西他賽逐步應(yīng)用于臨床［4］。李二虎［5］報(bào)道，多西他賽聯(lián)合卡鉑腹腔灌注治療晚期卵巢癌的近期有效率為80.8%。逯華等［6］采用多西他賽聯(lián)合卡鉑治療晚期復(fù)發(fā)性卵巢癌患者36例，有效率為80.55%。雖然一線(xiàn)化療有效率可達(dá)80%左右，但仍有55% ～75%的患者在治療后3年內(nèi)復(fù)發(fā)，考慮其原因可能為化療藥物造成機(jī)體正常細(xì)胞的損傷，使患者的免疫系統(tǒng)功能受到抑制，從而潛伏的腫瘤細(xì)胞再次增殖所致［7］。因此如何在提高化療效果的同時(shí)改善機(jī)體的免疫功能顯得尤為重要。

惡性腫瘤患者通常存在免疫功能狀態(tài)紊亂、低下，而免疫功能紊亂、低下往往預(yù)示患者預(yù)后不佳。機(jī)體的抗腫瘤免疫作用是依靠機(jī)體的免疫監(jiān)視作用來(lái)完成的，其中細(xì)胞免疫起主要作用［8］。人體T細(xì)胞中CD+4、CD+8細(xì)胞是細(xì)胞免疫系統(tǒng)中兩大基本組成部分，CD+4/CD+8正常值為1.5～2.0。腫瘤患者因機(jī)體免疫監(jiān)視功能降低，常表現(xiàn)為CD+4細(xì)胞下降，CD+8細(xì)胞上升，CD+4/CD+8值減小，甚至倒置［9］。CD16和CD56是 NK 細(xì)胞的表面標(biāo)志，其表達(dá)下降提示機(jī)體NK細(xì)胞作用受抑制，細(xì)胞免疫功能下降，不能發(fā)揮有效殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。CIK細(xì)胞是將人體外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外加用多種細(xì)胞因子共同培養(yǎng)增殖后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞，是目前自體免疫細(xì)胞治療的主要類(lèi)型之一［10］。

CIK具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗腫瘤活性和NK細(xì)胞非主要組織相容性復(fù)合體限制性殺瘤活性，體內(nèi)外增殖能力強(qiáng)，殺瘤譜更廣［11］。體內(nèi)回輸CIK可以在不損傷機(jī)體免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的前提下，直接殺傷腫瘤細(xì)胞，并可調(diào)節(jié)和增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。張輝等［12］研究發(fā)現(xiàn)，CIK能將卵巢癌耐藥細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯于S或G2/M期，并誘導(dǎo)其凋亡，降低耐藥基因的表達(dá)，提高耐藥細(xì)胞的免疫原性，同時(shí)能分泌 IL-2、TNF-γ、INF-γ、粒細(xì)胞—巨噬細(xì)胞集落刺激因子等具有抗腫瘤活性的細(xì)胞因子，發(fā)揮抗腫瘤作用。夏俊賢等［13］研究發(fā)現(xiàn)，晚期卵巢癌患者輸注CIK后，機(jī)體的免疫功能明顯改善。本研究中治療組應(yīng)用CIK后機(jī)體的CD+4/CD+8及CD+16CD+56均顯著升高，說(shuō)明機(jī)體的免疫功能明顯改善，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。但目前CIK在晚期卵巢癌患者的遠(yuǎn)期生存方面有何影響卻鮮有報(bào)道。本研究對(duì)CIK治療的晚期卵巢癌患者長(zhǎng)達(dá)2年多的隨訪(fǎng)，發(fā)現(xiàn)CIK聯(lián)合化療相對(duì)于單純化療而言能顯著提高晚期卵巢癌患者的1年和2年生存率。但CIK對(duì)其他腫瘤的效果如何，我們將繼續(xù)進(jìn)行研究。

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