清肺顆粒中甘草的薄層鑒別方法研究

李玉平，胡宇莉，蘇　亮（重慶市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶　401120）

清肺顆粒中甘草的薄層鑒別方法研究

李玉平，胡宇莉，蘇亮
（重慶市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶401120）

摘要：試驗(yàn)采用薄層色譜鑒別法研究和改進(jìn)清肺顆粒中甘草的鑒別方法。結(jié)果顯示，供試品色譜中，檢出與甘草對(duì)照藥材相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照無(wú)干擾，說(shuō)明改進(jìn)后的方法簡(jiǎn)便快速，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好。

關(guān)鍵詞：清肺顆粒；甘草；薄層鑒別

清肺顆粒具有清肺平喘、化痰止咳的功效，主要由板藍(lán)根、浙貝母、葶藶子、甘草和桔梗5味中藥組成，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)匯編中。在標(biāo)準(zhǔn)中甘草的薄層鑒別方法，對(duì)照藥材與樣品處理前處理方法不一致，進(jìn)而會(huì)引起結(jié)果存在一些差異，專屬性不強(qiáng)，同時(shí)提取方法復(fù)雜，提取次數(shù)較多，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，增加了實(shí)驗(yàn)的成本。

為建立簡(jiǎn)便快速、專屬性強(qiáng)和重現(xiàn)好的薄層鑒別方法，本試驗(yàn)參考《中華人民共和國(guó)獸藥典》2010版第二部及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，對(duì)處方中的薄層鑒別方法進(jìn)行了研究和改進(jìn)，進(jìn)而建立適合制劑中甘草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制的薄層鑒別方法[ 1-3 ]。

1　試驗(yàn)材料

1.1試驗(yàn)儀器

KQ-600DA型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；AB204-S型分析天平（梅特勒-托利多公司）；DK-98-Ⅱ型電熱恒溫水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）；三用紫外檢測(cè)儀（上海安亭科學(xué)儀器廠）。

1.2試驗(yàn)藥品和試劑

甘草對(duì)照藥材（批號(hào)：120904-201117，購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院）；清肺顆粒（批號(hào)為：20130901、20130902、20130903，由重慶市方通獸藥有限公司提供）；所用試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1不同處理方法的結(jié)果比較

2.1.1原標(biāo)準(zhǔn)方法

取清肺顆粒10 g，置具塞錐形瓶中，加水40 mL使其溶化，加乙醚45 mL，密塞，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液揮去乙醚，加正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，加水10 mL洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使其溶解，作為供試品溶液。

2.1.2改進(jìn)后方法

取清肺顆粒研細(xì)，取粉末10 g，置具塞錐形瓶中，加水40 mL使其溶化，過(guò)夜，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液加正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，加水10 mL洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使其溶解，作為供試品溶液。清肺顆粒用不同方法對(duì)樣品處理的結(jié)果比較見(jiàn)圖1。

2.2改進(jìn)后的方法和試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1供試品溶液的制備

取清肺顆粒10 g，研細(xì)，按上述方法制備供試品溶液。

2.2.2陰性對(duì)照溶液的制備

取缺甘草的清肺顆粒粉末10 g，按上述方法制備陰性對(duì)照溶液。

圖1　清肺顆粒不同方法對(duì)樣品處理的結(jié)果比較

2.2.3對(duì)照藥材溶液的制備

取甘草對(duì)照藥材1 g，加水50 mL，回流提取30 min，濾過(guò)，濾液用正丁醇振搖提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，用水30 mL洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使其溶解，作為對(duì)照藥材溶液。

2.2.4薄層層析及結(jié)果

取上述3種溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15?1?1?2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，熱風(fēng)吹干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰后，在日光及紫外燈365 nm下檢視。結(jié)果顯示，供試品色譜中，分別在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無(wú)干擾，清肺顆粒甘草TLC圖譜見(jiàn)圖2。

圖2　清肺顆粒甘草TLC圖譜

3　討論

甘草的薄層鑒別過(guò)程中，原標(biāo)準(zhǔn)方法采用乙醚處理樣品，乙醚易糊化于玻璃容器中，難以過(guò)濾；并且將提取后的濾液揮去乙醚，樣品中含有水，具塞玻璃瓶中難以確定乙醚揮發(fā)的程度，進(jìn)而影響到樣品后續(xù)的提取，同時(shí)乙醚對(duì)人體有一定的危害。參考相關(guān)文獻(xiàn)，改進(jìn)后的方法減去了樣品用乙醚處理的步驟，直接采用正丁醇提取，既沒(méi)有影響色譜斑點(diǎn)的檢出，又解決了樣品糊化黏附和過(guò)濾的問(wèn)題，簡(jiǎn)化了試驗(yàn)流程，減少了對(duì)人體的危害[ 4-6 ]。

改進(jìn)后的方法將原標(biāo)準(zhǔn)中所使用的“含1%氫氧化鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板”改為“以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板”，結(jié)果顯示色譜斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)和重現(xiàn)性好。

由于顆粒劑的硬度和脆度較大，改進(jìn)法在制備供試品溶液時(shí)將其研細(xì)，此方法使樣品的溶解度提高，從而使薄層譜在重現(xiàn)性和平行性方面良好，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

[參考文獻(xiàn)]

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[ 5 ]賴克道,劉元,文志云,等.薄層色譜法定性鑒別小柴胡顆粒中的柴胡、甘草[J].廣西醫(yī)學(xué), 2009（6）: 886-887.

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前沿科技摘編

Study of TLC Identification for Radix Glycyrrhizae of Qingfei Granules

LI Yuping, HU Yuli, SU Liang
（Chongqing Animal Disease Control and Prevention Center, Chongqing 401120, China）

Abstract:TLC were used to study and improve the identification method of radix glycyrrhizae of qingfei gran?ules. The results showed that the same color chromatographic spots were detected in the test samples and their respec?tive reference substance, and the negative control without interference. The results showed that this method was sim?ple andrapid,strong specificity,goodreproducibility.

Key words:qingfei granules; radix glycyrrhizae; TLC

作者簡(jiǎn)介：李玉平（1986-），女，河南林州人，碩士，助理獸醫(yī)師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量研究。

收稿日期：2015-08-01

中圖分類號(hào)：R286；R284.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-0084（2015）09-0005-03