2010年至2014年南昌地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)結(jié)果分析

樊璐

(江西省血液中心，江西 南昌330052)

為了解本地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血清學(xué)標(biāo)志物的感染狀況及傳染性疾病的流行趨勢(shì)，以減少血液報(bào)廢，預(yù)防和控制疾病經(jīng)輸血傳播，我們對(duì)2010-2014年南昌地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象 2010年至2014年本中心無(wú)償獻(xiàn)血者共計(jì)333575人次，其中男性 204091人次，女性129484人次，經(jīng)健康征詢和查詢既往獻(xiàn)血史，并進(jìn)行血比重檢測(cè)和HBsAg快速篩查合格，年齡18～55周歲。采血后留取血樣，按衛(wèi)計(jì)委《獻(xiàn)血者健康檢查要求》對(duì)采集的血樣做初復(fù)檢。

1.2 試劑 HBsAg金標(biāo)試紙條 (廈門英科新創(chuàng))、HBsAg ELISA試劑盒(廈門英科新創(chuàng)和北京金豪)、抗-HCV ELISA試劑盒(北京萬(wàn)泰和北京金豪)、抗-HIV ELISA試劑盒(法國(guó)伯樂(lè)和荷蘭梅里埃；廈門英科新創(chuàng)和北京萬(wàn)泰)、抗-TP ELISA試劑盒(北京萬(wàn)泰和北京金豪)、ALT檢測(cè)試劑盒(北京中生北控和浙江伊利康)；美國(guó)羅氏乙肝病毒、丙肝病毒、人類免疫缺陷病毒(1+2型)核酸聯(lián)合檢測(cè)試劑。所有試劑均為批批檢合格產(chǎn)品，且在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 STAR全自動(dòng)樣本處理系統(tǒng) (瑞士HAMILTON公司)；XANTUS全自動(dòng)加樣與血型分析儀 (瑞士Sias公司)；FAME 24/20全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)(瑞士HAMILTON公司)；全自動(dòng)生化分析儀(德國(guó)西門子公司)；全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)杜邦公司)；Microlab STAR IVD混樣儀 (瑞士 HAMILTON公司)；COBASAmpliPrep核酸提取儀 (美國(guó)Roche公司)；COBASTaqMan擴(kuò)增儀 (美國(guó)Roche公司)。儀器均每年定期校驗(yàn)。

1.4 檢測(cè)方法 對(duì)獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行HBsAg金標(biāo)法初篩，結(jié)果陰性者經(jīng)體檢合格方能獻(xiàn)血。HB-sAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP均采用 ELISA 法進(jìn)行初復(fù)檢，對(duì)ELISA陰性標(biāo)本增加1遍核酸檢測(cè)(NAT)。將NAT拆分檢測(cè)反應(yīng)性的單個(gè)樣品送國(guó)家衛(wèi)計(jì)委臨檢中心(NCCL)進(jìn)行核酸定量檢測(cè)。ALT采用速率法，所有檢測(cè)均嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書操作?？?HIV陽(yáng)性的血液標(biāo)本送江西省疾控中心HIV確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行Western blotting確證。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行不合格率的比較分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2010年至2014年南昌地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)不合格結(jié)果統(tǒng)計(jì) 見表1。

2.2 NAT篩查ELISA檢測(cè)陰性的獻(xiàn)血者血液結(jié)果羅氏COBASS201核酸檢測(cè)系統(tǒng)采用6樣本匯集混樣檢測(cè)，對(duì)ELISA陰性的無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行NAT篩查，并將拆分檢測(cè)出反應(yīng)性的單個(gè)樣品送NCCL進(jìn)行核酸定量檢測(cè)。本中心2010-2014年期間NAT陽(yáng)性標(biāo)本531例，NCCL回報(bào)結(jié)果顯示其中311例反應(yīng)性樣品均為HBV-DNA陽(yáng)性，1例為HBV-DNA及HCV-RNA雙重陽(yáng)性，1例為HCV-RNA陽(yáng)性，未檢出HIV-RNA陽(yáng)性標(biāo)本。

表1 2010年至2014年南昌地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)不合格結(jié)果(n，%)

3 討論

2010年至2014年南昌地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)不合格結(jié)果呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)，各年間各項(xiàng)不合格率存在顯著性差異，總不合格率為3.48%，接近天津 3.42%[1]，高于紹興 1.9%[2]，低于成都 5.27%[3]、西安 4.05%[4]、青島 3.94%[5]、遵義 3.72%[6]等地區(qū)。以上數(shù)據(jù)表明，與國(guó)內(nèi)部分城市相比，近年來(lái)南昌地區(qū)血液總不合格率處于較低水平，但由于病毒感染率、檢測(cè)方法、初復(fù)檢試劑的靈敏度和特異性存在差異以及檢測(cè)試驗(yàn)操作誤差等影響因素，血液不合格率高于鄰近城市紹興，與天津地區(qū)情況相似。

2010年至2014年血液檢測(cè)結(jié)論不合格項(xiàng)目由高到低依次為 ALT＞HBsAg＞抗-TP＞抗-HCV＞抗-HIV，各項(xiàng)目占總不合格百分比分別為1.81%、0.93%、0.45%、0.2%、0.08%，其中ALT和HBsAg是最主要的不合格項(xiàng)。ALT報(bào)廢與團(tuán)體獻(xiàn)血時(shí)往往未開展ALT篩查，加之一些非病理性因素如飲酒、服藥、熬夜、體型肥胖、劇烈運(yùn)動(dòng)及血液標(biāo)本保存溫度、黃疸、溶血、脂血影響檢測(cè)結(jié)果，使ALT成為主要不合格項(xiàng)。因此，加強(qiáng)ALT相關(guān)影響因素宣傳，在無(wú)償獻(xiàn)血現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用干式生化儀實(shí)施采血前快速ALT初篩，使ALT增高者暫緩獻(xiàn)血，可顯著降低無(wú)償獻(xiàn)血的不合格率[7]。我國(guó)是乙肝高度流行區(qū)，HBsAg攜帶者達(dá)7.18%[8]。采血前對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行膠體金法HBsAg篩查，大部分HBsAg攜帶者被排除，但仍存在漏檢，與金標(biāo)試劑靈敏度受限制有關(guān)。采用ELISA經(jīng)典兩步夾心法，并同時(shí)使用兩種不同試劑進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)降低HBsAg漏檢率有重要意義[9]。梅毒陽(yáng)性率2010年至2013年有所升高，排除藥物等影響因素外，表明近年來(lái)南昌地區(qū)獻(xiàn)血者梅毒感染情況與相關(guān)報(bào)道顯示我國(guó)各地獻(xiàn)血人群梅毒血清學(xué)流行率、發(fā)生率呈上升趨勢(shì)[10]相一致。2014年抗-TP不合格率下降，可能與本中心外采醫(yī)生對(duì)高危人群?jiǎn)栐\時(shí)加強(qiáng)了溝通技巧，使有危險(xiǎn)行為者主動(dòng)放棄獻(xiàn)血相關(guān)。建議增加獻(xiàn)血前抗-TP快速篩檢，以降低不合格率?？?HCV在正常人群中陽(yáng)性率較低[11]，抗-HCV不合格率為0.2%，低于我國(guó)丙肝感染率1.7%[12]，接近青島0.22%[5]、遵義0.24%[6]等地區(qū)。2010年至2014年抗-HIV不合格率逐年下降，與本中心2010年使用的進(jìn)口第4代HIV試劑靈敏度較高，導(dǎo)致假陽(yáng)性率升高，引進(jìn)NAT檢測(cè)后ELISA試劑更換為國(guó)產(chǎn)第3代HIV試劑相關(guān)。282例抗-HIV初篩陽(yáng)性標(biāo)本中，僅有49例經(jīng)省疾控中心確證為陽(yáng)性。ELISA法檢測(cè)抗-HIV出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，影響因素包括試劑包被抗原的種類及純度、血液中含內(nèi)源性物質(zhì)、檢測(cè)過(guò)程的影響等。提高抗-HIV檢測(cè)試劑的特異性以及血液檢測(cè)人員嚴(yán)格按照規(guī)程操作對(duì)降低假陽(yáng)性率，減少血源浪費(fèi)具有積極的現(xiàn)實(shí)意義。

為加強(qiáng)血液安全，國(guó)家衛(wèi)計(jì)委啟動(dòng)了核酸檢測(cè)試點(diǎn)工作。本中心從2010年1月起，引進(jìn)羅氏COBASS201核酸篩查系統(tǒng)對(duì)ELISA檢測(cè)合格的血液標(biāo)本實(shí)行 HBV／HCV／HIV聯(lián)合核酸檢測(cè)。2010年至2014年期間NAT陽(yáng)性標(biāo)本中，血清轉(zhuǎn)換窗口期HBV感染的血液311例、HBV及HCV雙重感染1例、HCV感染1例，尚未發(fā)現(xiàn)HIV窗口期樣本。相關(guān)報(bào)道顯示HBV輸血傳播的殘余風(fēng)險(xiǎn)高于HCV或HIV-1[13]，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果中NAT收益標(biāo)本絕大部分為HBV-DNA反應(yīng)性，證實(shí)了HBV輸血傳播的殘余風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高，這可能與江西地區(qū)人群HBV高感染率有關(guān)[14]。因窗口期、病毒變異、亞型、免疫靜默感染、試劑靈敏度等因素，ELISA檢測(cè)存在局限性[15]。NAT檢測(cè)是直接檢測(cè)病原體核酸，特異性好、靈敏度高，可將HBV、HCV、HIV病毒檢測(cè)的窗口期分別縮短約50%、80%、50%[16,17]，能發(fā)現(xiàn)隱匿性病毒感染及病毒變異株，彌補(bǔ)ELISA檢測(cè)的不足，減少因ELISA漏檢導(dǎo)致的輸血后病毒感染，降低血液檢測(cè)殘余風(fēng)險(xiǎn)[18-21]。近年來(lái)不少國(guó)家和地區(qū)已采取一遍ELISA、一遍NAT的血液篩查策略以保障血液安全[22,23]。本研究表明，在血清學(xué)檢測(cè)的基礎(chǔ)上，通過(guò)NAT檢測(cè)能發(fā)現(xiàn)具有潛在感染性的標(biāo)本，常規(guī)開展NAT可進(jìn)一步提高南昌地區(qū)輸血安全。

輸血是臨床重要的治療手段之一。本組資料顯示，5項(xiàng)感染性指標(biāo)總體不合格率和各項(xiàng)不合格率各年間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示我們做好以下工作：(1)血液檢測(cè)方面選擇NAT等新技術(shù)新方法及特異性強(qiáng)、靈敏度高、廣譜性大的試劑，增加初篩項(xiàng)目，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。(2)加大無(wú)償獻(xiàn)血宣傳力度，普及安全血液相關(guān)知識(shí)，在血源招募征詢時(shí)加強(qiáng)排查，注意咨詢技巧，對(duì)初次獻(xiàn)血者重點(diǎn)講解獻(xiàn)血知識(shí)，從源頭把好血液質(zhì)量關(guān)。

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