血漿內(nèi)毒素定量檢測(cè)臨床應(yīng)用探討

胡建華，萬向農(nóng)，周蔚，張茜，黃建平

(武警江西總隊(duì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南 昌 3 30030)

對(duì)內(nèi)毒素血癥，革蘭陰性菌敗血癥和革蘭陰性菌感染，早期發(fā)現(xiàn)患者是否合并感染，可進(jìn)行革蘭陰性菌細(xì)胞壁上的內(nèi)毒素檢測(cè)。血漿內(nèi)毒素定量檢測(cè)，對(duì)疾病的嚴(yán)重程度及全身炎癥反應(yīng)水平、預(yù)后，指導(dǎo)臨床使用更合理抗菌方案，也有重要臨床意義。本文對(duì)血漿內(nèi)毒素定量檢測(cè)臨床應(yīng)用進(jìn)行綜合分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 選擇2013年11月至2015年2月我院收治入院患者。其中急性膽管炎患者35例；燒傷患者32例；肝硬化患者36例；對(duì)照組為門診健康體檢者60例。

1.2 方法 用無熱原肝素鈉抗凝真空采血管采集待檢患者靜脈血2ml以上，立即送檢，采用動(dòng)態(tài)濁度法檢測(cè)原理，鱟試驗(yàn)微生物檢測(cè)系統(tǒng)ELx808型上檢測(cè)，嚴(yán)格按操作說明進(jìn)行。鱟試驗(yàn)微生物檢測(cè)系統(tǒng)、鱟試驗(yàn)及配套質(zhì)控品，由廈門鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠有限公司提供。試驗(yàn)所用器皿均去除外源性的細(xì)菌內(nèi)毒素，不宜用搪瓷、不銹鋼類器具，因鐵、鋁離子均可降低內(nèi)毒素活性，產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)果見表1、表2。

表1 各組血漿內(nèi)毒素測(cè)定陽性率統(tǒng)計(jì)

表2 各組血漿內(nèi)毒素測(cè)定水平(±s)

表2 各組血漿內(nèi)毒素測(cè)定水平(±s)

組別 例數(shù) 內(nèi)毒素水平(Eu/ml)急性膽管炎組燒傷組肝硬化組對(duì)照組35 32 36 60 0.2853±0.0967 0.4358±0.0891 0.3043±0.0837 0.0512±0.0206

2.2 以血漿內(nèi)毒素水平0.1Eu/ml標(biāo)準(zhǔn)臨界值。樣本內(nèi)毒素含量≥0.1Eu/ml時(shí)，表明該樣本有細(xì)菌內(nèi)毒素存在，但并不表示該樣本一定存在革蘭陰性菌活菌。病變組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

3 討論

濁度法是根據(jù)內(nèi)毒素與鱟試劑反應(yīng)在形成凝膠過程中的濁度變化進(jìn)行定量檢測(cè)的一種體外實(shí)驗(yàn)方法，具有快速、簡(jiǎn)捷、定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)[1]，克服了凝膠法主觀人為判斷等因素影響，結(jié)果準(zhǔn)確。國內(nèi)臨床應(yīng)用較多的是血液內(nèi)毒素的測(cè)定，方法已比較成熟[2]。

正常人體中檢測(cè)不到或僅有極低水平的內(nèi)毒素。腸道內(nèi)細(xì)菌分解產(chǎn)生大量內(nèi)毒素，在全身炎癥反應(yīng)等情況下，腸道黏膜屏障功能損傷導(dǎo)致腸道內(nèi)毒素通過損傷的腸道黏膜易位入門靜脈至體循環(huán)，產(chǎn)生內(nèi)毒素血癥。內(nèi)毒素/脂多糖(LPS)是革蘭陰性菌外膜的主要成分，已證實(shí)它是介導(dǎo)膿毒癥的主要致病因素之一[3]。

當(dāng)微生物侵入血液迅速繁殖超出機(jī)體免疫系統(tǒng)清除這些微生物的能力時(shí)形成菌血癥或真菌血癥(統(tǒng)稱血流感染)，并可感染血管外組織，屬臨床醫(yī)學(xué)急癥[4]。入侵到人體內(nèi)臟和體循環(huán)的細(xì)菌或細(xì)菌代謝產(chǎn)物包括內(nèi)毒素可被肝臟網(wǎng)狀內(nèi)皮吞噬系統(tǒng)破壞。當(dāng)肝臟功能受損，特別是在肝內(nèi)瘀滯膽紅素、膽汁酸時(shí)，枯否細(xì)胞吞噬滅活內(nèi)毒素功能受到明顯抑制[5]。肝硬化時(shí)內(nèi)毒素血癥發(fā)生率甚高[6]。急性膽管炎時(shí)膽道壓力增高，造成毛細(xì)血管破裂、壞死，膽汁中革蘭陰性菌裂解釋放出的內(nèi)毒素可經(jīng)肝細(xì)胞屏障直接進(jìn)入肝血流而導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥。

燒傷后常伴有感染，尤其是大面積嚴(yán)重?zé)齻?，感染后?xì)菌釋放大量內(nèi)毒素，引發(fā)內(nèi)毒素血癥。

各種疾病都有比較高的檢出率(見表1、表2)，由此提示定量檢測(cè)人血漿中內(nèi)毒素水平有助于明確病情判斷。值得注意的是,抗生素在殺菌的同時(shí)也會(huì)誘導(dǎo)細(xì)菌類毒素的釋放，嚴(yán)重時(shí)將導(dǎo)致炎癥介質(zhì)的大量釋放和級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)，造成組織損傷和器官功能受損害[7]。因此判斷革蘭陽性菌或革蘭陰性菌感染可通過鱟試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素，作為選擇使用更合理抗菌藥物方案，針對(duì)性用藥，防止二重感染。

臨床上，由于多方面因素的影響，血培養(yǎng)陰性結(jié)果并不能排除不存在細(xì)菌感染，而血漿內(nèi)毒素測(cè)定不受體內(nèi)細(xì)菌存活，抗生素的使用等影響，方法簡(jiǎn)便、快捷、有一定的臨床使用價(jià)值。

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