野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片比較研究

林 智，宋 英，唐安玲，張 婧

(1.成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，四川 成都 610072；2.成都中醫(yī)藥大學，四川 成都 610075)

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野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片比較研究

林 智1，宋 英1，唐安玲2，張 婧2

(1.成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，四川 成都 610072；2.成都中醫(yī)藥大學，四川 成都 610075)

目的：對野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片進行比較研究。方法：以蒙花苷和干膏率為評價指標，對野菊花壓制飲片和傳統(tǒng)飲片兩者在單味和五味消毒飲中的煎煮溶出情況進行對比；對壓制飲片和傳統(tǒng)飲片的蒙花苷溶出情況進行對比，進行綜合評價，并繪出溶出曲線。結(jié)果：野菊花壓制飲片外觀形態(tài)良好；在單味飲片和五味消毒飲的煎煮中，壓制飲片干膏和蒙花苷煎出總量均比普通飲片略高；溶出曲線經(jīng)綜合評價比較，壓制飲片與傳統(tǒng)飲片無顯著性差異。結(jié)論：野菊花經(jīng)壓制后未改變藥材的質(zhì)量，不影響野菊花蒙花苷成分的煎煮溶出，定量壓制飲片在一定程度上具有更高的煎煮效率。

野菊花；壓制飲片；傳統(tǒng)飲片；蒙花苷；干膏率

野菊花為菊科植物野菊(ChrysanthemumindicumL.)的干燥頭狀花序，具有清熱解毒疏風平肝之功效， 具有抗病原微生物、治療心血管系統(tǒng)疾病、降低血小板聚集的影響、降壓、免疫、抗炎、抗氧化等作用[1]。野菊花中富含有機酸類、黃酮類、萜類和揮發(fā)油等化學成分[2]，其黃酮類成分蒙花苷是野菊花的重要藥效成分。壓制飲片是一種新技術，可大大縮小飲片體積，適宜機械化生產(chǎn)，有利于后期包裝和調(diào)劑，同時解決了花類、全草類、葉類及部分質(zhì)輕或不規(guī)則飲片因密度小、流動性差、體積大而增加飲片生產(chǎn)、包裝、貯藏、運輸、調(diào)劑等環(huán)節(jié)中存在的困難[3-4]。野菊花為花類藥材，由于密度較小、流動性差，傳統(tǒng)飲片不利于定量包裝和藥房調(diào)劑。五味消毒飲由野菊花、金銀花、蒲公英、 紫花地丁、天葵子組成，源于《醫(yī)宗金鑒》卷七十二，具有清熱解毒、消散疔瘡的功效，臨床主要用于火毒結(jié)聚的癰瘡癤腫。本實驗選用野菊花為研究對象，比較野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片的外觀、煎煮質(zhì)量及有效成分溶出[5-9]，為壓制飲片的質(zhì)量標準研究提供參考。

1 材料

HP 1100高效液相色譜儀(美國惠普公司)，Agilent Chem Station色譜工作站(美國Agilent 公司)；Column.XB，C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm )；BP211D分析天平(德國賽多利斯公司)；LS100型中藥飲片壓制機(成都力士液壓制造有限公司)； 蒙花苷對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111528-200606，純度為98.3%)，野菊花(批號：120710，購自四川省中藥飲片有限責任公司)，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學中藥鑒定學教研室嚴鑄云教授鑒定為菊科植物野菊(ChrysanthemumindicumL.)的干燥頭狀花序，水為重蒸餾水，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片外觀比較

野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片的外觀比較見圖1，由圖1可知，野菊花經(jīng)壓制后，飲片外觀形態(tài)良好，壓縮后體積相對傳統(tǒng)飲片大為減小。

圖1 野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片外觀比較

2.2 蒙花苷含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Column.XB，C18(5μm ，4.6mm×250mm )；流動相：4%冰醋酸-甲醇(50∶50)；流速：1mL/min ；檢測波長：334nm，柱溫：30℃。理論塔板數(shù)按蒙花苷計算不低于3 000。

2.2.2 對照品溶液制備 精密稱取蒙花苷對照品1.33mg，至25mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得(0.052 3mg/mL)。精密稱取蒙花苷1.57mg，置20mL量瓶中，加甲醇至刻度搖勻，即得(0.077 17mg/mL)。

2.2.3 供試品溶液制備 傳統(tǒng)飲片樣品溶液制備：按照處方比例分別稱取野菊花600g、蒲公英200g、紫花地丁400g、金銀花400g、天葵子400g，稱取6份，均分為機器煎煮組與傳統(tǒng)煎煮組。加水10 000mL，浸泡30min，煎煮15min，濾過，藥液定容至6 000mL。定量壓制飲片樣品溶液制備：按照處方比例稱取野菊花(壓制)600g，蒲公英200g，紫花地丁400g，金銀花400g，天葵子400g，稱取6份，均分為機器煎煮組與傳統(tǒng)煎煮組。按上述方法煎煮，藥液定容至6 000mL。分別精密吸取上述樣品溶液1mL，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.2.4 陰性供試品溶液制備 按處方比例稱取除野菊花外其他飲片，按“2.2.3”項下方法制備缺野菊花陰性供試品溶液。

2.2.5 系統(tǒng)適用性試驗 取上述對照品、供試品溶液和陰性供試品溶液，照“2.2.1”項下的色譜條件注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果陰性無干擾，待測峰與其他峰分離度良好，分離度大于1.5，理論塔板數(shù)按蒙花苷峰計算不低于3 000。見圖3。

圖2 蒙花苷對照品、樣品和陰性樣品HPLC圖譜

2.2.6 標準曲線的制備 精密吸取蒙花苷對照品溶液(0.052 3mg·mL-1)1、3、5、7、10μL分別進樣，按“2.2.1”項下的色譜條件注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，以蒙花苷峰面積(Y)為縱坐標，進樣量(X)為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程：Y=1 572.5X-2.757 4(r=1.000 0)。結(jié)果表明，蒙花苷進樣量在0.052 3～0.523 0μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關系。

2.2.7 精密度試驗 取蒙花苷對照品溶液10μL，連續(xù)進樣6次，測定，結(jié)果蒙花苷峰面積的RSD=0.25%(n=6)，表明儀器精密度良好。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10h進樣，記錄峰面積，結(jié)果蒙花苷峰面積的RSD=2.85%(n=5)，表明供試品溶液在10h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.9 重現(xiàn)性試驗 精密吸取樣品液10mL，共6份，按供試品溶液制備方法制備，測定，結(jié)果蒙花苷含量的RSD=1.45%(n=6)，表明該方法重現(xiàn)性良好。

2.2.10 加樣回收率試驗 精密量取已知含量的樣品溶液0.5mL(0.314 2mg·mL-1)至50mL棕色容量瓶中，共6份，分別精密加入蒙花苷對照品(0.077 17mg·mL-1)2mL，加甲醇定容，搖勻。按上述色譜條件測定，測定其含量，并計算蒙花苷的平均回收率和RSD，得出加樣回收率平均值為101.66%，回收率在95%～105%之間，RSD=2.45%，表明該方法加樣回收率較好。

2.4 野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片的煎煮質(zhì)量比較

2.4.1 單味煎煮質(zhì)量比較 (1)供試品溶液制備。傳統(tǒng)飲片樣品溶液制備：分別稱取野菊花傳統(tǒng)飲片600g，分為兩組，分別作為機器煎煮組與傳統(tǒng)煎煮組。加10 000mL水，浸泡30min，機器煎煮組煎煮15min；傳統(tǒng)煎煮組：第1次煎煮保持微沸15min，第2次煎煮保持微沸10min，濾過，濾液分別定容至6 000mL，備用。定量壓制樣品溶液制備：分別稱取定量壓制樣品600g，分為兩組，分別作為機器煎煮組與傳統(tǒng)煎煮組。按上述方法制備定量壓制樣品溶液。供試品溶液制備：精密吸取上述樣品溶液1mL，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密吸取對照品溶液10μL，供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，計算蒙花苷含量。(2)干膏收率測定。精密吸取樣品溶液25mL，置已恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量。

表1 單味煎煮結(jié)果比較

從表1得出：在單味煎煮過程中，定量壓制飲片傳統(tǒng)煎煮方法和機器煎煮方法的煎出效率均高于其壓制前，差異顯著。

2.4.2 五味消毒飲中煎煮質(zhì)量比較 (1) 供試品溶液制備。 按五味消毒飲處方比例稱取藥材，野菊花600g、蒲公英200g、紫花地丁400g、金銀花200g、天葵子400g，其中野菊花分別選取壓制前后飲片，各6份，均分為機器煎煮組與傳統(tǒng)煎煮組。加水10 000mL，浸泡30min，機器煎煮組煎煮15min；傳統(tǒng)煎煮組：第1次煎煮保持微沸15min，第2次煎煮保持微沸10min，濾過，藥液定容至6 000mL。精密吸取上述樣品溶液1mL，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。(2)干膏收率測定。精密吸取樣品溶液25mL，置已恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量。

從表2得出：在五味消毒飲中，定量壓制飲片傳統(tǒng)煎煮方法和機器煎煮方法的煎出效率均高于傳統(tǒng)飲片。

表2 復方煎煮結(jié)果比較

2.4.3 蒙花苷溶出曲線比較 (1)測定方法。傳統(tǒng)飲片樣品溶液制備：分別稱取野菊花傳統(tǒng)飲片200g，加入15倍量水(補加吸水量)，浸泡30min，分別于煎煮5min、10min、15min、20min、30min、40min、50min、60min取樣100mL，并補充水體積，藥液濾過，備用。定量壓制樣品溶液制備：分別稱取定量壓制樣品200g，按上述方法制備定量壓制樣品溶液。供試品溶液的制備：精密吸取上述樣品溶液1mL，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。測定法：精密吸取對照品溶液10μL，供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，計算蒙花苷含量，結(jié)果見表3。(2)不同時間點干膏收率測定。精密吸取煎煮不同時間點樣品溶液各25mL，置已恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量，試驗結(jié)果見表3，溶出曲線見圖3。

表3 溶出曲線結(jié)果

將野菊花壓制飲片與傳統(tǒng)飲片的蒙花苷含量和干膏收率的綜合評分輸入軟件SPSS13.0進行統(tǒng)計分析，結(jié)果得出，不同時間點野菊花壓制飲片煎液中所含蒙花苷含量和干膏收率綜合評分與野菊花傳統(tǒng)飲片差異無顯著性。野菊花經(jīng)壓制后未改變藥材的質(zhì)量，不影響野菊花蒙花苷成分的煎煮溶出，可保證湯劑煎煮質(zhì)量。

3 討論

野菊花傳統(tǒng)飲片與壓制中藥飲片的溶出曲線、單味煎煮、復方煎煮比較結(jié)果表明，在野菊花壓制中藥飲片崩散完全情況下，壓制中藥飲片水煎液中蒙花苷含量及干膏收率與傳統(tǒng)飲片無明顯差異，壓制并不影響野菊花飲片的煎煮，還可以提高溶出效率。野菊花單味藥及五味消毒飲中野菊花壓制后其總干膏、蒙花苷含量均較壓制前略高，溶出率有所提高，可能是由于飲片壓制后，增大了花草葉的比重，使此類中藥較易浸入水中，避免了花草葉的漂浮，有利于浸潤和成分溶出。

圖3 定量壓制飲片與傳統(tǒng)飲片溶出曲線

壓制中藥飲片是用一定的包裝材料封裝，由配方藥師直接調(diào)配無需稱量的一種飲片包裝方式。其在不改變飲片外觀形狀及內(nèi)在質(zhì)量、不添加任何輔料的前提下將飲片壓制成一定形狀。飲片壓制后大大縮小了飲片體積，適宜機械化生產(chǎn)，有利于后期包裝和調(diào)劑，彌補了目前小包裝中藥飲片的不足。

該研究為野菊花壓制飲片質(zhì)量標準的制定奠定了一定研究基礎。

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(責任編輯：宋勇剛)

Comparison between Compressed Pieces and Traditional Pieces ofChrysanthemumindicumL.

Lin Zhi1, Song Ying1, Tang Anling2,Zhang Jing2

(1.Affiliated Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610072，China; 2.Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610075,China)

Objective:To do a comparative study of compressed pieces and traditional pieces of chrysanthemum indicum. Methods:Taking the content of Linarin and dry extract rate as the index,contrast the decoction quality of compressed chrysanthemum indicum pieces with traditional pieces in chrysanthemum indicum decoction and Wuwei Xiaodu Tang; make a comprehensive evalution,and get dissolution curves through the contrast of dissolution of compressed chrysanthemum indicum pieces and traditional pieces.Results:The compressed pieces have a intact appearance;The total dissolved content of linarin and dry extract rate in compressed chrysanthemum pieces were a little higher than traditional pieces in the chrysanthemum indicum decoction and Wuwei Xiaodu Tang. There is no significant difference between the compressed chrysanthemum indicum decoction pieces and traditional pieces through comprehensive evalution of dissolution curves. Conclusion:The quality of chrysanthemum indicum haven’t changed, and the dissolution of linarin haven’t effected after compressed, therefore ,in some ways, the quantitative suppressed traditional Chinese medicine have a higher decocting effiency.

ChrysanthemumindicumL. Compressed Pieces; Traditional Pieces; Linarin;Dry Extract Rate

2014-09-27

四川省科學技術廳科技支撐計劃項目(2011SZ0311)

林智(1984-)，女，成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院中藥師，研究方向為中藥藥劑學。

R283

A

1673-2197(2015)04-0032-03

10.11954/ytctyy.201504015