26例EDTA依賴性血小板減少癥患者的比較分析

摘要：目的 分析EDTA依賴性血小板減少的現(xiàn)象并推測(cè)其原因。方法 對(duì)26例EDTA依賴性血小板減少患者重新采血，手工計(jì)數(shù)血小板（Plt）與白細(xì)胞（WBC），并按時(shí)間梯度上機(jī)檢驗(yàn)Plt與WBC的計(jì)數(shù)變化，同時(shí)檢驗(yàn)其ESR和免疫球蛋白含量。結(jié)果 采血后10 min內(nèi)，上機(jī)檢測(cè)EDTA抗凝血，，其Plt及WBC計(jì)數(shù)結(jié)果與手工法的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），采血30 min以后，儀器法計(jì)數(shù)結(jié)果與手工法的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；對(duì)比健康志愿者，EDTA依賴性血小板減少癥患者的紅細(xì)胞沉降率（ESR）、C-反應(yīng)蛋白、IgG及IgM差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 EDTA依賴性血小板減少癥的發(fā)生可能與患者的血小板、自身抗體及其他個(gè)體因素有關(guān)，做血常規(guī)檢查時(shí)遇到Plt計(jì)數(shù)水平與臨床指征不相吻合時(shí)，需及時(shí)與臨床溝通并復(fù)查，必要時(shí)推片鏡檢計(jì)數(shù)，以避免誤診。

關(guān)鍵詞：EDTA依賴性血小板減少；血小板；白細(xì)胞；紅細(xì)胞沉降率；C-反應(yīng)蛋白

ICSH建議，臨床血常規(guī)檢查計(jì)數(shù)全血細(xì)胞需用EDTA鹽抗凝，肝素、枸櫞酸鹽等抗凝劑均不適用，因此臨床血常規(guī)均采用紫帽EDTA抗凝管來(lái)采集。EDTA依賴性血小板減少癥患者近年來(lái)常見(jiàn)報(bào)道，其發(fā)生已經(jīng)成為臨床Plt計(jì)數(shù)誤診的最主要因素，正常人群中該現(xiàn)象的發(fā)生率為0.09%～0.21%，與免疫系統(tǒng)紊亂密切相關(guān)，但具體原因目前尚不明確[1]。本研究對(duì)26例EDTA依賴性血小板減少癥（EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia，EDTA-PTCP）患者的血常規(guī)進(jìn)行分析，討論其儀器計(jì)數(shù)的Plt和WBC數(shù)量與采樣后標(biāo)本存放時(shí)間的關(guān)系，同時(shí)對(duì)其ESR、C-反應(yīng)蛋白及三個(gè)亞型的血清免疫球蛋白含量進(jìn)行檢測(cè)。

1資料與方法

1.1一般資料 收集2012年9月～2014年6月至我院住院并確認(rèn)為EDTA-PTCP的患者及我院體檢科健康體檢者的資料。EDTA-PTCP組（患者組）共26例，其中男l(wèi)1例，女15例，年齡平均（49±17）歲，健康志愿組共30例，男12例，女l8例，年齡平均（45±16）歲。

1.2儀器和試劑 SYSMEX-XE5000全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀； Beckman Coulter AU2700全自動(dòng)生化分析儀及IgA、IgG、IgM試劑（伊利康速率散射比濁法）；C-反應(yīng)蛋白試劑（西班牙BioSystems）；Olympus公司CHS雙目顯微鏡；血沉儀；EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝管；所有儀器均為原裝配套試劑，儀器室內(nèi)質(zhì)控正常在控，能力驗(yàn)證結(jié)果滿意。

1.3方法 抽取26例EDTA-PTCP患者的清晨空腹靜脈血，按要求注入EDTA-K2及含分離膠試管。EDTA-K2抗凝管立即混勻后分別于5 min、10 min、30 min、60 min、90 min、l20 min進(jìn)行儀器法血常規(guī)檢驗(yàn)。采集患者血液時(shí)，所有26例標(biāo)本分別按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行涂片，通過(guò)顯微鏡鏡檢，選擇有經(jīng)驗(yàn)的主管檢驗(yàn)師計(jì)數(shù)Plt和WBC含量[2]，將其結(jié)果作為參考值。ESR及免疫球蛋白含量的檢測(cè)按對(duì)應(yīng)的SOP文件進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，t檢驗(yàn)比較組間差異，P<0.05為組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1患者組Plt和WBC計(jì)數(shù) 26例EDTA-PTCP陽(yáng)性患者在采血后不同時(shí)間段對(duì)樣品進(jìn)行的儀器法檢測(cè)Plt和WBC計(jì)數(shù)見(jiàn)表1，與手工計(jì)數(shù)相比，5 min與10 min時(shí)上機(jī)檢測(cè)EDTA-K2抗凝血的Plt和WBC計(jì)數(shù)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但30 min及以后的差異逐漸變大（P<0.05）。

2.2 ESR、C-反應(yīng)蛋白及免疫球蛋白檢測(cè)結(jié)果 與對(duì)照組相比，患者組IgG、IgM、C-反應(yīng)蛋白及ESR的檢驗(yàn)結(jié)果明顯高于健康對(duì)照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而IgA的結(jié)果，與對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。

3討論

自O(shè)nder等報(bào)道一例EDTA-PTCP現(xiàn)象后，引起了國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注[3]。EDTA-PTCP是由于EDTA抗凝血在全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上檢測(cè)時(shí)，EDTA鹽誘導(dǎo)血小板聚集、堆積，從而影響血小板計(jì)數(shù)，使血小板計(jì)數(shù)偏低[3]。而EDTA-K2是目前公認(rèn)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)的抗凝劑，已廣泛用于臨床血常規(guī)檢測(cè)?？梢源_定，發(fā)生EDTA-PTCP的原因之一是在EDTA鹽作為抗凝劑的前提下，出現(xiàn)的免疫介導(dǎo)的冷抗血小板自身抗體。究其原因，可能與血小板表面存在的某種隱匿性抗原有關(guān)[4]。

本研究中，隨著采血后時(shí)間的延長(zhǎng)，患者組血小板聚集逐漸加重，儀器法計(jì)數(shù)血小板含量逐步減少，而白細(xì)胞數(shù)在血液采集30 min后明顯升高，其可能原因就是因?yàn)槌霈F(xiàn)了血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)減少，儀器誤認(rèn)為聚集的血小板為白細(xì)胞而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)的增高。在患者組中，血清IgG、IgM的含量相比健康對(duì)照組，有較大增高，ESR，CRP也顯著高于對(duì)照組，因此可以認(rèn)為，患者血清中的免疫球蛋白成分及水平與EDTA-PTCP現(xiàn)象有一定的相關(guān)性。

血常規(guī)是臨床檢查的最基本項(xiàng)目，臨床應(yīng)用非常廣泛。盡管EDTA-PTCP在人群的發(fā)生概率很低，但一旦遇到并忽視此類患者，可能造成誤診，給患者及臨床診治工作帶來(lái)很大困擾。日常工作狀態(tài)下，采血后10 min進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)在平常工作中可能較難實(shí)現(xiàn)，而超過(guò)30 min，血小板計(jì)數(shù)會(huì)減少而白細(xì)胞會(huì)相對(duì)升高，造成檢驗(yàn)結(jié)果的偏差，甚至出現(xiàn)危急值。因此在日常工作中，檢驗(yàn)工作人員必須加強(qiáng)與患者和臨床醫(yī)師的溝通，對(duì)無(wú)任何出血癥狀且Plt直方圖又發(fā)生改變的血小板減少患者，應(yīng)加強(qiáng)人工推片復(fù)檢，通過(guò)手工法計(jì)數(shù)血小板和白細(xì)胞以排除EDTA依賴性血小板減少的干擾。

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編輯/肖慧