TU—1810 SPC紫外可見分光光度計(jì)操作

摘要：TU-1810 SPC紫外可見分光光度計(jì)可分為可見光區(qū)和紫外區(qū)，它們分別以鎢燈和氘燈為光源，波長(zhǎng)范圍也不一樣，不同的分析項(xiàng)目需要的比色皿的材質(zhì)及規(guī)格不一樣。隨機(jī)計(jì)算機(jī)和光度計(jì)開機(jī)后，打開軟件系統(tǒng)，光度計(jì)會(huì)進(jìn)行自檢。該實(shí)驗(yàn)室常用監(jiān)測(cè)使用最多的是定量測(cè)量，定量測(cè)量的最初的參數(shù)設(shè)置是一項(xiàng)細(xì)致的工作，最初的設(shè)置完成以后，日常參數(shù)設(shè)置比較簡(jiǎn)單。標(biāo)準(zhǔn)曲線的設(shè)置和制作非常重要，影響檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度與精確度。光度計(jì)是使用最多最廣的精密分析儀器，對(duì)工作環(huán)境要求嚴(yán)格，維護(hù)和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能有重要作用。

關(guān)鍵詞：紫外可見分光光度計(jì) 開機(jī) 定量測(cè)量 設(shè)置參數(shù) 制作標(biāo)線 工作環(huán)境 維護(hù)和保養(yǎng)

中圖分類號(hào)：TH744 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2015）04（b）-0247-02

紫外可見分光光度計(jì)是分析物質(zhì)對(duì)平行的單色光吸收的精密儀器之一，以定量測(cè)量為主，設(shè)計(jì)以朗伯比耳定律為理論依據(jù)。TU-1810 SPC及TU-1901是準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)。在可見光區(qū)，波長(zhǎng)為320～2500 nm，常用鎢燈（鹵鎢燈）為光源；在紫外區(qū)，波長(zhǎng)為200～375 nm常用氫燈、氘燈為光源。TU1901配置為固定狹縫，光譜帶寬為2 nm。比色皿主要有兩種，分別為玻璃吸收池和石英比色皿。石英比色皿標(biāo)有S的是國(guó)產(chǎn)的，標(biāo)有Q的是進(jìn)口的。在紫外區(qū)須采用石英吸收池，可見光區(qū)一般用玻璃比色皿。比色皿常用的規(guī)格有10.0 mm、20.0 mm、30.0 mm，還有5.0 mm和50.0 mm，較少用到。使用比色皿時(shí)，手持兩側(cè)毛面，嚴(yán)禁捏拿比色皿的透光面，盛放待測(cè)樣品不能超過(guò)容積3/4高度。

1 開機(jī)

（1）打開電腦，Windows完全啟動(dòng)后。

（2）打開分光光度計(jì)電源前確認(rèn)樣品室內(nèi)無(wú)擋光物。

（3）點(diǎn)擊電腦桌面上的UVWIN5軟件后，顯示已聯(lián)接上光度計(jì)，儀器并進(jìn)行自檢初始化，整個(gè)過(guò)程需要4 min左右，在相應(yīng)的各項(xiàng)后顯示“確認(rèn)”，則通過(guò)自檢，進(jìn)入工作界面，儀器必須經(jīng)過(guò)15～30 min的預(yù)熱，穩(wěn)定后再開始測(cè)量。必須先打開光度計(jì)電源，再點(diǎn)擊UVWIN5軟件，否則無(wú)法聯(lián)接。

（4）自檢完畢，出現(xiàn)層疊窗口或垂直排列窗口或水平排列窗口。

2 說(shuō)明

由于該實(shí)驗(yàn)室一般只用到定量測(cè)量，所以在此省略光度測(cè)量、光譜掃描、時(shí)間掃描等的操作。

3 定量測(cè)量

（1）在對(duì)話框上點(diǎn)擊定量測(cè)量，在文件下面點(diǎn)擊打開參數(shù)，點(diǎn)擊參數(shù)子畫框下的參數(shù)設(shè)置，點(diǎn)擊參數(shù)設(shè)置下面的（氨氮、總氮、總磷參數(shù)）設(shè)置具體參數(shù)。

（2）初次的參數(shù)設(shè)置是一個(gè)細(xì)致的過(guò)程，點(diǎn)擊測(cè)量，顯示定量測(cè)量參數(shù)設(shè)置。

①（以TN為例）點(diǎn)擊M測(cè)量，測(cè)量方法（M）：為雙波長(zhǎng)系數(shù)法；主波長(zhǎng)（W）：220.00nm；基線波長(zhǎng)1：275.00nm；系數(shù)（F）：2.000。（以NH3-N為例）測(cè)量方法（M）：為單波長(zhǎng)法；主波長(zhǎng)（W）：420.00nm；樣品編號(hào)下面 標(biāo)準(zhǔn)樣品：標(biāo)準(zhǔn)樣品及標(biāo)準(zhǔn)樣品起始編號(hào)1（輸入數(shù)字）；未知樣品：未知樣品及未知樣品起始編號(hào)1（輸入數(shù)字）；其他下面的重復(fù)測(cè)量及自動(dòng)切換樣品池均打勾，每次測(cè)量重復(fù)（2）。

②點(diǎn)擊M校正曲線，曲線方程：c=f（Abs）；方程次數(shù)（O）：一次；c=k1*（Abs）+k0；輸入數(shù)據(jù)類型點(diǎn)中“濃度”，無(wú)需點(diǎn)中“體積”；濃度單位：mg/L；曲線評(píng)估：無(wú)；“扣除空白”及“零點(diǎn)插入”不能打勾；校正方法：點(diǎn)中“系數(shù)法”，無(wú)需點(diǎn)中“濃度法”，填上K0和K1。

③點(diǎn)擊儀器，顯示設(shè)置儀器參數(shù)：燈狀態(tài)下氘燈及鎢燈皆顯紅色；參數(shù)設(shè)置下的光譜帶寬（S）：2.0 nm；響應(yīng)時(shí)間（R）：0.2秒；換燈波長(zhǎng)：TN361.00 nm，TP及NH3-N3 59.90 nm。

④點(diǎn)擊附件，顯示設(shè)置附件參數(shù)，附件（T）下的“固定樣品池/八聯(lián)池/五聯(lián)池/流動(dòng)池/積分球”中選中“五聯(lián)池”，“復(fù)位（R）”無(wú)需點(diǎn)；空白樣品名（B）：填寫成“空白”；設(shè)置（S）：位置默認(rèn)序號(hào)1，序號(hào)下顯示1～5，類型下全部顯示“樣品”，“樣品名”默認(rèn)為（無(wú)），可以輸入名稱；點(diǎn)擊類型下面的樣品后的倒三角形，顯示“X未使用/樣品/空白”。

⑤點(diǎn)擊M質(zhì)量控制，在“啟用質(zhì)量控制功能（E）”的左邊打勾，質(zhì)量控制（Q）下“濃度/Abs/SD/RSD”中SD和RSD打勾，“全選、反選、清除”可變換；功能（E）；限定上限值（H）、超上限處理（I）、超上限標(biāo)記（F）、下限值（L）、超下線處理（T）、超下線標(biāo)記（G）全部無(wú)需填寫。

⑥點(diǎn)擊M簡(jiǎn)單計(jì)算，在“啟用簡(jiǎn)單計(jì)算（C）”的左邊打勾；鼠標(biāo)移動(dòng)在“計(jì)算公式（E）”中，下面顯示“符號(hào)”，由下面選擇數(shù)字及符號(hào)；計(jì)算單位（U）不用填，再點(diǎn)擊添加（A）；還有功能鍵“修改（M）、刪除（V）、清除（L）”；顯示（S）：點(diǎn)擊倒三角可選擇“公式”或“標(biāo)題”，選中什么主窗口顯示什么，一般來(lái)說(shuō)公式直觀。

⑦完成以上設(shè)置，單擊“確定”鍵退出，保存參數(shù)。

（3）此時(shí)窗口右上角顯示校正曲線圖，右下角顯示參數(shù)：（以12月11日氨氮標(biāo)線為例）光度模式—單波長(zhǎng)，曲線評(píng)估—未知，方程次數(shù)—“一次”，公式—C=k1×（Abs）+k0，校正方法—系數(shù)法，K0—-0.48747，K1—152.62685，R2—0.9998，重復(fù)測(cè)量—2，自動(dòng)切換樣品池—否，質(zhì)量控制—[SD，RSD]，零點(diǎn)插入—否，扣除空白樣品—否，空白值—否。

（4）以比色皿的寬度為準(zhǔn)，設(shè)置樣品池小插片，氨氮比色皿是20.0 mm，放第二格，總氮比色皿是10.0 mm，放第一格，而且必須是石英比色皿，總磷比色皿是30.0 mm，放第三格。

（5）點(diǎn)擊“波長(zhǎng)定位”同一列的“校零”。

（6）當(dāng)波長(zhǎng)定位入NH3=420nm，入TN=

220nm和入TN=275nm，入=700nm的Abs顯示為零時(shí)。

（7）以零樣即空白樣為參比，倒入五個(gè)比色皿的樣品池中。

（8）再一次點(diǎn)擊“校零”。

（9）點(diǎn)擊左下角“ABC√”進(jìn)行空白池校正。

（10）此時(shí)波長(zhǎng)定位同一列的Abs為零。

（11）把待測(cè)樣品倒入樣品池中，點(diǎn)擊開始，可測(cè)出Abs和濃度，此時(shí)比色皿的順序和方向不能改變。

（12）NH3-N由于取樣的體積不一樣，結(jié)果需由濃度分別除以體積而得到。

（13）TN的Abs=A220-2A275得到，TN、TP的結(jié)果可由以下操作得到。

①點(diǎn)擊工具欄的。

②點(diǎn)擊簡(jiǎn)單計(jì)算，再點(diǎn)擊啟用簡(jiǎn)單計(jì)算。

③輸入公式，TN為CONC/2，TP為CONC/5，即濃度/取樣體積。

④點(diǎn)擊添加。

⑤點(diǎn)擊確認(rèn)。

⑥即可在主窗口的最后一列按照四舍五入法得到結(jié)果。

（14）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果保存時(shí)先點(diǎn)擊工具欄的保存。

（15）點(diǎn)擊保存下面的數(shù)據(jù)。

（16）輸入NH3-N、TN、TP的監(jiān)測(cè)日期，保存當(dāng)天數(shù)據(jù)，定量數(shù)據(jù)格式為“.qud”。

（17）點(diǎn)擊退出UVWIN5軟件。

（18）關(guān)掉光度計(jì)電源。

（19）退出UVWIN5軟件。

（20）關(guān)掉電腦電源。

4 標(biāo)線的制作

（1）開機(jī)與測(cè)樣相同。

（2）點(diǎn)擊打開原參數(shù)設(shè)置。

（3）設(shè)置小插片，保留第一個(gè)樣品池，點(diǎn)擊其余4個(gè)點(diǎn)擊右鍵的“X未使用”。

（4）點(diǎn)擊波長(zhǎng)定位同一列的校零。

（5）點(diǎn)擊 顯示定量測(cè)定參數(shù)設(shè)置，

（6）點(diǎn)擊校正曲線下面的曲線評(píng)估下的R2，再點(diǎn)中校正方法下的“濃度法”，再點(diǎn)擊確定。

（7）以零樣為空白，點(diǎn)擊“ABC√”進(jìn)行空白池校正。

（8）在標(biāo)準(zhǔn)樣品表格上，一次一個(gè)樣依次從低濃度到高濃度得到吸光度。

（9）測(cè)定完后輸入對(duì)應(yīng)的濃度。

（10）得到標(biāo)線C=K1*（Abs）+K0的K0和K1 以及曲線相關(guān)R2

（11）點(diǎn)擊 。

（12）點(diǎn)擊校正曲線，點(diǎn)擊系數(shù)法。

（13）輸入K0和K1 。

（14）點(diǎn)擊確定。

（15）點(diǎn)擊文件下的保存參數(shù)。

（16）在參數(shù)設(shè)置下點(diǎn)擊氨氮或總氮或總磷，輸入文件名即可。

（17）點(diǎn)擊保存。

（18）退出UVWIN5。

（19）關(guān)光度計(jì)電源。

（20）關(guān)電腦。

5 測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，未知樣品的測(cè)定

將鼠標(biāo)移動(dòng)到未知樣品測(cè)量表格，放入待測(cè)未知樣品，將鼠標(biāo)移動(dòng)并點(diǎn)中到未知樣品測(cè)量窗口，單擊“開始”，即可測(cè)出樣品濃度。

6 維護(hù)和保養(yǎng)

分光光度計(jì)是精密光學(xué)儀器，正確安裝、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用。

6.1 對(duì)儀器工作條件的要求

（1）儀器應(yīng)放在干燥的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，確保溫度為15 ℃～35 ℃，相對(duì)濕度低于80%。

（2）儀器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的減震臺(tái)上，應(yīng)避免強(qiáng)烈的或持續(xù)的震動(dòng)。

（3）室內(nèi)照明不能太強(qiáng)，且應(yīng)避免日光的直射。

（4）電扇不能直接向儀器吹風(fēng)，以防止氘燈和鎢燈因發(fā)光失去穩(wěn)定而影響儀器的正常使用。

（5）應(yīng)該遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的電場(chǎng)、磁場(chǎng)、及發(fā)射高頻波的電器設(shè)備。

（6）最好配制交流穩(wěn)壓器，保證供給儀器的電壓220±22 V，頻率50Hz±1Hz，單項(xiàng)交流電，功率不小于500 VA，室內(nèi)應(yīng)安裝地線以保證儀器良好接地。

（7）避免在有腐蝕性氣體如硫化氫等的場(chǎng)所使用。

6.2 維護(hù)和保養(yǎng)

（1）對(duì)于強(qiáng)腐蝕、易揮發(fā)的待測(cè)試樣，測(cè)定時(shí)比色皿必須加蓋。

（2）日常使用后應(yīng)檢查樣品室是否有溶液溢出，應(yīng)時(shí)常擦拭樣品室，若比色室中有水樣濺入，需立即用軟棉紗布或?yàn)V紙擦拭干凈，否則廢液會(huì)腐蝕部件和光路系統(tǒng)。

（3）儀器外表面需保持清潔，清理儀器的外表面時(shí)，請(qǐng)勿使用有機(jī)溶劑如乙醇、乙醚等，應(yīng)采用清水擦拭外表面；且應(yīng)每月至少一次進(jìn)行清潔，若長(zhǎng)時(shí)間不使用請(qǐng)加防塵罩。使用結(jié)束，應(yīng)蓋好防塵罩，若室內(nèi)潮濕，可在樣品室及光源室內(nèi)放置硅膠袋，但開機(jī)前一定要取出。

（4）每次使用比色管和比色皿過(guò)后，注意清潔及存放，方便下次取用。

（5）應(yīng)對(duì)儀器性能定期進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)，檢測(cè)周期為1年，使用現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題應(yīng)立即與廠家或銷售部門聯(lián)系，盡快解決。

7 結(jié)語(yǔ)

紫外可見分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室最常用的精密儀器，與電腦聯(lián)機(jī)，需要預(yù)熱，它可以進(jìn)行光度測(cè)量、光譜掃描、時(shí)間掃描等的操作，在此只描述定量測(cè)量的操作。在定量測(cè)量的參數(shù)設(shè)置時(shí)，它的最初設(shè)置是一個(gè)細(xì)致且必要的過(guò)程。最初設(shè)置完畢，進(jìn)行測(cè)量比較簡(jiǎn)單，再有制作標(biāo)線需要準(zhǔn)確操作。光度計(jì)的安裝環(huán)境、使用和保養(yǎng)也至關(guān)重要。以后還可以深入了解紫外可見分光光度計(jì)的系統(tǒng)構(gòu)成、使用原理、測(cè)定過(guò)程偏離的影響因素等。

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