新疆喜鹽鳶尾化學成分預試及薄層色譜分析

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摘要：探討喜鹽鳶尾（Iris halophila）的化學成分，并建立起各萃取部分指紋圖譜。采用植物化學成分系統預試法、薄層色譜分析技術及平面色譜圖像定量法對喜鹽鳶尾化學成分進行分析。結果顯示，喜鹽鳶尾含有生物堿、有機酸、酚類、鞣質、黃酮、蒽醌、皂甙、香豆素、揮發(fā)油及三萜類化合物，不含有強心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中至少含有9、7、9和6種化合物，經與標準品對照，乙酸乙酯相中含有鳶尾苷；各萃取相中相對含量最高的斑點依次為2、5、6和4。喜鹽鳶尾化學成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取部分。喜鹽鳶尾含有豐富的活性成分，具有一定的藥用價值。

關鍵詞：喜鹽鳶尾（Iris halophila）；化學成分；薄層色譜

中圖分類號：S816 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）07-1702-05

喜鹽鳶尾（Iris halophila）是鳶尾科（Iridaceae）鳶尾屬（Iris）多年生草本植物，主要分布于我國新疆、寧夏、甘肅等地，在新疆地區(qū)主要分布于天山北麓[1]。喜鹽鳶尾具有清熱、解毒、利尿、通淋、止血等功效，種子、根、莖均可入藥，而且具有抗旱、抗寒和抗蟲害特性強的特點[2]，其藥用價值已受到中醫(yī)藥行業(yè)的關注。國內外學者已對鳶尾屬植物化學成分進行了大量的研究，發(fā)現鳶尾中含有豐富的次生代謝產物，包括黃酮類、苯醌類、三萜類及二苯乙烯類化合物[3]。目前研究認為鳶尾甙和鳶尾苷元等異黃酮類化合物是其主要活性成分，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗過敏等作用[4]；近期研究發(fā)現其三萜類和苯醌類化合物具有良好的抗癌活性，二苯乙烯類化合物具有較好的自由基清除作用[5]。鳶尾屬植物種類多，分布廣，目前僅對其中少數植物進行了深入研究，喜鹽鳶尾的研究報道較少，尚處于未開發(fā)狀態(tài)，目前缺乏對其化學成分的系統研究。新疆喜鹽鳶尾的資源豐富，深入研究喜鹽鳶尾化學成分及其藥理活性，對喜鹽鳶尾的綜合利用具有重要的理論價值。本試驗通過植物化學成分系統預試、薄層色譜分析、平面色譜圖像定量等技術，對喜鹽鳶尾化學成分進行初步分析，為喜鹽鳶尾活性成分的篩選和薄層指紋圖譜的建立奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及設備

喜鹽鳶尾于2013年6月采集于阿克蘇市拜城縣，由塔里木大學動物科學學院草業(yè)科學學科組鑒定。樣品經陰干、粉碎后保存?zhèn)溆?。鳶尾甙標準品購自中國藥品生物制品檢定所（批號：111632-201201）；薄層層析硅膠GF254（天津光復精細化工研究所）；試驗用水為去離子水。

KQ-400DB型醫(yī)用數控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；4001型旋轉蒸發(fā)儀（德國海道爾夫公司）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（河南鄭州長城科工貿公司）；WD-9403B型紫外儀（北京六一儀器廠）；SCANNER3型薄層掃描儀，定量毛細管（瑞士CAMAG公司）；Direct-Q3型超純水系統（美國Millipore公司）。

1.2 喜鹽鳶尾化學成分預試驗

參考文獻[6]的方法，制備喜鹽鳶尾石油醚提取液、乙醇提取液和水提取液，進行生物堿、黃酮、氨基酸、多酚、皂甙、香豆素、蒽醌、三萜類化合物、甾體、強心甙等化學成分的檢測。參考文獻[7]的方法，對喜鹽鳶尾氰甙和脂肪族硝基化合物進行專項檢測。

1.3 喜鹽鳶尾化學成分薄層色譜分析

稱取喜鹽鳶尾干草粉1 kg，加入5 L乙醇，超聲波輔助提取2 h，過濾，收集提取液。如此重復3次，合并濾液，減壓濃縮得到總浸膏。將總浸膏分散于2倍體積的超純水中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，即得喜鹽鳶尾各極性段萃取部分。將各萃取部分用毛細管取樣，點樣于自制硅膠板，上行法展開，在距薄層板上緣1 cm處取出，揮干展開劑，先在紫外燈下觀察，然后分別用碘蒸汽和體積分數為5%硫酸乙醇顯色，記錄各斑點顏色并計算Rf值。

1.4 喜鹽鳶尾化學成分相對含量測定

利用薄層掃描儀對各萃取相展開、顯色效果最好的薄層板進行分析。采用連續(xù)掃描方式對顯色斑點進行掃描，每個斑點掃描3次，取平均數作為峰面積進行計算。

Xn=■×100%

Xn表示編號為n的斑點的相對百分含量，%；Sn表示編號為n的斑點的峰面積；m表示薄層色譜圖中有m個斑點。

2 結果與分析

2.1 喜鹽鳶尾化學成分預試驗結果

根據喜鹽鳶尾化學成分系統預試驗與單項預試驗的檢測結果可知，喜鹽鳶尾含有生物堿、氨基酸及多肽、皂甙、酚類、鞣質、糖及多糖、黃酮及其苷類、有機酸、蒽醌類、三萜類化合物及甾體、香豆素、揮發(fā)油，不含有強心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。

2.2 喜鹽鳶尾總浸膏的制備及各極性溶劑萃取結果

1 kg喜鹽鳶尾樣品經超聲提取后得總浸膏104.55 g，出膏率為10.5%?？偨嘁来问褂檬兔?、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到4個萃取相浸膏19.22、10.06、20.44和6.37 g，萃取率分別為18.4%、9.6%、19.6%和6.1%。

2.3 喜鹽鳶尾各萃取相薄層色譜分析結果

喜鹽鳶尾石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相各使用5種展開劑展開。由表1可知，石油醚/乙酸乙酯（6∶4，V/V）對石油醚相展開效果最佳，硫酸乙醇顯色呈現9個斑點；由表2可知，氯仿/乙酸乙酯（6∶4，V/V）對氯仿相展開效果最佳，硫酸乙醇和碘蒸汽顯色均呈現7個斑點；由表3可知，乙酸乙酯/乙醇（8∶2，V/V）對乙酸乙酯相展開效果最佳，365 nm波長紫外燈下顯色呈現9個斑點，經與標準品比較，其中Rf值為0.54的黃色斑點為鳶尾苷；由表4可知，氯仿/甲醇（2∶8，V/V）對正丁醇相展開效果最佳，硫酸乙醇顯色呈現6個斑點。

2.4 喜鹽鳶尾各萃取相化學成分相對含量測定結果

選取喜鹽鳶尾各萃取相展開效果最好的硅膠板，顯色后應用薄層掃描儀進行掃描，通過峰面積計算各萃取相斑點的相對含量，測定結果見表5。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中相對含量最高的斑點依次為2、5、6和4。

3 小結與討論

目前，從鳶尾屬植物中分離得到的化合物主要包括黃酮類及其糖苷、苯醌類、三萜類和二苯乙烯類化合物，其中黃酮類和三萜類化合物具有顯著的生物活性。但關于新疆喜鹽鳶尾化學成分的報道較少[8]，本試驗研究發(fā)現喜鹽鳶尾含有黃酮及其苷類、三萜類化合物及甾體，但未見其相關分離鑒定的報道，需進一步研究證實。

薄層色譜技術是一種簡便、快速、微量、結果直觀的分離方法，已廣泛應用于植物化學成分定性分析和快速分離，兼?zhèn)溆屑埳V和柱色譜的優(yōu)點。薄層色譜分析可以初步判定植物中化學成分的種類，也可應用于中藥材及其制劑的真?zhèn)舞b別、質量控制和資源調查等，是目前建立中藥指紋圖譜的常用分析手段。同時，薄層色譜可提供直觀的可見光或熒光圖像，借助于薄層掃描儀可以得到不同層次的圖譜和相應的積分數據，從而對化合物進行相對含量測定。本試驗通過對喜鹽鳶尾各萃取部分薄層色譜分析，其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分各至少含9、7、9、6種化合物；其中黃酮類化合物主要集中在乙酸乙酯部位，與其他鳶尾屬植物的報道結果相吻合[9-11]。與鳶尾苷標準品對照，發(fā)現其中第5個斑點與標準品顯色的顏色和Rf完全一致，初步證明此萃取部分含有鳶尾苷，其他黃酮類成分有待進一步深入研究。通過薄層掃描儀測定，乙酸乙酯萃取相中鳶尾苷相對含量最高，表明喜鹽鳶尾具有較高的藥用價值。

喜鹽鳶尾化學成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取相，其中石油醚萃取相中弱極性化合物種類較多、但相對含量較低；氯仿和正丁醇萃取相中強極性化合物的種類較多，而且相對含量也較高；乙酸乙酯萃取部分強極性化合物相對含量較高，所占比重最大。本試驗對喜鹽鳶尾化學成分進行了初步分析，為喜鹽鳶尾化學成分的進一步研究及其各萃取相指紋圖譜的建立提供依據。同時，還從乙酸乙酯萃取相中發(fā)現了鳶尾苷，為喜鹽鳶尾的藥用研究提供理論基礎。

通過植物化學成分系統預試、薄層色譜分析及平面色譜圖像定量，發(fā)現喜鹽鳶尾含有生物堿、氨基酸及多肽、皂甙、酚類、鞣質、糖及多糖、黃酮及其苷類、有機酸、蒽醌類、三萜類化合物及甾體、香豆素、揮發(fā)油，不含有強心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中至少含有9、7、9和6種化合物，乙酸乙酯萃取相中含有鳶尾苷，其化學成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取部分。

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