不同培養(yǎng)液對大型溞生長與產(chǎn)仔量的影響

魏 杰 吳建民 李榮芳 聶竹蘭*

(1 塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院， 新疆 阿拉爾 843300)(2 塔里木畜牧科技兵團重點實驗室，新疆 阿拉爾 843300)(3 新疆水利廳克孜爾水庫管理局， 新疆 拜城 842300)

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不同培養(yǎng)液對大型溞生長與產(chǎn)仔量的影響

魏 杰1，2吳建民3李榮芳1，2聶竹蘭1，2*

(1 塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院， 新疆 阿拉爾 843300)(2 塔里木畜牧科技兵團重點實驗室，新疆 阿拉爾 843300)(3 新疆水利廳克孜爾水庫管理局， 新疆 拜城 842300)

本試驗采用三種不同的培養(yǎng)液(有機肥浸出液、植物浸出液和酵母液)培養(yǎng)大型溞； 比較大型溞在不同鹽度下的生長指標，篩選出適宜大型溞生長的鹽度。結(jié)果表明，有機肥浸出液培養(yǎng)大型溞效果優(yōu)于植物浸出液與酵母液的培養(yǎng)效果，獲得不同培養(yǎng)液培養(yǎng)下大型溞體長、體寬隨時間增長的回歸方程，明確了大型溞產(chǎn)仔間隔、產(chǎn)仔量及壽命。大型溞可作為新疆土著魚類苗種培育過程中的基礎(chǔ)餌料，為新疆漁業(yè)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

大型溞； 培養(yǎng)液； 生長； 產(chǎn)仔量

大型溞(DaphniamagnaStraus)，屬節(jié)肢動物門(Arthropoda)，甲殼綱(Crustacea)，鰓足亞綱(Branchiopoda)，雙甲目(Diplostraca)，溞科(Daphnidae)，溞屬(Daphnia)，是淡水生態(tài)系統(tǒng)中常見的浮游甲殼類動物。大型溞對毒物十分敏感，是國際標準組織(ISO)公認的實驗動物，廣泛地用于水生生物毒理試驗[2]。大型溞可在實驗室進行分離純化培養(yǎng)[3]，國內(nèi)外學(xué)者報道了大型溞的培養(yǎng)方法[4，3]。此外，大型溞還具有生活周期短、繁殖快、經(jīng)濟節(jié)約、方便易得等優(yōu)點，因此，大型溞是魚、蝦、蟹類苗種培育過程中理想的活餌料，尤其對于新疆地區(qū)土著魚類如塔里木裂腹魚、葉爾羌高原鰍及國家一級保護動物新疆扁吻魚等魚類的苗種培育具有重大的實踐意義。不同的生存環(huán)境會對同一物種造成不同的適應(yīng)，從而導(dǎo)致該物種的生態(tài)習(xí)性會發(fā)生變化，目前尚未檢索到有關(guān)大型溞的新疆地理種群基礎(chǔ)生物學(xué)方面的報道。本文結(jié)合大型溞對鹽度的適應(yīng)性，研究了不同培養(yǎng)液對南疆地區(qū)大型溞生長繁殖的影響，篩選出快速培養(yǎng)大型溞的培養(yǎng)液，以期豐富大型溞的基礎(chǔ)生物學(xué)研究內(nèi)容，并為大型溞的大規(guī)模培養(yǎng)提供基礎(chǔ)理論依據(jù)，為新疆土著魚類的苗種培育提供餌料基礎(chǔ)，為新疆漁業(yè)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

大型溞：用13目的浮游生物網(wǎng)在塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院實驗水產(chǎn)養(yǎng)殖基地的室內(nèi)培養(yǎng)池中撈取枝角類，于實驗室暫養(yǎng)1周。在顯微鏡依照大型溞的生物學(xué)特征[1]，在所采集的枝角類中分離雌性大型溞，并置于5 000mL的玻璃培缸中純化養(yǎng)殖，兩代后，以剛出生的大型溞作為實驗對象。

有機肥浸出液(A)：15g發(fā)酵牛糞、10g肥土和500ml水混勻，靜置半個小時，用紗布過濾；植物浸出液(B)：10g干枯苜蓿及500ml水，僅浸泡一天，第二天使用；酵母液(C)：市售安琪牌高活性干酵母3. 0mg和500ml水混勻，酵母液配制好后須三天內(nèi)用完。

取九支錐形瓶分三組，每組3個重復(fù)，各組分別加入300mlA、B、C培養(yǎng)液，編號A1、A2、A3，B1、B2、B3，C1、C2、C3。每個培養(yǎng)瓶中放入30只當(dāng)天出生的同胎大型溞幼體，放入恒溫培養(yǎng)箱中20 ℃條件下培養(yǎng)。每天13:00取出溞體用測微尺測量體長體寬，發(fā)現(xiàn)溞體懷卵后取出單獨培養(yǎng)，記錄產(chǎn)子時刻與產(chǎn)子數(shù)目及存活時間。實驗過程中，每周換水1次(自來水先曝氣三天，再經(jīng)紗布過濾后換水)。

不同培養(yǎng)液下大型溞體長隨時間增長的回歸方程是:有機肥浸出液y=0. 8912ln﹙x﹚+0. 2481,R2=0. 9517；植物浸出液y=0. 6522ln﹙x﹚+0. 2404,R2 =0. 9459；酵母液y=0. 5333ln﹙x﹚+0. 4901,R2 =0. 9546，見圖2。其中，有機肥浸出液培養(yǎng)大型溞體長增長較植物浸出液及酵母液的高。

不同培養(yǎng)液下大型溞體寬隨時間增長的回歸方程是：有機肥浸出液y=0. 6091ln(x)+0. 153,R2=0. 970；植物浸出液y=0. 652ln(x)+0. 079，R2=0. 919；酵母液y=0. 355ln(x)+0. 219,R2=0. 948，見圖2。其中，有機肥浸出液培養(yǎng)大型溞體寬增長較植物浸出液及酵母液的高。

2.2 不同培養(yǎng)液下大型溞繁殖間隔與產(chǎn)仔量比較

有機肥浸出液、植物浸出液、酵母液3種培養(yǎng)液下，大型溞的平均產(chǎn)仔間隔分別為68. 06h、70. 94h、73. 01h，如圖4所示。

圖1 大型溞的體長與體寬示意圖

2 結(jié)果

2.1 不同培養(yǎng)液下大型溞生長情況

圖2 不同培養(yǎng)液下大型溞的體長增長 圖3 不同培養(yǎng)液下大型溞體寬的增長

圖4 不同培養(yǎng)液下大型溞平均產(chǎn)仔間隔

大型溞平均累計產(chǎn)仔量為61. 2、24. 3、19，如表1所示。

表1 不同培養(yǎng)液下大型溞產(chǎn)仔量比較

2.3 不同培養(yǎng)液下大型溞的壽命比較

有機肥浸出液、植物浸出液、酵母液三中培養(yǎng)液下，大型溞的平均壽命分別為34. 4天、24. 3天、19天。如表2所示

表2 不同培養(yǎng)液下大型溞的壽命比較

3 討論

3.1 大型溞生長的影響因素

大型溞通過蛻殼進行生長，每1～2d蛻一次殼，每蛻一次殼，齡期增長一齡，體長增長一定數(shù)值。從三個增長模型的比較來看，在有機肥浸出液組(A組)培養(yǎng)下的大型溞體長增長最為迅速，而在植物浸出液(B組)和酵母液培養(yǎng)(C組)下的大型溞體長增長較慢，且兩組增長速率相當(dāng)。大型溞在0～10d時體長增長速率最快，而繁殖子代的數(shù)目很少，說明這一時期，大型溞以個體生長為主。在第20d的時候，生長速度漸漸變緩，而A組的大型溞在個體大小要大于其它兩組。A組大型溞的體長最終達到3. 5mm以上，B組、C組最終在2. 5mm左右，根據(jù)宋大祥[4]的研究，Banta培養(yǎng)液(有機肥浸出液)下，大型溞的體長在20-25d時就能達到3. 5mm左右，最終平均體長可達4. 63mm。由于本實驗在冬天進行，表明大型溞的體長增長除了與食物、溫度等相關(guān)外，還與季節(jié)相關(guān)，至于是與氣候還是遺傳有關(guān)，還待進一步研究。不同培養(yǎng)液下大型溞體寬的增長與體長的增長基本保持一致，只是體寬的拐點出現(xiàn)在第15d左右，相比體長的增長提前了5d左右，并且體寬的增長速率明顯低于體長的增長，說明大型溞在生長過程中，體長與體寬的比值在逐漸變大。

另據(jù)王麗娟[5]等人研究，不同食物條件對大型溞總脂含量的影響:母代樣品中大型溞的總脂含量/干重(TL/DW)，魚油+20%酵母組最高(16. 19%)，微囊藻組最低(12. 67%);子一代樣品以及子二代樣品中大型爭溞的總脂含量/干重，均是魚油+20%酵母組最高，分別為22. 94%、23. 87%。本實驗中，酵母液的培養(yǎng)效果較差，說明單獨飼以酵母，對南疆地區(qū)的大型溞培養(yǎng)效果不明顯，可考慮配合魚油進行飼喂。

3.2 影響大型溞產(chǎn)仔量的因素

大型溞的產(chǎn)子間隔在3d左右，但不同培養(yǎng)液下，大型溞的產(chǎn)子間隔存在微小差異，實驗證明，大型溞在有機肥培養(yǎng)液下生長，產(chǎn)子間隔最短。對比表1，A組的平均累計產(chǎn)仔量為62. 2個，遠大于B組和C組的24. 3個和19個，另外，B組和C組還有兩個個體未產(chǎn)子。飼喂酵母液的大型溞繁殖能力最差，可能原因是酵母容易使水質(zhì)變壞，從而影響大型溞的生長繁殖。也可能同培養(yǎng)容器的體積有關(guān)。孟瓊等研究得出，在相同溫度下,大型溞首次抱卵體長隨培養(yǎng)體積的增大而增大[2]。

根據(jù)宋大祥[4]的研究，在20 ℃下，Banta培養(yǎng)液時，大型溞的產(chǎn)子間隔時間平均為79. 2h，累計總產(chǎn)仔量達276. 6個；本實驗中，大型溞在相同溫度，相似培養(yǎng)液培養(yǎng)下，產(chǎn)子間隔為68. 06h，但產(chǎn)子總量卻遠比其少(表1)，說明大型溞額產(chǎn)仔與季節(jié)存在很大的相關(guān)性。

3.3 大型溞壽命的影響因素

不同培養(yǎng)液下大型溞的壽命存在一些差異，其中B組壽命最長，A與B兩組壽命大體相當(dāng)，據(jù)宋大祥[2]的研究，在20 ℃下，Banta培養(yǎng)液下，大型溞的壽命達到了49. 5d，與本研究中A組的數(shù)據(jù)存在一定的差異，可能與大型溞分布的地域性有關(guān)，也可能與季節(jié)及培養(yǎng)方式有關(guān)。

3.4 大型溞對不同鹽度的適應(yīng)情況

大型溞是一種耐鹽性很強的淡水浮游動物，但分布于不同水體的種群對鹽度變化的適應(yīng)能力差別很大。原蘇聯(lián)境內(nèi)大型溞出現(xiàn)的最高鹽度僅為3. 25～6. 55[6]，在澳大利亞大型溞出現(xiàn)的最高鹽度也不過3～5[7]。而在西班牙大型溞是3～10和20～40內(nèi)陸鹽水中重要的浮游動物。國內(nèi)據(jù)宋大祥的試驗[4]，當(dāng)水中氯化物含量達到4～5g/L時,只有少數(shù)個體能勉強生存。宋大祥的試驗用水是以淡水加氯化鈉配制的, 此時的鹽度不會超過6。在晉南和銀川地區(qū)鹽水和超鹽水體中大型溞出現(xiàn)的最高鹽度為13. 6,并以6～12間數(shù)量最高[8-9]。大型溞都生活在具有一定鹽度的水環(huán)境中，對鹽度的變化有一定的適應(yīng)范圍和耐受極限。

在本項目前期試驗中，采用的溫室大棚培養(yǎng)的淡水大型溞耐受的最高鹽度為5～6。由此可以推斷，鹽度為5～6以上的水體不適合大型溞生存。也不適合做大型溞的生殖與人工培養(yǎng)。塔里木河流域的地表水鹽度在2. 25～3. 46,總體屬于淡水水域[10]。新疆的水域總體鹽度低于大型溞的鹽度半致死濃度。所以新疆的水體完全可以進行大型溞的大規(guī)模培養(yǎng)用于生產(chǎn)。

本試驗中，用有機肥浸出液培養(yǎng)大型溞效果最好，在生長速度方面，該組遠大于其他兩組，產(chǎn)子間隔也略小與其他兩組。所以在實際生產(chǎn)中，可考慮用有機肥浸出液進行培養(yǎng)，該方法簡單易行，取材方便，培養(yǎng)簡便，經(jīng)濟實用。根據(jù)項目的前期研究，培養(yǎng)過程中需保持培養(yǎng)液的鹽度在5以下。本實驗表明，不同地域，不同季節(jié)的大型溞，在生長繁殖方面存在差異，而造成差異的原因，差異的內(nèi)在表現(xiàn)形式也是未來研究的一個方向。

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Effect of Different Culture Media on the Growth and Fecundity of Daphnia (Daphniamagna)

Wei Jie1，2Wu Jianmin3Li Rongfang1，2Nie Zhulan1，2*

(1 College of Animal Science, Tarim University, Alar, Xinjiang 843300)

(2 Keylaboratory of Tarum Animal Husbandry Science &Technology, Alar, Xinjiang 843300)

(3 Administration of Kizil Reservoir in Xinjiang Provincial Water Resources Bureau， Baicheng, Xinjiang 842300)

There were three different liquid media (organic fertilizer extract,plant extract and yeast extract) were used in this study to culture Daphnia (DaphniamagnaStraus).Daphniawereculturedindifferentsalinitiesandselectedtheappropriatesalinityforgrowth.TheresultsshowedthattheorganicfertilizerextractwasthehighesteffectivetothegrowthofDaphnia,followingbyplantextractandyeastextract.Herein,theregressionequationofbodylengthandbodywidthovertime,thefarrowinginterval,thefecundityandthelifetimeofDaphniaculturedindifferentculturemediawasobtained.DaphniamagnamaybeimportantfishbaitinrearingfryfishinXinjiangwhichplaysroleinthedevelopmentofXinjiangaquacultureindustry.

DaphniamagnaStraus；culturemedia；growth；fecundity

2014-06-03

塔里木大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(TDZGCX11006)

魏杰(1981-)，男，副教授，碩士，主要從事水產(chǎn)生物餌料培養(yǎng)方面研究。E-mail：weijiedky@126.com

E-mail：niezldky@126.com

1009-0568(2015)02-0006-05

Q

ADOI：10.3969/j.issn.1009-0568.2015.02.002