苯扎溴銨酊處方改進(jìn)及苯扎溴銨的含量測(cè)定

吳海偉王曉青劉皈陽(yáng) 馬建麗

解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院，北京100048

苯扎溴銨酊處方改進(jìn)及苯扎溴銨的含量測(cè)定

吳海偉王曉青▲劉皈陽(yáng) 馬建麗

解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院，北京100048

目的改進(jìn)苯扎溴銨酊處方，并建立容量分析法測(cè)定苯扎溴銨醇溶液（苯扎溴銨酊去除曙紅成分）中苯扎溴銨的含量。方法在建立容量分析法測(cè)定苯扎溴銨的含量時(shí)，發(fā)現(xiàn)曙紅在不同程度上均能影響含量測(cè)定結(jié)果，故將曙紅成分從處方中刪去。采用四苯硼鈉（0.02 mol/L）為滴定液，滴定苯扎溴銨醇溶液中苯扎溴銨的含量。結(jié)果苯扎溴銨酊制劑更改為苯扎溴銨醇溶液，在含量測(cè)定中，滴定終點(diǎn)變化明顯，易于判斷。苯扎溴銨在濃度0.4～1.4 mg/mL的范圍內(nèi)與消耗四苯硼鈉滴定液體積呈良好線性關(guān)系，r=0.9995，回歸方程為V=18.3C-0.32。高、中、低3種劑量苯扎溴銨的平均回收率為99.12%，RSD為0.84%。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確，可作為苯扎溴銨醇溶液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

苯扎溴銨酊；苯扎溴銨；滴定分析法；質(zhì)量控制

苯扎溴銨酊為原《中國(guó)醫(yī)院制劑規(guī)范》[1]收載品種，又名新潔爾滅酊，其主要成分為苯扎溴銨、曙紅等；苯扎溴銨是最常用的表面活性劑之一，具有殺菌、消毒、防腐等作用，為該制劑的藥效成分。原《中國(guó)醫(yī)院制劑規(guī)范》中苯扎溴銨酊的含量測(cè)定方法，亦采用十二烷基硫酸鈉或十二烷基磺酸鈉滴定法，需多次萃取，并作曙紅對(duì)照試驗(yàn)，操作過(guò)程復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，增加了含量測(cè)定誤差；另外，苯扎溴銨酊中所含曙紅成分，其溶液顏色易干擾滴定終點(diǎn)的判斷，因此需建立新的方法測(cè)定苯扎溴銨的含量。苯扎溴銨為同系混合物，非單一成分，含量測(cè)定宜采用容量分析法，其分子式常以烴銨鹽（C22H40BrN）計(jì)；本文擬修改其處方，去除曙紅成分；同時(shí)參考《中國(guó)藥典》（2010年版）[2]苯扎溴銨溶液的含量測(cè)定方法，建立新的容量分析法測(cè)定苯扎溴銨的含量，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

1 儀器與試藥

AE200電子天平（梅特勒托利多有限公司），調(diào)溫電熱套（北京市光明醫(yī)療儀器廠），四苯硼鈉、三氯化鋁（均為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)有限公司），溴酚藍(lán)、氯化鈉（均為北京化學(xué)試劑公司），烴銨鹽滴定液（北京藥檢所），乙醇（北京貞玉民生藥業(yè)有限公司），三氯甲烷（北京化工廠），苯扎溴銨原料藥（太倉(cāng)制藥廠，批號(hào)：120501，純度98%），苯扎溴銨醇溶液（解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院自制，批號(hào)：131206、131219-1、131219-2）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液配制

2.1.1 氫氧化鈉試液的配制稱(chēng)取氫氧化鈉＜40 g，加水溶解至1000 mL，即得。

2.1.2 四苯硼鈉滴定液（0.02 mol/L）的配制及標(biāo)定配制：取四苯硼鈉3.5 g，加水25 mL振搖使溶解，加入新配制的氫氧化鋁凝膠（取三氯化鋁0.5 g，溶于12.5 mL水中，在不斷攪拌下緩慢滴加氫氧化鈉試液至pH 8～9），加氯化鈉8.3 g，充分搖勻，加水125 mL，振搖15 min，靜置10 min，濾過(guò)，濾液中滴加氫氧化鈉試液至pH 8～9，再加水稀釋至500 mL，搖勻。

標(biāo)定：精密量取四苯硼鈉滴定液10 mL，加醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH 3.7）10 mL與溴酚藍(lán)指示液0.5 mL，用烴銨鹽滴定液（0.01 mol/L）滴定至藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。根據(jù)烴銨鹽滴定液（0.01 mol/L）消耗量，計(jì)算本液的濃度，即得。

2.1.3 供試品溶液及儲(chǔ)備液配制稱(chēng)取苯扎溴銨原料藥＜1 g，精密稱(chēng)定，用70%乙醇溶解并稀釋至1000 mL，作為供試品溶液；稱(chēng)取苯扎溴銨原料藥約5 g，精密稱(chēng)定，置250 mL容量瓶中，用70%乙醇溶解并稀釋至刻度，配制成濃度為2%（g/mL）的供試品儲(chǔ)備液。

2.1.4 空白溶液按所測(cè)樣品的處方配制不含苯扎溴銨的溶液。

2.2 含量測(cè)定方法

精密量取本品150 mL，置具塞錐形瓶中，于電熱套內(nèi)85℃加熱，揮棄乙醇。然后冷卻至室溫，加水50 mL與氫氧化鈉試液1 mL，搖勻，加溴酚藍(lán)指示液0.4 mL與三氯甲烷10 mL，用四苯硼鈉滴定液（0.02 mol/L）滴定，將近終點(diǎn)時(shí)必須強(qiáng)力振搖，至三氯甲烷層的藍(lán)色消失，即得。每毫升四苯硼鈉滴定液（0.02 mol/L）相當(dāng)于7.969 mg的C22H40BrN。

2.3 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

取空白溶液，按“2.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明，空白溶液對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)干擾。因此本法測(cè)定苯扎溴銨醇溶液中苯扎溴銨含量的專(zhuān)屬性良好。

2.4 線性關(guān)系考察

精密量取供試品儲(chǔ)備液4、6、8、10、12 mL分別置于200 mL容量瓶中，用70%乙醇稀釋定容至刻度，即得不同濃度的供試品溶液。取上述各濃度供試品溶液150 mL，按“2.2”項(xiàng)下含量測(cè)定法進(jìn)行操作，根據(jù)消耗滴定液的體積（V）對(duì)供試液濃度（C）做線性回歸，苯扎溴銨線性回歸方程為V=18.3C-0.32，r=0.9995；表明苯扎溴銨在濃度0.4～1.4 mg/mL范圍內(nèi)消耗滴定液的體積與濃度線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗(yàn)

分別從同一批供試品溶液中，精密量取150 mL，共6份，按“2.2”項(xiàng)下含量測(cè)定方法進(jìn)行操作，根據(jù)滴定終點(diǎn)，記錄消耗滴定液的體積；根據(jù)消耗四苯硼鈉滴定液的體積計(jì)算RSD為0.41%，結(jié)果表明此含量測(cè)定法的精密度良好。

2.6 回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取一定量苯扎溴銨原料藥（＜相當(dāng)于苯扎溴銨400、500、600 mg），置于500 mL容量瓶中，用70%乙醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻，分別制得濃度為80%、100%、120%的供試品溶液，每個(gè)濃度組平行制備3份。

精密量取上述供試品溶液各150 mL，按“2.2”項(xiàng)下含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)消耗滴定液的量，計(jì)算各濃度水平的回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。本試驗(yàn)四苯硼鈉滴定液的標(biāo)定濃度為0.0194 mol/L，校正因子為0.97。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.7 樣品含量測(cè)定

精密量取本品制劑150 mL（批號(hào)：131206、131219-1、131219-2），按“2.2”項(xiàng)含量測(cè)定方法進(jìn)行操作，根據(jù)消耗四苯硼鈉滴定液的量，計(jì)算每批制劑的含量（每毫升四苯硼鈉滴定液相當(dāng)于7.969 mg的C22H40BrN），結(jié)果見(jiàn)表2。本試驗(yàn)四苯硼鈉滴定液的標(biāo)定濃度為0.0197 mol/L，校正因子為0.985。

表2 三批制劑測(cè)定結(jié)果

3 討論

苯扎溴銨酊處方改進(jìn)：苯扎溴銨酊為原《中國(guó)醫(yī)院制劑規(guī)范》收載品種，原處方組成成分為苯扎溴銨、曙紅、乙醇和水。曙紅是一類(lèi)顏色指示劑，自身并無(wú)藥理活性，其羧基上的鈉離子容易解離，并以陰離子形式存在，能夠與季銨鹽活性基團(tuán)N+形成離子締合物，影響苯扎溴銨的實(shí)際含量。本課題組在建立容量分析法測(cè)定苯扎溴銨的含量時(shí)，發(fā)現(xiàn)曙紅在不同程度上能影響滴定終點(diǎn)的判斷，從而影響含量測(cè)定結(jié)果，使測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。根據(jù)《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》[3]、《中國(guó)藥典》（2010年版）[2]、《中國(guó)人民解放軍醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)范》（2002版）[4]中苯扎溴銨酊或苯扎溴銨醇溶液的含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，溶液反應(yīng)終點(diǎn)顏色變化均不夠明顯，對(duì)滴定終點(diǎn)的判斷存在一定偏差。另外，曙紅在苯扎溴銨酊制劑中的含量為0.004%，是常用量0.0005%～0.001%[5]的4～8倍。

本課題組認(rèn)為，曙紅為苯扎溴銨酊中非必需成分，容量分析法測(cè)定其含量時(shí)，影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，曙紅成分應(yīng)從處方中刪去；征詢(xún)?cè)撝苿┡渲茊挝坏囊庖?jiàn)，也建議取消曙紅成分。去除曙紅成分，苯扎溴銨酊制劑即更改為苯扎溴銨醇溶液，其處方成分更改為苯扎溴銨、乙醇和水，與《中國(guó)人民解放軍醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)范》（2002版）[4]“苯扎溴銨醇溶液”處方一致。

苯扎溴銨醇溶液（原苯扎溴銨酊制劑）的主要成分為苯扎溴銨，也是其主要藥效成分；由于苯扎溴銨為同系混合物，非單一成分，但具有相同的官能團(tuán)結(jié)構(gòu)，故在建立含量測(cè)定方法時(shí)，宜采用容量分析法測(cè)定其含量。目前，文獻(xiàn)已經(jīng)報(bào)道的苯扎溴銨檢測(cè)方法有電位滴定法[6]、紫外分光光度法[7-9]、高效液相色譜法（HPLC）[2，10-15]等，但是由于標(biāo)準(zhǔn)品的限制，在這些檢測(cè)方法中，常使用苯扎溴銨原料藥或供試品代替標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行樣品的含量測(cè)定，實(shí)為不妥。本文建立容量分析法，采用四苯硼鈉滴定液進(jìn)行直接滴定，以消耗滴定液的體積計(jì)算樣品含量，無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品作為對(duì)照，簡(jiǎn)單易行，適合作為苯扎溴銨的含量測(cè)定方法。同時(shí)，參考《中國(guó)藥典》（2010年版）[2]苯扎氯銨的含量測(cè)定方法，測(cè)定苯扎溴銨醇溶液中苯扎溴銨的含量，結(jié)果該方法專(zhuān)屬性也較強(qiáng)，滴定終點(diǎn)變化明顯，易于判斷；但苯扎溴銨的回收率偏低，＜70%，初步判斷溶液中乙醇可能影響苯扎溴銨的含量測(cè)定。亦采用電熱套加熱的方式，對(duì)苯扎溴銨醇溶液進(jìn)行預(yù)處理，除去乙醇，參考《中國(guó)藥典》（2010年版）[2]苯扎溴銨的含量測(cè)定方法，建立四苯硼鈉滴定法測(cè)定苯扎溴銨醇溶液的含量，結(jié)果顯示，該方法專(zhuān)屬性、重復(fù)性較好，準(zhǔn)確度較高，適合作為苯扎溴銨醇溶液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

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Improvement of prescription on Benzalkonium Bromide Tincture and determination of benzalkonium bromide

WU HaiweiWANG Xiaoqing▲LIU GuiyangMA Jianli
The First Affiliated Hospital of PLA General Hospital,Beijing100048,China

Objective To improve prescription of Benzalkonium Bromide Tincture and establish a titration method in determination for content of benzalkonium bromide in Benzalkonium Bromide Alcoholic Solution(eosin was removed from Benzalkonium Bromide Tincture).Methods The content of benzalkonium bromide was detected by setting up capacity analysis method,and found eosin can affect the result of content determination at different degree,therefore eosin composition was removed from the prescription.The content of benzalkonium bromide in Benzalkonium Bromide Alcoholic Solution was detected by titration method with tetraphenylboron sodium volumetric solution(0.02 mol/L).Results Benzalkonium Bromide Tincture changed to Benzalkonium Bromide Alcohol Solution,in content determination,the change of titration end point was obvious and easy to judge.Within the range from 0.4 mg/mL to 1.4 mg/mL,benzalkonium bromide presented a good linear relationship with the consumption volume of tetraphenylboron sodium volumetric solution(r=0.9995),and the equation of linear regression was V=18.3C-0.32.The average recovery of benzalkonium bromide in low,middle and high dose was 99.12%,and RSD was 0.84%.Conclusion The method is simple,fast and accurate,it can be used for the quality control of Benzalkonium Bromide Alcoholic Solution.

Benzalkonium Bromide Tincture;Benzalkonium bromide;Titration analysis;Quality control

R927.2

A

1673-7210（2015）07（c）-0011-03

2015-03-26本文編輯：李亞聰）

軍隊(duì)“十二五”軍隊(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑標(biāo)準(zhǔn)提高科研專(zhuān)項(xiàng)課題面上項(xiàng)目（13ZJZ17-2）。

▲通訊作者