微波法對(duì)銀杏葉黃酮苷提取作用的研究

陳靜穎 谷 燕 黃 維 李 豪

（馬鞍山師范高等專(zhuān)科學(xué)校，安徽 馬鞍山243000）

銀杏是最古老的高等植物之一，是我國(guó)特有的多用途經(jīng)濟(jì)樹(shù)種。銀杏葉中富含黃酮類(lèi)化合物[1-2]，主要由黃酮及其苷、雙黃酮、兒茶素三類(lèi)組成，對(duì)心腦血管疾病有很好的療效[3-4]。因此，銀杏黃酮相關(guān)的功能性食品和藥品等新興產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，帶動(dòng)了我國(guó)的銀杏種值業(yè)，對(duì)于發(fā)展銀杏葉深加工業(yè)也有非常積極的意義。

從銀杏葉中提取黃酮，常用的溶劑有水和乙醇等。水提取法簡(jiǎn)便易行，但提取效率低[5]。乙醇提取產(chǎn)品得率高，但其較高的成本使其應(yīng)用受到一定限制[6]。微波具有加熱快速均勻，高效清潔等的優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)在水解蛋白，提取多酚、多糖有效成分的應(yīng)用已有研究[7-8]。本文將微波應(yīng)用于提取操作，利用正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，為銀杏葉中黃酮類(lèi)物質(zhì)的工業(yè)化生產(chǎn)及其應(yīng)用提供一些參考思路。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

銀杏葉：本地采摘的2-3年成熟葉片；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；其他試劑均為分析純。

微波爐：格蘭仕，MP-70209FW型；離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠，TDL-5-A；干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司，DHG-9620A；722型分光光度計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 工藝流程銀杏葉→清洗切絲→干燥→稱(chēng)重→乙醇水溶液浸潤(rùn)→微波處理→離心→測(cè)定吸光度計(jì)算提取率。1

.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，配置成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入60%乙醇溶液至10ml，再依次加入1ml 5%NaNO2溶液，搖勻、放置5min后加入1ml10%Al(NO3)3溶液，搖勻、放置5min后加入1mol/L NaOH溶液1ml，加60%乙醇定容至刻度，搖勻、放置20min后在500nm處測(cè)定吸光度值。

1.2.3 樣品液中總黃酮的測(cè)定

稱(chēng)取銀杏葉絲5.0g，加入乙醇適量，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)條件下微波輔助提取，過(guò)濾，得到粗黃酮提取液。按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法在500nm下測(cè)定其吸光值，計(jì)算含量，并計(jì)算提取率。

提取液中總黃酮的濃度（mg/ml）×提取液體積（ml）

1.2.4 正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝

選取微波功率、料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)以及提取時(shí)間為主要影響因素，以黃酮類(lèi)化合物提取率為指標(biāo)，按照正交表L9(34)安排實(shí)驗(yàn)(見(jiàn)表1)。

表1 正交因素水平表

1.2.5 與其他方法比較

分別采用水提取法、有機(jī)溶劑（乙醇）提取法和微波（乙醇）提取法對(duì)銀杏葉中黃酮苷進(jìn)行提取，以黃酮類(lèi)化合物提取率為指標(biāo)，比較提取效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

以吸光度值為縱坐標(biāo)，蘆丁濃度（mg/m l）為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A=12.536C-0.0047，R2=0.9995，線性范圍0.02～0.10mg/mL。

2.2 正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝

正交試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。分析可得，影響銀杏葉中黃酮類(lèi)化合物提取率的因素主次順序?yàn)椋何⒉üβ剩疽掖俭w積分?jǐn)?shù)＞微波時(shí)間＞料液比，最佳工藝條件組合是：微波功率680W，料液比1：20，乙醇體積分50%，微波時(shí)間20min。

在此條件下，進(jìn)行4次驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。結(jié)果表明，在正交試驗(yàn)最優(yōu)條件下，黃酮提取率可達(dá)7.89±0.09mg/g。其相對(duì)偏差較小，說(shuō)明優(yōu)化條件重現(xiàn)性良好，結(jié)果真實(shí)可靠。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 與其他方法比較

水提取法、有機(jī)溶劑（乙醇）法和微波（乙醇）法分別對(duì)黃酮類(lèi)化合物的提取率如圖1所示。從圖可知，在三種方法中，微波（乙醇）法的提取率最高，其值達(dá)到水提效率的4倍左右，比單用乙醇提取，效率提高近50%。

圖1 不同方法對(duì)銀杏葉總黃酮提取率的比較A.水提取法；B.乙醇提取法；C.微波提取法

3 結(jié)論

3.1 通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化，得到微波法提取的最佳工藝條件為：微波功率680W，料液比1：20，乙醇體積分?jǐn)?shù)50%，微波時(shí)間20min，提取率可達(dá)7.89mg/g。

3.2 利用水提取法、有機(jī)溶劑（乙醇）提取法和微波（乙醇）提取法對(duì)銀杏葉中黃酮苷進(jìn)行提取，微波法的提取率最高，且能降低提取劑用量。

3.3 利用微波法（乙醇）提取銀杏葉中黃酮苷，其提取率高，節(jié)能環(huán)保，廣泛適用于銀杏類(lèi)功能食品的加工。

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［3］周俊,周德生.天然黃酮類(lèi)化合物對(duì)心腦血管的藥理研究進(jìn)展[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志,2010,8(6)：725-72.

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