非三陰性乳腺癌組織中Ki-67、P 53的表達與臨床病理關系的相關研究

閆婕吳潔郭彥偉柳紫陽陳彬袁軍華

非三陰性乳腺癌組織中Ki-67、P 53的表達與臨床病理關系的相關研究

閆婕1吳潔1郭彥偉2柳紫陽1陳彬1袁軍華1

【摘要】目的 探討非三陰性乳腺癌組織中Ki-67、P 53的表達與臨床病理的關系，為其臨床治療及評估預后提供一定依據。方法 選取我院2011年1月～2015年2月收治的160例非三陰性乳腺癌患者作為研究對象，采用免疫組織化學法檢測乳腺癌組織中Ki-67、P 53的表達情況，將其與臨床病理的關系進行研究和分析。結果 患者左側乳房發(fā)病率高于右側，Ki-67、P 53陽性表達率分別為92.5%、53.75%，Ki-67陽性表達與組織學分級相關，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義，與患者年齡、淋巴結轉移、腫瘤大小及脈管內浸潤情況無關，P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計學意義。P 53陽性表達與組織學分級、淋巴結轉移、腫瘤大小及脈管內浸潤情況相關，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義，與年齡無關，P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計學意義。結論 Ki-67、P 53的表達在非三陰性乳腺癌惡性程度、腫瘤細胞增殖能力的判斷中具有重要意義，可指導非三陰性乳腺癌的治療及判斷預后。

【關鍵詞】非三陰性乳腺癌；Ki-67；P53；臨床病理關系；預后

作者單位：1 839000新疆哈密地區(qū)中心醫(yī)院 2 450000河南省鄭州人民醫(yī)院援疆專家

乳腺癌是嚴重危害女性健康的惡性腫瘤，在中國占全身各種惡性腫瘤的7%～10%。近年來，乳腺癌的發(fā)病率有逐年增多的趨勢。乳腺癌是全身性疾病，在局部腫塊被切除后，相關的后續(xù)治療是非常重要的。對乳腺癌組織進行免疫組化研究，探討各種分子標志物的表達與腫瘤臨床及病理參數，如與年齡、腫瘤直徑、組織學分級、腋窩淋巴結狀態(tài)、脈管浸潤的關系，對后續(xù)治療方案的選擇和評估預后是非常必要的。隨著醫(yī)學發(fā)展，學界普遍認為細胞核增殖抗原Ki-67及P 53基因與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉移具有密切關系[1]。本文選取我院2011年1月～2015年2月160例非三陰性乳腺癌患者，對手術切除的癌組織中Ki-67、P 53蛋白表達進行相關研究。

1　資料與方法

1.1一般資料

收集我院2011年1月～2015年2月收治的160例非三陰性乳腺癌患者的臨床資料，患者均經術后病理診斷為非三陰性乳腺癌?；颊呔鶠榕裕g前均未進行內分泌、放療或化療等治療，均對本研究知情并簽署知情同意書。年齡29～80歲，平均年齡（48.6±2.5）歲。根據WHO乳腺腫瘤組織學分型可將患者分為浸潤性導管癌141例，浸潤性小葉癌5例，導管內癌6例，粘液腺癌8例。根據乳腺癌組織學分級可分為：44例I級，59例II級，57例III級。

1.2方法

經手術切片采集癌組織標本，所有標本均采用濃度為10%的甲醛固定，采用免疫組化SP法進行檢測。標本可采用常規(guī)處理，切片厚度約為4 um，脫蠟后水化，在10 mmol/l枸緣酸中煮沸10 min，保溫10 min。待標本冷卻后滴入鼠抗人Ki 67抗原免疫組織化學單克隆抗體、鼠抗人P 53蛋白免疫組織化學單克隆抗體，抗體均由福建邁新生物有限公司提供。在濕盒中孵育過夜，溫度控制在4℃左右，第二天進行PBS水洗，將加入生物素標記的二抗在室溫下孵育15 min，使用DAB在室溫下顯色十分鐘左右，給予PBS沖洗，在蘇木精復染后進行封片處理。每次實驗均設置陽性對照，采用辣根酶標記鏈霉卵白素作為陰性對照組[2]。

1.3結果判定

細胞核著色棕黃色顆粒表明Ki-67、P 53陽性表達。采用雙人盲法對切片進行觀察，選擇至少5個具有代表性的高倍視野，觀察細胞超過1 000個，計算表達陽性率。根據世界腫瘤會議的共識，Ki-67細胞低于14%為低表達，為陰性，超過14%為高表達，定為陽性。P 53細胞低于25%為陰性，超過25%為陽性[3]。

1.4統(tǒng)計學處理

采用統(tǒng)計學軟件包SPSS19.0進行數據的處理和分析，分別采用%、χ2表示和檢驗計數資料，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1好發(fā)部位

左乳83例，右乳77例，左側乳房發(fā)病率多于右側。

2.2Ki-67、P 53陽性表達結果

免疫組化結果顯示，在非三陰性乳腺癌患者中Ki-67、P 53陽性表達率分別為92.5%及53.75%。

2.3Ki-67、P 53陽性表達與非三陰性乳腺癌臨床病理參數的關系

Ki-67陽性表達與組織學分級相關，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義，與年齡、腋窩淋巴結轉移、腫瘤大小及脈管內浸潤情況無關，P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計學意義。P 53陽性表達與組織學分級、腋窩淋巴結轉移、腫瘤大小及脈管浸潤情況相關，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義，與年齡無關，P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 非三陰性乳腺癌Ki-67、P 53表達與臨床病例參數的關系

3　討論

非三陰性乳腺癌是乳腺癌最常見的組織學類型，死亡率及復發(fā)轉移率與三陰性乳腺癌相比都較低。隨著乳腺癌發(fā)病率在全球范圍內逐漸升高，學者們對乳腺癌的關注程度越來越高，對非三陰性乳腺癌的研究也越來越深入[2]。

Ki-67抗原是增殖細胞中核抗原的一種，也是目前學界公認的腫瘤增殖標志物。相關研究表明，Ki-67抗原與增殖細胞及細胞的有絲分裂相關，可反映腫瘤的增殖活性，在胃癌、結直腸癌、鼻咽癌等多種惡性腫瘤中廣泛存在，陽性表達較高[3]。Ki-67抗原存在于細胞周期各階段，在S期表達增加，至M期到達高峰，在細胞分裂晚期消失，成為檢測腫瘤細胞最可靠的指標。Ki-67抗原表達率的高低對細胞的增殖狀態(tài)、評價腫瘤的生物學行為及危害性具有重要意義。并且，臨床觀察發(fā)現Ki-67高表達的患者對化療更敏感。本研究中，非三陰性乳腺癌患者Ki-67抗原陽性率達92.5%，且與組織學分級密切相關。

P 53是腫瘤抑制基因，可有效控制腫瘤的增殖分化，并參與腫瘤細胞的凋亡過程，對體內代謝、自身穩(wěn)定及消除突變細胞方面具有重要意義。其主要功能在于阻滯細胞周期，誘導細胞凋亡并促進細胞的分化，在突變后造成P 53所編碼蛋白的功能喪失，使其失去了調控細胞凋亡的功能。相關研究數據表明，P 53 在乳腺癌、 胃癌、 結腸癌等惡性腫瘤中呈過度表達，且與腫瘤預后密切相關[4]。本研究中，非三陰性乳腺癌患者P 53陽性表達率為53.75%，且其陽性表達與組織學分級、腋窩淋巴結轉移、腫瘤大小及脈管浸潤情況相關，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義；與年齡無關，P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計學意義。

綜上所述，在非三陰性乳腺癌組織中，Ki-67、P 53蛋白具有明顯高表達，提示Ki-67、P 53蛋白在非三陰性乳腺癌惡性程度、腫瘤細胞增殖能力的判斷中具有重要意義，可作為預后的重要預測因子，也可為治療方案的制定提供一定依據。

參考文獻

[1] 田南南，陳曉蘭，孫國棟，等. T淋巴瘤侵襲轉移有導因子1和Rac GTP酶激活蛋白1在人乳腺癌組織芯片中的表達及意義[J].實用醫(yī)學雜志，2013，29（24）：3974-3977.

[2] 萬春生，何婷玉，劉磊. ER、PR、CerbB-2、P53、Ki-67在乳腺癌中的表達及意義[J]. 中國實用醫(yī)藥，2012，7（11）：4-6.

[3] 陸蘇，劉曉，馮新熠，等. 保乳治療對年輕三陰性乳腺癌患者預后的影響[J]. 中國腫瘤臨床，2015（4）：236-240.

[4] 袁禮，吳煥文，任新瑜，等. 三陰乳腺癌與非三陰乳腺癌臨床病理特征差異及與雌激素受體β和表皮生長因子受體表達的關系[J]. 協和醫(yī)學雜志，2015（1）：1-8.

Study on Non-triple negative Breast Cancer Tissues With Ki-67, P 53 Expression and Clinical Pathological Relationship

YAN Jie1WU Jie1GUO Yanwei2LIU Ziyang1CHEN Bin1YUAN Junhua11 Xinjiang Hami Area Central Hospital, Hami 839000, China 2 Zhengzhou People's Hospital Xinjiang Expert in He’nan Province, Zhengzhou 450000, China

[Abstract]Objective Discuss the relationship between non-triple negative breast cancer tissues with Ki-67 and P 53 expression in breast cancer tissue and clinical pathological, provide reference for the prognosis and treatment. Methods Selected 160 cases with non-triple negative breast cancer from January 2011 to February 2015 in our hospital as the research object, used the immune histochemical method detected expression of P53,Ki-67 in breast cancer tissue, research and study the relationship with clinical pathology. Results Patients’ left breast incidence rate was higher than the right,Ki-67,P53 positive expression rate was 92.5% and 53.75%,the positive expression of Ki-67 is associated with histological grade (P<0.05) had difference statistically significance, and has nothing to patient's age, tumor size, lymph node metastases and vascular infiltration situation, P>0.05, had no difference statistically significance. P 53 positive expression was related to histological grade, lymph node metastasis, tumor size and infiltration, P<0.05, had difference statistically significance,has nothing to do with age P>0.05 had no difference statistically significance. Conclusion Ki-67,P 53 expression in the triple negative breast plays an important role in malignant degree, tumor cell proliferation ability of judgment, guide the triple negative breast cancer prognosis and treatment.

[Key words]Non-triple negative breast cancer, Ki-67, P 53, Clinical pathological relationship, Prognosis

基金項目：新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生廳青年科技人才專項科研項目（2013 Y09）

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.13.028

【文章編號】1674-9308（2015）13-0036-02

【文獻標識碼】B

【中圖分類號】R737.9