疫苗免疫操作規(guī)程

陳 峰 （乾元浩生物股份有限公司 北京 100070）

張日騰 （山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 山東泰安 271000）

免疫是減少特異性疫病感染雞群的較好辦法之一，只有雞群產(chǎn)生足量的針對特異性病原的特異性抗體，才能保證雞群不受這種病原的侵害。規(guī)?；u場一定要根據(jù)本場的疫情和生產(chǎn)實際，制訂適合本場的免疫程序，并嚴(yán)格執(zhí)行。免疫能否成功受多種因素的影響，如疫苗質(zhì)量、免疫時間和免疫途徑等。而實際生產(chǎn)過程中更加難以控制、變數(shù)更多的是免疫操作過程。免疫操作過程涉及到技術(shù)問題和人員管理問題。下面就免疫操作技術(shù)細(xì)節(jié)作一交流。

1 基本要求

（1）免疫接種人員必須經(jīng)過培訓(xùn)達(dá)到技術(shù)要求。熟練、準(zhǔn)確及責(zé)任心強(qiáng)。操作前進(jìn)行人員消毒，并穿戴潔凈的工作服。

（2）免疫前要了解雞群的健康狀況，凡有異常情況的不能免疫或延緩免疫（緊急免疫除外），緊急免疫時先健康后疑似再發(fā)病。要考慮分群、斷喙和大風(fēng)降溫等應(yīng)激因素，免疫前后加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，穩(wěn)定飼養(yǎng)環(huán)境。

（3）免疫前對疫苗進(jìn)行檢查，若有如下情形之一者應(yīng)棄之不用：疫苗瓶破碎或瓶塞松動；瓶內(nèi)有異物或發(fā)霉，沉淀分層的；沒有標(biāo)簽或標(biāo)識缺失的；過期失效的；品種與免疫程序不一致的；未按規(guī)定保存的。

（4）操作流程：

①器械消毒：疫苗免疫注射器、針頭和滴瓶等要事先清洗，并用沸水煮15～30分鐘消毒，切不可用消毒藥消毒，洗衣粉洗滌劑要沖洗干凈。

②油乳劑滅活苗要放到40℃溫水中預(yù)溫到25℃或提前放到雞舍中4～8小時，切不可日曬回溫。

③搖勻：將預(yù)溫的疫苗上下?lián)u動不少于30秒；免疫中要定時進(jìn)行搖勻。

④調(diào)整注射器免疫劑量或滴瓶的免疫劑量，在免疫過程中定時校正。

⑤凍干苗先用2～4mL注射水或稀釋液稀釋疫苗，嚴(yán)禁直接打開瓶蓋造成壓力驟增病原失活，同時檢測真空度（失空的疫苗不能使用，個別進(jìn)口苗除外），飲水免疫時疫苗需在水面下打開瓶蓋。按照免疫劑量和免疫數(shù)量稀釋疫苗（活苗不超過30分鐘），油苗連接注射器各部位和換氣針，并排盡管線中所有空氣，保持密閉無漏氣現(xiàn)象。

⑥選定免疫部位進(jìn)行免疫。

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（5）免疫劑量問題：抗體水平隨免疫劑量的增大稍有升高，但差異不顯著，而機(jī)體向外界散毒時間卻延長了。

（6）做好免疫記錄，完整記錄疫苗品名、接種日期、疫苗批號、有效期、生產(chǎn)企業(yè)、異常記錄和接種者簽名。如多項免疫同時操作時，應(yīng)明確清晰說明標(biāo)識。

（7）接種后應(yīng)留意觀察雞群2-3天，并記錄雞群異常反應(yīng)。

（8）注意事項：

①免疫前后2～3天時間可用抗生素或多維，以減少應(yīng)激反應(yīng)（尤其ILT前后用呼吸道藥）。

②免疫應(yīng)在傍晚或晚上進(jìn)行，減輕應(yīng)激，飲水宜選擇早上進(jìn)行。

③免疫注射時（一要搖勻，二要預(yù)溫），如頸部皮下注射，要注射在頸后方1/3處皮下，切不可注射到頸部肌肉內(nèi)，如注射肌肉則引起雞縮頸、精神不振、采食下降和消瘦等，如注射靠頭部，則引起腫頭。胸肌注射時采用7～9號短針頭（1.27cm，8周前活苗選7號，8周前油苗和8周后選9號），將針頭與注射部位形成15～30°角，朝背部方向刺入胸肌，切忌垂直刺入，以免刺破胸腔損傷內(nèi)臟。腿部外側(cè)淺層肌肉易傷血管、神經(jīng)，慎用。

④凍干苗現(xiàn)用現(xiàn)配，苗不離冰，30分鐘內(nèi)用完。

⑤免疫時每欄更換1次針頭，檢查1次劑量是否準(zhǔn)確。

⑥用過的疫苗瓶及時進(jìn)行消毒，焚燒處理。

2 各種免疫方法的技術(shù)要求

2.1 注射

可分為：腿肌注射：小腿外側(cè)肌肉，淺層胸肌注射，頸部皮下注射，腹股溝皮下注射（也可選翅內(nèi)肌肉、尾部代替）。

頸部皮下：右手握注射器，左手拇指和食指將頸部下1/3處皮膚捏起，右手持注射器向頸后部平行扎入左手拇指和食指提起的皮膚中間，注射正確會感到疫苗充盈，如發(fā)現(xiàn)頸部羽毛變濕，說明打漏了，應(yīng)重新補(bǔ)1針。

腹股溝皮下：一人保定雞只，雞頭向下，腹部向上，另一人自然地把大腿和腹部皮膚捏起，注射在左手拇指和食指提起的皮膚中間。

淺層胸?。菏紫日莆諟?zhǔn)確的注射部位，左手由后向前逆向撥開羽毛按在龍骨兩端，龍骨兩側(cè)上三分之一處，即肌肉豐滿的地方，針頭應(yīng)與胸骨呈15～30°或平行刺入（視肌肉豐滿程度而定）。

注意事項：

①經(jīng)常核對注射器刻度和實際容量的誤差。

②經(jīng)?；蝿右呙缙苛η笠呙缇鶆?。同時防止有空氣進(jìn)入管道。

③注射時將針頭推到位，打出疫苗后緩緩拔出，以免疫苗漏出。

④注射過程要準(zhǔn)確，不宜過深；動作不要粗暴，速度要慢。

2.2 刺種（適用于腦炎雞痘、雞痘、傳貧等）

將接種針充分插入疫苗溶液中（通常10mL專用稀釋液和配套刺種針），待針槽充滿液體后，將針輕靠內(nèi)壁，除去附在針上多余液體。輕展雞翅，將針插入雞翅翼膜內(nèi)側(cè)，避開血管。刺種針勿接觸雞的羽毛（擦掉疫苗）和刺種針上帶一些絨毛（浪費疫苗），每接種1瓶疫苗更換1枚刺種針，不要使用不合適的針接種疫苗，針槽勿向下，免后7天觀察接種部位是否出現(xiàn)結(jié)痂。

注意事項：

①疫苗稀釋后在30分鐘內(nèi)用完，使用中讓疫苗處于冰浴水中，避免手握。

②保證刺種部位無羽毛，防止藥液蘸在羽毛上，造成劑量不足，防止手柄進(jìn)入疫苗造成污染。

③刺種后及時檢查接種部位有無結(jié)痂情況，無結(jié)痂或結(jié)痂較差時及時補(bǔ)免。

④混合好疫苗分裝于小瓶中液面不少于1cm以浸過刺種針細(xì)溝，每刺種1次，都將刺種針在瓶中蘸一下，并經(jīng)常檢查瓶中疫苗液面深度，隨時添加疫苗。

2.3 點眼或滴鼻（適用于新城疫、傳支、傳喉等活苗）

將疫苗用專用稀釋液（蒸餾水或生理鹽水）稀釋分開，通常稀釋液中加著色劑（通常1000份疫苗使用30mL稀釋液），用事先測定好的滴嘴，每滴約25～30μL。自1～2cm的高度滴入雞的眼睛或鼻孔內(nèi)，免疫時滴嘴不得接觸眼球，以免損傷眼睛，不得接觸手、雞等，以免污染疫苗。滴鼻免疫時，用指頭封住一側(cè)鼻孔，以確保疫苗能更好地從另一側(cè)鼻孔吸入。

注意事項：

①疫苗現(xiàn)配現(xiàn)用，在使用過程中保持冰浴，要求1小時內(nèi)用完（含傳支最好控制在30分鐘內(nèi)），稀釋液要保存在低溫室或冰箱中與疫苗基本無溫差。避免高溫（育雛）、全手緊握疫苗瓶或陽光直射疫苗。

②滴入時，把雞頭頸提起，呈水平位置，用手堵住另一側(cè)鼻孔，然后將疫苗滴到眼和鼻內(nèi)，稍等片刻，使疫苗完全吸入鼻或眼內(nèi)，如疫苗液外溢，應(yīng)補(bǔ)滴。滴種過程中，要始終保持滴嘴絕對垂直向下，確保每滴疫苗的接種劑量保持恒定(注意疫苗瓶角度)。

③對反應(yīng)較重的疫苗，如ILT，使用時可在稀釋液中加入1000～2000IU青霉素/mL，或飲水用抗生素，可明顯緩解副反應(yīng)。

④免疫后廢棄物應(yīng)焚燒處理，器具等接觸物要消毒。注意疫苗排毒期的衛(wèi)生消毒工作。

⑤為減小應(yīng)激，建議在晚上或光線較弱的環(huán)境下進(jìn)行。

2.4 噴霧免疫（適用于新城疫、傳支等弱毒苗）

噴霧時將門窗關(guān)閉，停止使用風(fēng)機(jī)，噴霧20～30分鐘后，方可開窗通風(fēng)，雞體有略濕的感覺，1日齡霧滴要大，約80～120μm，噴頭距雞頭高度20～30cm。1000只雞疫苗液體量200～300mL。7日齡以上霧滴要小，約30～50μm，噴頭距雞頭高80～100cm，1000羽疫苗液體量300～500mL（用水量取決于噴霧器類型和型號）。

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注意事項：

①噴霧免疫時，應(yīng)在空氣不流動下進(jìn)行，要關(guān)閉通風(fēng)換氣設(shè)備一段時間后再免疫。開放雞舍要防風(fēng)，窗簾密閉。

②噴霧時，雞舍內(nèi)光線應(yīng)該暗些，雞群對應(yīng)激小、活動弱。使雞群相對集中，最好選擇3：00～5：00（腎上腺素低，歸肺經(jīng)）。

③操作人員要保護(hù)好自己口鼻眼，以防造成傷害，免疫后，要徹底清洗噴霧設(shè)備，內(nèi)外應(yīng)用熱水清洗。

④噴霧免疫的稀釋液禁止使用生理鹽水，應(yīng)用蒸餾水、涼開水。加入6.2mL/L的甘油，霧滴黏附性會更好。

⑤注意雞舍內(nèi)環(huán)境：氣霧免疫時較合適溫度是15～25℃，一般不要在低于4℃情況下進(jìn)行，如果溫度高于25℃，霧滴會迅速蒸發(fā)而不能進(jìn)入雞的呼吸道，在高于25℃環(huán)境下，可以先在雞舍內(nèi)噴水加濕。天氣炎熱時氣霧免疫應(yīng)在早晚涼爽時進(jìn)行，而且舍內(nèi)RH在70%。

⑥氣霧免疫使用劑量應(yīng)加2～3倍，霧滴選擇根據(jù)雞日齡而定。背負(fù)式噴霧器選直徑0.5～0.6mm的噴頭片，霧滴約50μm。

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簡單評鑒：兩米外手臂汗毛上有1～2滴水滴為合理。涂有油脂的玻璃板在30cm處上下移動2次，看霧滴大小均勻情況。

⑦霧滴行為學(xué)：沉降、蒸發(fā)和漂流。

不同霧滴、不同濕度下蒸發(fā)時間（S）：

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2.5 飲水免疫（適用于新城疫、法氏囊等弱毒苗）

免疫前進(jìn)行控水，應(yīng)根據(jù)季節(jié)不同調(diào)整控水時間，天氣較熱時停水1～1.5h，其他季節(jié)2～3h，將凍干苗用稀釋液稀釋，免疫時水中加入0.2%脫脂粉以消除影響免疫因素，夏天飲水免疫應(yīng)在早晨進(jìn)行，這樣疫苗不受高溫的影響。其他季節(jié)可選中午，飲水器必須充足，應(yīng)保證雞群同時能飲到疫苗。

影響飲水免疫的3大因素：

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飲水量取決于雞的日齡。重型雞和天氣炎熱季節(jié)，飲水量取上限標(biāo)準(zhǔn)：

注：使用乳頭飲水器，要排空水線計算水線容水量等。

注意事項：

①飲水免疫前必須將飲水器清洗干凈，水線進(jìn)行沖洗。

②免疫前后24小時內(nèi)禁用一切消毒劑或抗病毒藥。

③飲水器具應(yīng)放陰涼處，避開陽光和熱源。

④夏天選清早進(jìn)行免疫。飲水溫度以18～22℃為宜。

⑤免疫視天氣情況控水，等70%～80%雞只開始尋水時，現(xiàn)配疫苗供水，免疫后30分鐘再喂料和正常供水。

⑥確保所有免疫雞只應(yīng)在2小時內(nèi)飲下足夠的疫苗劑量。

⑦先在水中加入0.2%～0.5%脫脂奶粉或2%～5%脫脂純牛奶，20～30分鐘后再加入疫苗。用清潔的棒攪拌均勻。應(yīng)使用清潔且不含氯和鐵的自來水或雨水。

⑧使用乳頭飲水水線時要選擇嗜腸道型毒株。

⑨可將疫苗分2/3、1/3分2次供水，防止過多雞只漏免。

⑩飲水器具不能使用金屬器具，塑料或搪瓷的且必須潔凈，保證充足飲水位置和2～3cm的水位深度。

2.6 點口、噴料免疫（適用于法氏囊、球蟲等免疫）

（1）原理：疫苗通過經(jīng)口免疫方法將疫苗食入，在消化道內(nèi)繁殖，起到免疫效果。球蟲在消化道內(nèi)繁殖，隨糞便排出體外，再被小雞采食，如此3～4個循環(huán)，就建立起堅強(qiáng)的免疫。

（2）方法：點口如點眼滴鼻一樣，將疫苗滴入口中，待小雞有吞咽動作后，將雞放回原位。

噴料時，按每瓶疫苗用1200mL蒸餾水或涼開水比例稀釋，每瓶稀釋后1200mL疫苗液噴料8kg，將飼料平鋪在地面上，把球蟲疫苗均勻的噴灑在飼料上，來回多噴幾次，攪拌均勻，讓雞在6～8小時內(nèi)采食干凈。

滴口法：將球蟲疫苗用涼水稀釋后倒入滴瓶中，并計算好每一滴中所含球蟲疫苗恰好是1羽份。在滴口過程中要不斷搖動滴瓶以使疫苗均勻，且應(yīng)在較短時間內(nèi)滴完。

噴料法：讓雞只自由采食2小時。該法操作簡單，易掌握。自養(yǎng)場目前多使用此法，應(yīng)注意噴霧及拌料均勻，如不均易造成副反應(yīng)。具體操作方法是：①每瓶疫苗(1000頭份／瓶)用1200mL的涼開水稀釋；②稀釋后的疫苗懸液倒入干凈的農(nóng)用噴霧器中或加壓式噴霧器中；③每1200mL疫苗溶液噴料8kg，把球蟲疫苗均勻地噴在飼料上，來回拌料，噴完后仍需來回拌料，最后用手?jǐn)嚢栾暳?，使之均勻；④將拌有疫苗的料平均分配到每個料盤，讓雞采食。全部吃干凈約4～5小時。注意加拌有疫苗料之前不要刻意斷料，加料前只把料盤中的剩料倒干凈即可，以免“搶食”造成每只雞免疫劑量不均勻。飲水法，讓雞自由采食飲水2小時后實行控水2小時。將球蟲疫苗稀釋在夠雞1～2小時飲完的涼開水中，加入懸浮劑。將疫苗定量分裝飲水器中供雞只自由飲用。

噴霧法：該法常用于孵化室進(jìn)行1日齡苗雞噴霧免疫。

球蟲活疫苗的免疫程序，應(yīng)根據(jù)不同的疫苗廠家、不同的墊料及雞群健康的不同而定。平養(yǎng)雞舍：首次免疫應(yīng)在1～10日齡，1羽份／只。若需轉(zhuǎn)群則可根據(jù)雞群狀態(tài)在轉(zhuǎn)群前作第二次免疫，劑量為首免的1/5羽份。并密切注意雞群，防止免疫失敗或免疫過度。

此外還有浸頭、刷肛和涂毛囊等方法。

我們所用疫苗選擇要合適，病毒毒株的親嗜性和自然感染途徑?jīng)Q定了免疫途徑。毒力先弱后強(qiáng)，與周齡、季節(jié)有關(guān)，血清型、亞型選擇要有針對性。免疫方法、劑量要符合免疫學(xué)原理。

免疫前后藥物使用要注意不能使用影響免疫力產(chǎn)生的藥物。

3 免疫操作輔助動作

免疫效果除了受免疫方法影響外，保定雞只是免疫成功的前提條件。保定雞只為了穩(wěn)定雞只，減少應(yīng)激，保證注射部位準(zhǔn)確。

4周前可以采用單人操作，左手保定，右手操作。頸部皮下注射時，左手拇指和食指將雛雞頸后中部皮膚捏起，使皮膚和肌肉之間形成空窩，右手持注射器向尾部方向刺入皮膚，然后推入疫苗后拔出針頭，手指會感到有疫苗注入的充實感。點眼滴鼻時，用左手將雛雞握于手掌中，用拇指和食指固定雞頭平放，使一側(cè)眼鼻向上，中指堵住下側(cè)鼻孔，右手持點眼瓶將小拇指置于雞頭部定位。點口則雞腹部向上用食指在雞頭后部固定，用拇指置于喙下咽喉部輕壓結(jié)合處使口張開操作。

4周后，建議專人保定專人操作。保定人要求一手抓住雙翅根部，一手抓住2條雞腿跗關(guān)節(jié)以上部位，將雞胸部展開朝向注射人員，注射人員左手從后向前推開羽毛裸露肌肉，并感知肌肉豐滿度，將左手下拇指固定于鎖骨處，右手持針注入胸肌最豐滿處胸肌前三分之一的淺層肌肉中。腿肌注射時，保定人員同樣保定雞只將雞腿部朝向免疫人員，操作者左手握住注射腿部，稍向內(nèi)部扭轉(zhuǎn)并打開羽毛，然后注射小腿上部后外側(cè)肌肉內(nèi)?；\養(yǎng)就簡單一些，注射人員可以左手握住雙腿跗關(guān)節(jié)處固定，右手持針注射。

免疫現(xiàn)場要求根據(jù)實際情況，避免混亂和漏免現(xiàn)象發(fā)生?；\養(yǎng)雞群每籠超過4只情況下必須轉(zhuǎn)籠，不允許原籠內(nèi)操作，否則易漏免和重免。