河北省蛋雞群ALV p27抗原ELISA檢測

張香齋，張艷英，張召興，史秋梅，賈青輝，李蘊(yùn)玉，李佩國

（河北科技師范學(xué)院河北省預(yù)防獸醫(yī)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北昌黎066600）

河北省蛋雞群ALV p27抗原ELISA檢測

張香齋，張艷英，張召興，史秋梅，賈青輝，李蘊(yùn)玉，李佩國

（河北科技師范學(xué)院河北省預(yù)防獸醫(yī)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北昌黎066600）

禽白血?。ˋvian Leukusis，AL）是由反轉(zhuǎn)錄病毒科禽白血病/肉瘤病毒群病毒引起的禽類多種腫瘤性疾病的總稱，可引起感染雞免疫抑制和多組織器官發(fā)育遲緩、萎縮以及腫瘤等，造成雞的生產(chǎn)性能下降甚至死亡，由雞分離的ALV劃分為A、B、C、D、E、J六個(gè)亞群。自2002年蛋雞群發(fā)現(xiàn)禽白血病以來，全國各地頻發(fā)，特別是自2009年以來，湖北、山東等地雞白血病疑似病例頻發(fā)，雞群ALV的感染率高達(dá)60%，病死率高達(dá)50%以上［1］。崔治中報(bào)道，目前A/B亞群、J亞群ALV在中國均存在普遍感染［2］，尤其是致病力較強(qiáng)的J亞群ALV腫瘤發(fā)病率較高，對中國養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大危害。目前沒有疫苗和有效藥物可預(yù)防和治療該病，因此，控制AL的主要方法是通過病原檢測，淘汰陽性雞，凈化種群。為此，作者對在河北省不同地區(qū)蛋種雞場、商品蛋雞場和疑似禽白血病的蛋雞場分別采集樣品，進(jìn)行p27抗原檢測，以了解河北省蛋雞ALV感染及流行現(xiàn)狀，為禽白血病的凈化提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集河北省唐山、保定、石家莊、邢臺、邯鄲等地區(qū)11個(gè)種雞場種蛋2 847枚，9個(gè)商品代蛋雞場商品蛋1 656枚。從秦皇島盧龍、昌黎、山海關(guān)和滄州泊頭等地11個(gè)養(yǎng)雞場分別采集疑似禽白血病的病死雞腫瘤組織（肝臟、脾臟、腎臟）39份。

1.2 試劑禽白血病p27抗原ELISA檢測試劑盒，購自美國IDEXX公司。

1.3 試驗(yàn)方法參照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 種雞場檢測結(jié)果11個(gè)種雞場檢測結(jié)果顯示，有54.5%的雞場檢測出ALV p27抗原陽性樣本，以保定地區(qū)雞場陽性率最高，達(dá)100%（2/2），石家莊、唐山、邯鄲、邢臺等地雞場陽性率分別為66.7%、50.0%、33.3%、0；個(gè)體陽性率差異較大，其中石家莊1號雞場個(gè)體陽性率高達(dá)66.9%（453/677），保定1號、石家莊3號、保定2號、唐山1號、邯鄲2號場陽性率分別為15.2%、13.3%、1.6%、1.3%、1.1%，其余5個(gè)種雞場未檢測到陽性樣品（表1）。

表1 種雞場檢測

2.2 商品代蛋雞場檢測結(jié)果由表2可見，9個(gè)商品代雞場中有4個(gè)雞場檢出p27抗原陽性樣本，陽性率達(dá)44.4%，其中保定地區(qū)雞場陽性率最高，達(dá)100%（2/2），邢臺和石家莊地區(qū)雞場陽性率分別為50.0%、33.3%，邯鄲地區(qū)未檢出；從個(gè)體陽性率分析，保定地區(qū)1號場最高，達(dá)16.8%（31/ 184），邢臺2號、保定2號和石家莊1號場分別為3.3%、2.2%和1.1%，而其他場均未檢測到陽性樣品。

2.3 病死雞腫瘤組織檢測結(jié)果由表3可見，11個(gè)疑似AL蛋雞場中39份被檢樣品中有32份ALV p27抗原陽性，檢出率為82.1%。

表2 商品代蛋雞場檢測

表3 病死雞腫瘤組織樣品檢測

3 討論

目前，國內(nèi)外已經(jīng)建立了許多禽白血病的檢測方法，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、PCR、RT-PCR、原位雜交（ISH）、間接免疫熒光（IFA）等，其中ELISA方法具有操作簡便，成本相對較低，所需時(shí)間短等特點(diǎn)。奚德華等［3］報(bào)道，ELISA是適合規(guī)?；瘷z測且便于推廣應(yīng)用的檢測方法，該方法更適合作為養(yǎng)殖企業(yè)觀察雞群感染ALV程度的監(jiān)測工具以及凈化時(shí)的批量檢測工具。崔治中等［4］、秦愛建等［5］以及陳福勇等［6］均利用ELISA方法檢測p27抗原或各亞群抗體進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。本研究選用ELISA方法對河北省蛋雞場p27抗原進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。

XUBR等［7］首次報(bào)道了國內(nèi)蛋雞骨髓細(xì)胞瘤型J亞群禽白血病病例。楊鳳等［8］報(bào)道山東各品系蛋雞群p27抗原陽性率達(dá)19.36%。白海瑛［9］、楊峰等［10］分別報(bào)道，貴陽、北京等地雞場禽白血病平均感染率分別為27.2%和2.39%。張淼潔等調(diào)查的4個(gè)地區(qū)進(jìn)口雞群中均存在ALV感染［11］。本研究表明，河北省蛋種雞場陽性率較高，達(dá)54.5%（6/11），且不同地區(qū)間雞場陽性率和個(gè)體陽性率差異均較大，其中保定地區(qū)雞場陽性率最高（100%），石家莊1號場的雞個(gè)體陽性率高達(dá)66.9%（453/677），河北省商品代雞場陽性率高達(dá)44.4%（4/9），保定1號場個(gè)體陽性率最高達(dá)16.8%（31/184）。不同地區(qū)、不同雞場間存在較大差異，可能由于不同地域雞場引種來源不同、雞場管理水平不同等原因所致。

羅明星等［12］報(bào)道，貴州省某雞場肝臟樣本的禽白血病病原核酸檢出率達(dá)到91.6%。張康等［13］（2013）對華東北部地區(qū)禽腫瘤病進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，禽白血病在臨床上感染率較高。本研究檢測的秦皇島及滄州等地蛋雞場的39份疑似AL病死雞腫瘤組織（肝臟、脾臟、腎臟）p27抗原陽性率為82.1%（32/39），與上述不同地區(qū)的報(bào)道基本一致。

4 小結(jié)

本研究從種雞場、商品代蛋雞場和疑似病料組織中均檢測到ALV p27抗原陽性樣品，且種雞場陽性率高，表明河北省蛋種雞禽白血病感染情況比較普遍，感染率較高，潛在的流行威脅不容忽視，應(yīng)加強(qiáng)種群凈化，達(dá)到有效防制本病地目的。

［1］高玉龍，邵華斌，羅青平，等.2009年我國部分地區(qū)禽白血病分子流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，32（1）：32-35，43.

［2］崔治中.雞白血病及其鑒別診斷和預(yù)防控制［J］.中國家禽，2010，32（8）：1-12.

［3］奚德華，梁有志，尹麗萍，等.規(guī)模化種禽場禽白血病檢測方法的比較及初步應(yīng)用［J］.中國家禽，2014，36（3）：4-17.

［4］崔治中，郭惠君，孫淑紅.雞白血病的流行現(xiàn)狀和防制對策［J］.中國獸藥雜志，2009，43（10）：37-41.

［5］秦愛建.雞白血病檢測技術(shù)研究［J］.中國家禽，2010，32（7）：34-35.

［6］陳福勇.雞白血病流行病學(xué)調(diào)查和防控措施應(yīng)用［J］.中國家禽，2010，32（7）：32-33.

［7］Xu B R，DongW X，Yu CM，etal.Occurrence of avian leukosis virus subgroupJ in commercial layer flocks in China［J］.Avian Pathol，2004，33（1）：13-17.

［8］楊鳳，孫洪磊，倪偉，等.山東不同品系蛋雞禽白血病流行病學(xué)調(diào)查［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，42（5）：698-703.

［9］白海瑛，殷洪波，曹紅.某種雞場禽白血病血清學(xué)調(diào)查［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008（3）：83.

［10］楊峰，方英，高明琴，等.貴陽地區(qū)禽白血病的血清學(xué)調(diào)查［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2013，37（3）：25-26.

［11］張淼潔，張碩，顧小雪，等.2009-2010年中國部分地區(qū)進(jìn)口雞群禽白血病流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2012，39（2）：200-203.

［12］唐德宏，劉琴，孫瑋瑋，等.泰安地區(qū)不同海藍(lán)褐商品蛋雞群禽白血病的血清學(xué)檢測［J］.中國家禽，2011，33（15）：63-64-67.

［13］張康，龔振華，劉坤，等.華東北部地區(qū)禽腫瘤性傳染病流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國動物檢疫，2013，30（8）：55-57.

S852.65+9.3

B

0529-6005（2015）12-0046-02

2014-04-28

河北省蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（2014553957）；河北省高校百名優(yōu)秀創(chuàng)新人才支持計(jì)劃Ⅱ（13R2-112）；秦皇島市農(nóng)業(yè)科學(xué)院資助項(xiàng)目（2015-15）

張香齋（1970-），女，教授，碩士，主要從事禽類疫病研究，E-mail：zhangxiangzhai@163.com

李佩國，E-mail：lpeiguo@163.com