紅花有效成分抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展*

★ 黃玲玲 傅纓 熊耀斌 資曉飛 (.南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院0級(jí)碩士研究生 南昌0006;.南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院 南昌0006;.江西省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院 南昌0006)

紅花為菊科植物紅花(Carthamus tinctoriusL.)的干燥筒狀花冠，味辛、性溫，入心、肝經(jīng)，有活血通經(jīng)、祛瘀止痛功效?！吨兴幩幚韺W(xué)》明確指出紅花具有抗腫瘤作用［1］。紅花成分多而雜，主要含查爾酮類色素、黃酮類、多糖類、酚酸類、甾體類、脂肪酸及揮發(fā)油等多種活性成分。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)紅花抗腫瘤有效活性成分的研究報(bào)道多為SY、HSYA及SPS，三者的抗腫瘤機(jī)制基本是通過干預(yù)體外培養(yǎng)細(xì)胞以及干預(yù)荷瘤鼠及裸鼠體內(nèi)瘤的作用來(lái)探討。

1 SY、HSYA與腫瘤

大量研究顯示SY是紅花發(fā)揮藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，含有多種成分的水溶性混合物，而HSYA是SY中含量較高的成分，為紅花的代表性活性成分。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)SY、HSYA在抗心腦缺血損傷、肺損傷及抗炎等方面研究較多［2-6］。

1.1 SY、HSYA對(duì)新生血管生成的作用 涂利寬等［7］通過不同濃度的HSYA作用于人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human aortic endothelial cells，HAEC)，發(fā)現(xiàn)HSYA能促進(jìn)HAEC表達(dá)細(xì)胞內(nèi)血小板反應(yīng)蛋白-1(Trombospondin-1，TSP-1)，提示較高濃度HSYA提高TSP-1的表達(dá)，可抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖進(jìn)而減少血管形成。王濟(jì)等［8］發(fā)現(xiàn)HSYA可有效抑制腫瘤上清液刺激后的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，促進(jìn)其凋亡，明顯抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及其含激酶插入?yún)^(qū)受體(KDR)的表達(dá)，并在一定程度上抑制堿性成纖維生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)及其受體的表達(dá)和胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終通過抑制癌基因和轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)達(dá)到抑制腫瘤上清液誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞異常增殖的作用，從而抑制腫瘤新生血管的形成。

1.2 SY、HSYA對(duì)體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞的作用 董文禮等［9］以不同濃度的紅花注射液處理人胃癌SGC-7901細(xì)胞，結(jié)果提示:紅花注射液可抑制SGC-7901細(xì)胞的增殖和遷移，其中以500ml/L劑量組抑制率最高達(dá)44.1%，且可下調(diào)MMP-1蛋白的表達(dá)。李福娟等［10-11］用不同劑量的紅花注射液體外作用于人肝癌HepG-2細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)紅花注射液能夠抑制HepG-2的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，機(jī)制可能是通過下調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Survivin基因轉(zhuǎn)錄及蛋白的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的;進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)紅花注射液可顯著降低HepG-2細(xì)胞AKT、p-AKT蛋白表達(dá)及AKTmRNA表達(dá)，且呈一定的劑量依賴關(guān)系，表明紅花注射液可能通過抑制AKT信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)抑制肝癌細(xì)胞HepG-2的增殖并誘導(dǎo)其凋亡的。

1.3 SY、HSYA體內(nèi)抑瘤作用機(jī)制研究 奚勝艷等［12-14］用人胃腺癌BGC-823移植瘤裸鼠模型，發(fā)現(xiàn)HSYA對(duì)裸鼠皮下移植瘤內(nèi)微血管生長(zhǎng)有抑制作用，其機(jī)制可能與瘤組織內(nèi)VEGF、bFGF蛋白及MMP-9表達(dá)降低有關(guān)，同時(shí)缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)蛋白表達(dá)降低以及KDR蛋白磷酸化減弱及KDR基因表達(dá)降低也與其相關(guān)，表明HSYA抑瘤作用可能是通過多靶點(diǎn)綜合調(diào)節(jié)復(fù)雜的腫瘤細(xì)胞微環(huán)境從而達(dá)到抑制腫瘤血管生成及轉(zhuǎn)移。尹華偉［15］通過建立肝癌H22荷瘤小鼠模型，通過檢測(cè)用藥前后體重變化、抑瘤率、生命延長(zhǎng)率、肝/體比、肺/體比、胸腺及脾臟指數(shù)發(fā)現(xiàn)，SY各劑量組小鼠的一般情況均明顯好于環(huán)磷酰胺組，中劑量組(40mg/kg)抑瘤率最高達(dá)38.86%，表明適當(dāng)濃度的SY對(duì)小鼠H22皮下移植瘤具有明顯的抑制作用，且對(duì)機(jī)體的損傷較環(huán)磷酰胺小。

2 SPS與腫瘤

SPS也是從紅花中提取的有效活性成分，具有抗凝血、抗氧化、抗癌、免疫調(diào)節(jié)等多種功效［16］，近年來(lái)SPS的抗腫瘤作用得到了廣泛的關(guān)注。

2.1 SPS體內(nèi)抑瘤作用機(jī)制研究 石學(xué)魁等［17］發(fā)現(xiàn)SPS對(duì)荷S180肉瘤昆明小鼠體內(nèi)的瘤組織有抑制作用，且對(duì)小鼠肺癌LA795也有抑制作用，可使腫瘤體積明顯減小(P＜0.05);同時(shí)能明顯提高荷瘤小鼠脾CTL細(xì)胞、NK細(xì)胞的殺傷活性(P＜0.05)，由此推測(cè)SPS可能是通過增加荷瘤鼠的CTL、NK細(xì)胞的免疫活性而起作用的。馬新博等［18］觀察不同濃度的SPS對(duì)荷瘤鼠的作用，發(fā)現(xiàn)SPS對(duì)腫瘤組織有明顯的抑制作用，以中劑量組(40mg/L)最為明顯抑瘤率51.33%(P＜0.01);且提高小鼠血清內(nèi)白細(xì)胞介素(IL)-12及腫瘤壞死因子-a(TNF-a)的表達(dá)，降低IL-10的表達(dá)，由此推斷適當(dāng)濃度的SPS可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能而實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。梁穎［19］研究發(fā)現(xiàn)SPS可明顯抑制S180荷瘤鼠腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移，其機(jī)制可能是通過抑制小鼠腫瘤組織內(nèi)的VEGF、CD44、MMP-9、自分泌運(yùn)動(dòng)因子(autocrine motility factor，AMF)mRNA的表達(dá)，降低微血管密度(microvessel density，MVD)，同時(shí)促進(jìn)nm23-H1及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)mRNA的表達(dá)，從而影響腫瘤細(xì)胞的黏附、降解和運(yùn)動(dòng)等多個(gè)環(huán)節(jié)來(lái)抑制腫瘤的的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移。張曉莉等［20］發(fā)現(xiàn)SPS對(duì)T739小鼠Lewis肺癌移植瘤生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)移有抑制作用，SPS各劑量組移植瘤體積、重量及肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)目與對(duì)照組比較差異顯著(P＜0.05)，表明SPS可通過提高荷瘤鼠的自身免疫力來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移。

2.2 SPS體外抑瘤作用機(jī)制研究 馬新博等［21］發(fā)現(xiàn)SPS對(duì)人胃癌SGC-7 901細(xì)胞線粒體膜電位(MMP)有降低作用，同時(shí)抑制細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且有一定的時(shí)間與劑量關(guān)系，表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)Bcl-2 mRNA與蛋白表達(dá)水平均降低，而Bax mRNA和蛋白的表達(dá)水平均升高［22］。陶冀等［23］認(rèn)為SPS可能是通過下調(diào)AKTmRNA的表達(dá)，降低AKT和p-AKT的蛋白的表達(dá)量，抑制AKT通路而發(fā)揮抗腫瘤作用。梁穎等［24-25］通過MTT法及流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，SPS具有抑制人肝癌SMMC-7 721細(xì)胞生長(zhǎng)并可誘導(dǎo)其凋亡，且呈現(xiàn)明顯的時(shí)間與劑量關(guān)系，提示SPS可能是通過調(diào)節(jié)Bcl-2、Bax基因的表達(dá)來(lái)抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的。孫陽(yáng)［26］通過研究發(fā)現(xiàn)SPS對(duì)人肝癌SMMC-7 721細(xì)胞增殖抑制，最佳劑量為0.64mg/mL，細(xì)胞增殖阻滯于G2/M期，細(xì)胞內(nèi)活性氧(Reactive oxygen species，ROS)的產(chǎn)生隨SPS濃度增高而增多，說明SPS可能通過誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生而使細(xì)胞增殖阻滯，進(jìn)而起到抗腫瘤的作用。陶冀［27］實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SPS對(duì)體外培養(yǎng)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞具有明顯的抑制作用，且該作用在一定濃度范圍內(nèi)隨著SPS濃度的升高、時(shí)間的延長(zhǎng)而作用增強(qiáng);并發(fā)現(xiàn)SPS可上調(diào)nm23-H1 mRNA的表達(dá)，下調(diào)MMP-9 mRNA的表達(dá)，且有一定濃度依賴性;通過Western blot法測(cè)得，SPS作用后MCF-7細(xì)胞的MMP-9蛋白表達(dá)水平逐漸降低，而nm23-H1蛋白表達(dá)水平逐漸升高，提示SPS在mRNA與蛋白質(zhì)水平下調(diào)細(xì)胞內(nèi)MMP-9的表達(dá)，上調(diào)nm23-H1的表達(dá)從而起到抑制人乳腺癌作用。陶冀等［28］研究發(fā)現(xiàn)SPS可促進(jìn)人外周血單個(gè)核細(xì)胞(BPMC)及CD+T細(xì)胞的增殖。同時(shí)能促進(jìn)BPMC的IFN-γ、IL-2的分泌量［29］，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能而達(dá)到抗腫瘤作用。

綜上，紅花在我國(guó)資源豐富，其有效成分提取物多為成熟制劑且毒性低，價(jià)格相對(duì)低廉、使用方便，已廣泛使用于心腦血管病的臨床。但基于細(xì)胞癌變過程的復(fù)雜性及藥物分離純化技術(shù)、動(dòng)物荷瘤模型、不同腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)等因素的限制，雖然實(shí)驗(yàn)研究在其抗腫瘤機(jī)制方面取得了一定的進(jìn)展，大多是通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)一系列腫瘤相關(guān)基因與機(jī)體組織內(nèi)各種免疫物質(zhì)相互作用的結(jié)果，仍需進(jìn)一步提純SY、HSYA、SPS或是分離其各種單體，探討其在不同環(huán)境及各種濃度下的抗癌作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供可靠的論據(jù)。

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