二至丸藥理作用研究進(jìn)展*

★ 鄒勇 左錚云 趙海梅 王馨 劉端勇 (.江西中醫(yī)藥大學(xué)0級(jí)碩士研究生 南昌0004;.江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 南昌0006;.江西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 南昌0004;4.江西中醫(yī)藥大學(xué)科技學(xué)院 南昌005)

二至丸出自清代汪昂的《醫(yī)方集解》，又名女貞丹，由女貞子、墨旱蓮等份組成，是平補(bǔ)肝腎之陰的經(jīng)典方劑，隨證加減后不僅可廣泛地運(yùn)用于臨床各科證屬肝腎陰虛的多種疾病的治療，而且由于其毒副作用極低，也常用于緩解各類(lèi)亞健康癥狀，其藥理作用研究日益深入，涉及范圍廣泛。

1 保肝作用

有研究表明，二至丸及其有效組分具有明顯的保肝護(hù)肝作用。通過(guò)小鼠急性肝損傷或體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，二至丸及其70%乙醇洗脫部位活性成分群(AIEP)、乙酸乙酯提取物(EAEP)、水提物(AEEP)和50%乙醇提取物(EFEP)都能降低肝谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)值，同時(shí)降低肝勻漿中丙二醛(MDA)含量和GSH-Px活性，增強(qiáng)超氧化物歧化酶(SOD)活性。由此說(shuō)明，不僅二至丸整方具有良好的保肝護(hù)肝作用，而且其50%、70%乙醇洗脫部位、水提物、乙酸乙酯提取物都可能是其保肝護(hù)肝的活性效應(yīng)部位，其可能的作用機(jī)制是提高肝細(xì)胞抗氧化能力，對(duì)抗細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化，保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的完整性，從而達(dá)到拮抗損害保護(hù)肝臟的作用［1-3］。

2 抗肝纖維化作用

作為肝硬化早期病理基礎(chǔ)，肝纖維化是必經(jīng)環(huán)節(jié)。尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA)、纖溶酶及基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)構(gòu)成的級(jí)聯(lián)反應(yīng)與肝纖維化關(guān)系密切，uPA激活纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶，而纖溶酶在直接降解細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的同時(shí)激活MMP，降解基質(zhì)蛋白，從而抑制纖維化進(jìn)程［4］。安德明等［4］采用膽管結(jié)扎法復(fù)制膽汁淤積性肝纖維化大鼠病理模型并用二至丸進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果表明二至丸可明顯減低肝纖維化大鼠血清ALT，AST，ALP及TBIL等肝功能水平，同時(shí)治療組大鼠肝組織中MMP-2、MMP-9水平及uPA表達(dá)顯著升高，表明二至丸對(duì)對(duì)肝纖維化具有的防護(hù)作用可能與通過(guò)上調(diào)uPA、MMP-2、MMP-9，從而調(diào)控uPA-纖溶酶-MMP級(jí)聯(lián)纖溶途徑有關(guān)。

3 增強(qiáng)免疫

免疫的主要目的在于“防御”，既排除外來(lái)病原微生物，又排除自身免疫復(fù)合物，其主要執(zhí)行器官包括胸腺、脾臟、淋巴結(jié)、粘膜系統(tǒng)等，目前研究表明，二至丸調(diào)節(jié)免疫的功能主要與干預(yù)免疫執(zhí)行器官的功能有關(guān)。王進(jìn)進(jìn)等［5-6］用二至丸治療環(huán)磷酰胺致免疫低下小鼠發(fā)現(xiàn)，在升高胸腺指數(shù)、脾指數(shù)同時(shí)，胸腺髓質(zhì)生發(fā)中心明顯增多。姚干等［7］發(fā)現(xiàn)二至丸給藥干預(yù)后可明顯提高免疫力低下小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖能力、腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，以及白介素-1、白介素-2和白介素-12的水平，表明二至丸調(diào)節(jié)免疫平衡可能與其改善T淋巴細(xì)胞因子及其mRNA表達(dá)水平有關(guān)。結(jié)合早年發(fā)現(xiàn)女貞子、墨旱蓮系列提取物及其組合物可促進(jìn)小鼠外周血、脾淋巴細(xì)胞增殖和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。由此可以推斷二至丸調(diào)控免疫功能可能與改善胸腺、脾臟狀態(tài)、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞有關(guān)，從而較好地恢復(fù)免疫力低下機(jī)體的非特異性和特異性免疫功能。

4 降血脂

血脂異常是很多疾病的發(fā)病基礎(chǔ)，調(diào)控血脂水平是當(dāng)今醫(yī)療保健的主要任務(wù)之一，徐進(jìn)文等［8］用加味二至丸高、低劑量治療卵巢切除所致更年期模型小鼠發(fā)現(xiàn)該小鼠血清甘油三酯水平、糖耐量曲線下面積及30、60、90min時(shí)間點(diǎn)血糖水平顯著降低，同時(shí)P65蛋白表達(dá)降低，提示加味二至丸可能通過(guò)降低脂肪組織胞核中P65蛋白的表達(dá)，從而起到降低血清甘油三酯水平并改善小鼠糖耐量的作用。

5 改善缺鐵性貧血

陳育等［9］發(fā)現(xiàn)加味二至丸能夠促進(jìn)缺鐵性貧血模型大鼠對(duì)鐵的吸收利用，明顯提高模型大鼠紅細(xì)胞(Rbc)、血紅蛋白(Hb)、血清鐵蛋白(SF)及全血鐵含量，降低紅細(xì)胞內(nèi)游離原(PEP)的作用。也有人發(fā)現(xiàn)［10］加味二至丸可提高缺鐵性貧血大鼠IL-2水平，降低IL-6表達(dá)，提示加味二至丸改善貧血狀態(tài)可能通過(guò)促進(jìn)鐵的吸收和改善造血系統(tǒng)細(xì)胞因子分泌有關(guān)。

6 抗骨質(zhì)疏松

骨質(zhì)疏松癥屬于一種全身性骨骼系統(tǒng)疾病，主要表現(xiàn)為骨量減少、骨組織微觀結(jié)構(gòu)退化，最終導(dǎo)致骨脆性增加和骨折危險(xiǎn)性增加。程敏等［11］發(fā)現(xiàn)二至丸含藥血清能明顯增加大鼠原代成骨細(xì)胞ALP活性和礦化結(jié)節(jié)數(shù)量，表明二至丸具有良好的促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、分化、礦化作用。孫為等［12］用中藥復(fù)方二至丸(EZW)對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥大鼠下頜骨微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，二至丸治療12周后，下頜骨體積骨密度、骨小梁數(shù)量、骨小梁厚度、骨小梁連接度及結(jié)構(gòu)模型指數(shù)較OVX組有明顯上升，反之骨小梁分離度出現(xiàn)明顯下降。二至丸組中Wnt3a，lrp5，β-catenin的mRNA表達(dá)明顯上升，提示中藥復(fù)方二至丸對(duì)絕經(jīng)后大鼠模型下頜骨的骨質(zhì)疏松具有防治作用，其作用機(jī)制與Wnt3a/lrp5/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路有關(guān)。

7 抗衰老

衰老是機(jī)體發(fā)育的必然過(guò)程，與過(guò)度氧化和血液粘稠度增加等有密切關(guān)系。汪曉燕［13］發(fā)現(xiàn)二至丸水提液可導(dǎo)致線蟲(chóng)平均壽命延長(zhǎng)10.6%，最大壽命延長(zhǎng)16.2%，提示二至丸具有較好的抗衰老作用。張喆等［14］采用二至丸治療D-半乳糖所致衰老大鼠，結(jié)果二至丸各治療組較模型對(duì)照組血清過(guò)氧化物酶(POD)活活性顯著提高，脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)含量含量明顯降低，提示二至丸能夠提高機(jī)體的抗氧化能力，從而延緩機(jī)體的衰老進(jìn)程。池鳳好等［15］還發(fā)現(xiàn)口服二至丸加味方及外用加入透皮吸收劑的二至丸加味方高劑量后，組織中SOD、GSH-PX酶活力增強(qiáng)，MDA減少，且呈劑量依賴(lài)，說(shuō)明二至丸可能通過(guò)抗氧化作用來(lái)實(shí)現(xiàn)延緩衰老作用。

8 抑制腫瘤生長(zhǎng)

近年來(lái)，二至丸抑制腫瘤生長(zhǎng)方面的研究取得較好的進(jìn)展，如趙益等［16］用二至丸含藥血清與肝癌細(xì)胞BEL-7402、肺癌細(xì)胞A549分別聯(lián)合培養(yǎng)48h后，發(fā)現(xiàn)兩種癌細(xì)胞抑制率升高，提示二至丸具有較好的抑制腫瘤生長(zhǎng)作用。在體研究方面，尚廣彬等［17］用二至丸干預(yù)二甲基苯蒽(DMBA)誘發(fā)性乳腺癌大鼠發(fā)現(xiàn)，其中劑量組大鼠乳腺腫瘤平均潛伏期延長(zhǎng)，平均腫瘤直徑、平均腫瘤體積、平均瘤重顯著降低，且二至丸中、高劑量組VEGF和MMP-9強(qiáng)陽(yáng)性率顯著性降低，提示二至丸可能通過(guò)干預(yù)乳腺癌組織中VEGF和MMP-9的表達(dá)，抑制乳腺癌生長(zhǎng)惡化。這些都提示二至丸具有較好的抗腫瘤作用，但其作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

此外，二至丸還有降血糖、抗疲勞、抗血栓等作用［18］。二至丸具有廣泛的藥理作用，根據(jù)其藥理作用的不同，可在臨床多科室使用，同時(shí)具有毒副作用極小、臨床療效理想、費(fèi)用低等特點(diǎn)。因此，二至丸開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景十分廣闊。然而目前二至丸相關(guān)藥理研究主要任務(wù)還是驗(yàn)證二至丸的功效，其作用機(jī)制研究還不夠深入，很多作用機(jī)制、靶點(diǎn)及部位還不明確。因此，建議加強(qiáng)二至丸藥代動(dòng)力學(xué)及代謝組學(xué)的研究，使二至丸作用機(jī)制研究更加系統(tǒng)和深入。

［1］閆冰，蔡秀江，姚衛(wèi)峰，等.二至丸保肝活性成分群對(duì)四氯化碳致小鼠急性肝損傷保護(hù)作用研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2012，37(9):1 303-1 306.

［2］閆冰，李黎，陳星，等.二至丸的保肝活性部位群對(duì)四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(1):216-219.

［3］聶映，姚衛(wèi)峰.二至丸對(duì)乙醇誘導(dǎo)的大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2014，20(12):153-156.

［4］安德明，鄭培永，季光.不同治則中藥復(fù)方對(duì)膽汁淤積性肝纖維化大鼠尿激酶型纖溶酶原激活劑的影響［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2009，16(5):31-34.

［5］王進(jìn)進(jìn)，奚香君，王頔，等.二仙湯與二至丸對(duì)小鼠生殖內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用的比較研究［J］.江蘇中醫(yī)藥，2013，45(8):73-75.

［6］張永寧，袁麗超，佟書(shū)娟，等.二至丸、地黃煎影響小鼠免疫功能的研究［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18(8):159-162.

［7］姚干，王允，劉毅，等.二至丸有效部位群促進(jìn)T淋巴細(xì)胞免疫活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中成藥，2014，36(3):441-446.

［8］徐進(jìn)文，許潔安，李潤(rùn)美，等.加味二至丸對(duì)卵巢切除小鼠的影響［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，30(3):367-371.

［9］陳育.加味二至丸對(duì)缺鐵性貧血模型大鼠鐵吸收利用影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，33(4):144-145.

［10］吳曉勇，陳育，畢蓮.加味二至丸對(duì)缺鐵性貧血大鼠IL-2、IL-6的影響［J］.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，30(6):18-19.

［11］程敏，王慶偉，劉雪英.二至丸含藥血清對(duì)成骨細(xì)胞增殖分化及礦化的影響［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24(7):1 555-1 557.

［12］孫為，晏奇，施斌.二至丸對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥大鼠下頜骨微結(jié)構(gòu)及Wnt經(jīng)典信號(hào)通路的影響［J］.中國(guó)口腔種植學(xué)雜志2013，18(2):104-105.

［13］汪曉燕.滋補(bǔ)肝腎-行氣活血類(lèi)中藥延緩線蟲(chóng)衰老的作用及分子機(jī)制研究［D］.北京:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院，2010.

［14］池鳳好，陳媛媛，范瑞強(qiáng).二至丸加味方對(duì)D-半乳糖所致衰老大鼠皮膚自由基的影響.廣東醫(yī)學(xué)，2008，29(12):1 950-1 951.

［15］張喆，高長(zhǎng)玉，韓偉麗，等.二至丸對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)衰老模型大鼠血清POD活性、LPO含量影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2013，41(6):79-81.

［16］趙益，羅蓉，尚廣彬，等.二至湯含藥血清對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制作用的研究［J］.新中醫(yī)，2013，45(4):156-159.

［17］尚廣彬，曾莉萍，趙益，等.二至丸對(duì)誘發(fā)性乳腺癌組織中VEGF和MMP-9表達(dá)的影響［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(13):270-273.

［18］劉端勇，趙海梅.從滋陰入手，以二至丸調(diào)治亞健康的理論解析［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2012，23(1):217-219.