兩種POCT法測(cè)定血HCG的比對(duì)研究

袁曉華，楊春菊，胡惠萍，張 偉

(黃石市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 黃石435000)

兩種POCT法測(cè)定血HCG的比對(duì)研究

袁曉華，楊春菊，胡惠萍，張 偉

(黃石市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 黃石435000)

目的分析金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和免疫熒光POCT法檢測(cè)血HCG的性能。方法將306例樣本按照濃度從低到高分為6個(gè)組，第1組86例、第2組60例、第3組14例、第4組68例、第5組41例、第6組37例。用電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)、金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法、免疫熒光POCT法平行檢測(cè)這6個(gè)組的血HCG濃度。以ECLIA法為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和免疫熒光POCT法的結(jié)果進(jìn)行配對(duì)資料的t檢驗(yàn)。結(jié)果(1)免疫熒光POCT法的比對(duì)：第1組樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的符合性好；2～5組樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；第6組樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(2)金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法的比對(duì)：1～2組樣本，金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和ECLIA法的符合性好；3～4組樣本，金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論免疫熒光POCT法能簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)血HCG的濃度，且檢測(cè)的準(zhǔn)確度比金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法好，檢測(cè)的量程比金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法寬。免疫熒光POCT法更適合于目前各類醫(yī)院血HCG的急診檢驗(yàn)。

人絨毛膜促性腺激素；即時(shí)檢驗(yàn)(POCT)；免疫熒光干式定量法；電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)

隨著免疫技術(shù)的發(fā)展，即時(shí)檢驗(yàn)(Point-of-care testing，POCT)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的新領(lǐng)域受到人們的關(guān)注和重視，它能快速的發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告，對(duì)急診搶救的意義重大，已擴(kuò)展到監(jiān)測(cè)血凝狀態(tài)、心肌損傷、酸堿平衡、感染性疾病和激素水平監(jiān)測(cè)等方面[1]。人絨毛膜促性腺激素(HCG)是一種糖蛋白激素，尿液定性檢測(cè)HCG只能診斷早孕，而血液定量檢測(cè)HCG能診斷早孕和宮外孕，能動(dòng)態(tài)的觀察先兆流產(chǎn)及判斷預(yù)后，還可用于惡性葡萄胎、絨癌的輔助診斷及治療后隨訪的觀察指標(biāo)[2]。POCT法檢測(cè)血HCG，樣本可用全血、血清或血漿，檢測(cè)過程不超過20min，大大縮短了報(bào)告時(shí)間，現(xiàn)分析這種方法的檢測(cè)性能。

1 材料與方法

1.1 一般材料2014年10月1日至2014年10月31日，檢驗(yàn)科8 h內(nèi)檢測(cè)的血HCG樣本共306例。用ECLIA法檢測(cè)的濃度范圍為＜0.1～141428.0 mIU/ml。把這些樣本分為6個(gè)組：＜2 mIU/ml為第1組86例；2～25 mIU/ml為第2組60例；26～500 mIU/ml為第3組14例；501～15000 mIU/ml為第4組68例；15001～50000 mIU/ml為第5組41例；＞50000 mIU/ml為第6組37例。

1.2 儀器和試劑 ECLIA法，德國羅氏診斷有限公司生產(chǎn)的cobas6000生化免疫分析系統(tǒng)e601模塊和配套的絨毛膜促性腺激素及β亞單位檢測(cè)試劑盒(電化學(xué)發(fā)光法)，質(zhì)控品為兩個(gè)濃度的cobas Cobas preciControl Universal和RANDOX非定值血清(人)水平2和水平3，均值分別為5.97 mIU/ml、46 mIU/ml、25.8 mIU/ml、391 mIU/ml。免疫熒光POCT法，韓國BodiTech Med Inc制造的i-CHROMATM Reader免疫熒光分析儀和配套的總β人絨毛膜促性腺激素檢測(cè)試劑盒(免疫熒光干式定量法)。金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法，奧普U2型金標(biāo)斑點(diǎn)法定量讀數(shù)儀及配套β人絨毛膜促性腺激素檢測(cè)試劑盒。

1.3 方法 每天在白班結(jié)束時(shí)，用兩種POCT法重新測(cè)試當(dāng)天8 h內(nèi)用ECLIA法檢測(cè)過的血HCG樣本，記錄結(jié)果。

1.3.1 POCT法的操作 嚴(yán)格按照試劑盒說明書，取血清進(jìn)行操作，然后在分析儀中掃描并讀取結(jié)果。

1.3.2 ECLIA法的操作 遵照試劑盒說明書中有關(guān)e601的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊(cè)來設(shè)置免疫分析儀的操作方法，＞10000 mIU/ml的樣本，儀器自動(dòng)1:100稀釋。每天用四個(gè)濃度的質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0軟件對(duì)2～6組各檢測(cè)方法的結(jié)果進(jìn)行配對(duì)資料的t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種POCT法檢測(cè)低濃度血HCG的符合性 免疫熒光POCT法檢測(cè)第1組的86例樣本，其中有82例＜2 mIU/ml(最小表達(dá)單位)，符合率為95.3%。金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法檢測(cè)第1組的結(jié)果全部＜25 mIU/ml(最小表達(dá)單位)，符合率為100%，金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法檢測(cè)第2組的60例樣本，其中有49例＜25 mIU/ml(最小表達(dá)單位)，符合率為81.7%。說明兩種POCT法對(duì)于低濃度血HCG的檢測(cè)和電化學(xué)發(fā)光法的符合性好。

2.2 免疫熒光POCT法檢測(cè)中、高濃度血HCG的符合性2～6組的樣本220例，對(duì)這幾組的免疫熒光POCT結(jié)果和ECLIA結(jié)果分別進(jìn)行配對(duì)資料的t檢驗(yàn)，t值分別為1.824、1.913、1.741、1.975、2.357，其中2～5組的P值均＞0.05，說明當(dāng)血HCG濃度范圍在2～50000 mIU/ml時(shí)免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第6組的P值＜0.05，說明當(dāng)血HCG濃度＞50000 mIU/ml時(shí)，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 免疫熒光POCT法和ECLIA法檢測(cè)220例樣本的一致性

2.3 金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法檢測(cè)中、高濃度血HCG的符合性3～4組的樣本82例，對(duì)這兩組的金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法結(jié)果和ECLIA法結(jié)果進(jìn)行配對(duì)資料的t檢驗(yàn)，t值分別為2.333和2.608，P值均＜0.05，顯示當(dāng)血HCG濃度范圍在25～15000 mIU/ml時(shí)金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和ECLIA法檢測(cè)82例樣本的一致性

3 討 論

HCG在人的血液中有β單位、α亞單位、高糖基化HCG、缺刻HCG等，是維持妊娠的重要激素之一[3]。近20年來，異位妊娠的發(fā)生率持續(xù)上升，已成為孕早期死亡的常見原因[4]。因?yàn)镠CG定性檢測(cè)不能提示胚胎發(fā)育、區(qū)分流產(chǎn)、宮外孕、葡萄胎等多種病理情況，所以HCG定量檢測(cè)替代定性檢測(cè)這一觀念得到了認(rèn)可和普及。臨床上也由此對(duì)血HCG的檢測(cè)技術(shù)提出了更高的要求，一是要求檢測(cè)準(zhǔn)；二是要求檢測(cè)快。應(yīng)運(yùn)而生的第一代POCT方法是膠體金試紙法，該方法與化學(xué)發(fā)光法比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[5]，這里不做討論。第二代POCT方法是金標(biāo)斑點(diǎn)定量檢測(cè)系統(tǒng)和免疫熒光干式定量法。為此，我們做了這兩種方法的比對(duì)實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證哪一種POCT法更適用于臨床，這對(duì)于人工授精試管嬰兒植入成功的早期觀察，某些宮外孕以及滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤手術(shù)和化療療效觀察可能有更多的參考意義[6]。

我們選擇了以羅氏Cobas6000及配套電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)為比對(duì)方法，以免疫熒光POCT法和金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法為實(shí)驗(yàn)方法，平行檢測(cè)了306例臨床隨機(jī)樣本。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：(1)免疫熒光POCT法對(duì)于＜2 mIU/ml的低濃度血HCG樣本和ECLIA法的符合性好。對(duì)于濃度范圍在2～50000 mIU/ml的中、高濃度血HCG樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。只有當(dāng)血HCG濃度＞50000 mIU/ml時(shí)免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測(cè)結(jié)果差異才有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？墒钱?dāng)血HCG結(jié)果在＞50000 mIU/ml這種超高濃度時(shí)發(fā)生一定程度的偏移，已經(jīng)不影響醫(yī)生對(duì)病情的診斷。(2)金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法對(duì)于＜25 mIU/ml低濃度血HCG樣本和ECLIA法的符合性好，對(duì)于濃度范圍在25～15000 mIU/ml的中、高濃度血HCG樣本，金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法和ECLIA法檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明免疫熒光POCT法在檢測(cè)血HCG濃度的準(zhǔn)確性方面要優(yōu)于金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法。另外免疫熒光POCT法的最小濃度表達(dá)單位為＜2 nmIU/ml，比金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法低了10倍，最大濃度表達(dá)單位為300000 mIU/ml，比金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法高了20倍。這種高量程的檢測(cè)方法在低濃度時(shí)能讓醫(yī)生直觀確切的知道血HCG濃度，在高濃度時(shí)不僅節(jié)省了稀釋樣本的時(shí)間，提高了檢測(cè)效率，還節(jié)約了試劑成本，降低了犯錯(cuò)誤的機(jī)會(huì)。結(jié)論：免疫熒光POCT法能簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)血HCG的濃度，且檢測(cè)的準(zhǔn)確度比金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法好，檢測(cè)的量程比金標(biāo)斑點(diǎn)POCT法寬。免疫熒光POCT法更適合于目前各類醫(yī)院血HCG的急診檢驗(yàn)。

[1]萬本愿,姜青龍.POCT的臨床應(yīng)用及存在問題[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(4):387-390.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:520-521.

[3]方從舉.膠體金試紙法和化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)全分子HCG的觀察[J].臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,7(5):41-45.

[4]許淑祥.HCG分子結(jié)構(gòu)與免疫定量分析[J].中國醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2004,2:288-31.

[5]盧桂香.膠體金試紙法和化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)全分子HCG分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2012,18(5):25-26.

[6]高曉霞.196例POCT法與化學(xué)發(fā)光法血HCG檢測(cè)結(jié)果的分析[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,2012,14(8):1412-1413.

Comparative study of two point-of-care testing methods in detecting blood HCG.

YUAN Xiao-hua,YANG Chun-ju,HU Hui-ping,ZHANG Wei.Department of Clinical Laboratory,Huangshi Central Hospital,Huangshi435000, Hubei,CHINA

ObjectiveTo analyze the performance between two point-of-care testing methods POCT,dot immunogold method and immunofluorescence technique)for detecting human chorionic gonadotropin(HCG).MethodsA total of306 cases of samples were divided into six groups according to the concentration from low to high:86 cases in group1,60 cases in group2,14 cases in group3,68 cases in group4,41 cases in group5,37 cases in group6.The blood HCG concentration of the6 groups was detected by electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA),Dot immunogold method and immunofluorescence technique.On the basis of ECLIAmethod,the performances of dot immunogold method and immunofluorescence technique were analyzed byttest.Results(1)Immunofluorescence technique and ECLIAwere found in good accordance in group1.The detection results of the two methods showed no statistically significant difference in group2～5,while they had statistically significant difference in group6(P＜0.05). (2)Dot immunogold method and ECLIA were in good accordance in group1～2,and the detection results of the twomethods had statistically significant difference in group3～4.ConclusionImmunofluorescence technique is simple,rapid and accurate for the detection of blood HCG,which has better accuracy and wider detection range than dot immunogold method.Thus,immunofluorescence technique is more suitable for the emergency test of HCG in hospitals at present.

Human chorionic gonadotropin(HCG)；Point-of-care testing(POCT);Immunofluorescence technique;Electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA)

R446.61

A

1003—6350（2015）22—3332—03

2015-03-10)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.22.1207

楊春菊。E-mail：184951791@qq.com