慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及其與肝纖維化的相關(guān)性研究

黃國棟，謝藝琴，楊碧新，黃 鋒

(龍川縣中醫(yī)院內(nèi)科，廣東 龍川 517000)

慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及其與肝纖維化的相關(guān)性研究

黃國棟，謝藝琴，楊碧新，黃 鋒

(龍川縣中醫(yī)院內(nèi)科，廣東 龍川 517000)

目的 探討血清轉(zhuǎn)化生長因子-B1(TGF-B1)在慢性乙型肝炎患者中的水平及其與肝纖維化的關(guān)系。方法65例慢性乙型肝炎患者根據(jù)肝纖維化程度分為輕度肝纖維化組(29例)，重度肝纖維化組(19例)和肝硬化組(17例)，選取25例健康體檢人員納入對照組，檢測各組受試者的血清TGF-B1及透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、層黏蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)水平并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果兩兩比較，血清TGF-B1及肝纖維化指標(biāo)HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ在對照組、輕度和重度肝纖維化組、肝硬化組依次上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；TGF-B1水平與血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ水平之間均存在正相關(guān)性(P均＜0.05)。結(jié)論血清TGF-B1水平與肝纖維化發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可作為臨床判斷肝纖維化程度的血清學(xué)指標(biāo)。

轉(zhuǎn)化生長因子B1；乙型肝炎病毒；肝纖維化；肝硬化

肝纖維化是各種病因引起的慢性肝病在向肝硬化進(jìn)展過程中的一個階段[1]，如果進(jìn)一步發(fā)展到肝小葉結(jié)構(gòu)改建及假小葉形成時則稱為肝硬化。近年來研究表明，轉(zhuǎn)化生長因子B1(TGF-B1)在肝纖維化的發(fā)病過程中具有重要作用[2]，但目前關(guān)于血清TGF-B1與慢性乙型肝炎后肝纖維化的臨床研究尚不多見。因此，本研究通過檢測慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及肝纖維化指標(biāo)，探討血清TGF-B1與慢性乙型肝炎肝纖維化的相關(guān)性，以期為慢性乙型肝炎肝纖維化早期診治提供理論基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院傳染科于2010年1月至2014年8月期間診治的65例慢性乙型肝炎患者，其中男性38例，女性27例，年齡26～65歲，平均(48.3±6.8)歲，HbeAg均為陽性并接受肝活檢檢查，符合2000年中華醫(yī)學(xué)會西安會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》中慢性乙型肝炎診[3]及《肝纖維化中西醫(yī)結(jié)合診療指南》肝纖維化診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他病毒感染引起的肝功能異常及肝癌；②合并肝硬化腹水，內(nèi)分泌、血液系統(tǒng)疾病及心、腎功能衰竭者；③妊娠、哺乳期婦女。同時選取在我院體檢中心體檢的健康成人25例納入對照組，其中慢性肝炎患者與對照組患者的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 對照組于入組日、慢性乙型肝炎患者于入院后次日晨抽取空腹靜脈血5 ml，2 000 r/min離心15 min，取上層血清置于-70℃?zhèn)錂z，采用ELISA法檢測血清TGF-B1及透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、層黏蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)，試劑盒分別由美國ADL公司天津分公司及北京北方生物技術(shù)研究所提供，操作步驟嚴(yán)格按說明書執(zhí)行。患者擇期在B超引導(dǎo)下行肝穿刺病理活檢，穿刺組織長度均在1.8 cm以上，常規(guī)予以甲醛固定、脫水、石蠟包埋、連續(xù)切片、HE染色、網(wǎng)織染色，由同一位病理醫(yī)生在光鏡下確定肝纖維化分級。將0～2級、3～4級、5～6級者分別納入輕度肝纖維化組(29例)、重度肝纖維化組(19例)和肝硬化組(17例)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，均數(shù)的比較采用t檢驗，相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組受試者血清TGF-B1及肝纖維化指標(biāo)比較 血清TGF-B1及肝纖維化指標(biāo)HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ在對照組、輕度和重度肝纖維化組、肝硬化組依次上升，經(jīng)兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 各組受試者血清TGF-B1及肝纖維化指標(biāo)比較(±s)

表1 各組受試者血清TGF-B1及肝纖維化指標(biāo)比較(±s)

注：a、b、c分別表示與對照組、輕度肝纖維化組比較、重度肝纖維化組比較，P＜0.05。

對照組(n=25)輕度肝纖維化組(n=29)重度肝纖維化組(n=19)肝硬化組(n=17) 336.3±121.2 529.3±189.4a614.6±221.5ab921.64±1.52abc40.3±11.4 226.7±27.5a408.6±38.1ab674.2±61.8abc21.1±6.4 127.6±21.8a231.8±30.6ab342.4±22.4abc20.6±5.7 67.4±12.8a154.9±22.1ab186.5±38.7abc37.6±9.8 94.3±13.7a175.7±22.1ab248.6±24.1abc

2.2 TGF-B1水平與血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ水平的相關(guān)性 TGF-B1水平與血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ之間均存在正相關(guān)性(r=0.967、0.476、0.418、0.412，P＜0.05)。

3 討論

慢性乙型肝炎已成為我國一個重要的公共衛(wèi)生問題，尤其是本病可進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量[5]。肝纖維化則是發(fā)展過程中的一個必經(jīng)階段，其他肝臟疾病發(fā)展為肝硬化也要經(jīng)歷肝纖維化這一病理改變。肝纖維化指各種損傷作用于肝臟，引起肝組織內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)成分增生過度，以及在肝臟組織異常沉積，進(jìn)而影響到肝臟結(jié)構(gòu)功能，使其發(fā)生異常的病理變化。肝纖維化發(fā)展到第4期即增生的結(jié)締組織包繞再生結(jié)節(jié)并分割殘存肝小葉并形成假小葉，此時雖已達(dá)到早期肝硬化，但此階段的病理過程是可逆的[6]，不過由于患者缺乏臨床癥狀往往造成病情延誤。因此，肝纖維化的早期診斷與治療是慢性乙型肝炎診治過程中的重要問題。

目前認(rèn)為肝星狀細(xì)胞(HSC)的異常增殖、活化在肝纖維化形成的過程中具有關(guān)鍵作用。在各種致病因素的作用下，靜止期的HSC可以被激活，引起HSC增殖、合成和分泌細(xì)胞外基質(zhì)成分增加，并使其降解減少，在上述作用下，細(xì)胞外基質(zhì)成分不斷增加、積聚而導(dǎo)致了肝纖維化的發(fā)生[7]。TGF-B1是一種最重要的促HSC活化因子[8]，肝炎病毒可通過免疫病理損傷(直接或間接)引起Kupffer細(xì)胞的大量激活、浸潤，增加其TGF-B1的分泌，分泌增多的TGF-B1又可刺激貯脂細(xì)胞和其他間質(zhì)細(xì)胞分泌TGF-B1，從而形成惡性循環(huán)[9]。TGF-B1可刺激HSC轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，從而增加ECM的合成，同時可上調(diào)Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原及HA、LN的表達(dá)，降低基質(zhì)金屬蛋白酶合成及抑制促進(jìn)纖溶酶原激活物的表達(dá)，降低ECM的降解，促使纖維化發(fā)生發(fā)展[10-11]。肝穿刺活檢是肝纖維診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但是肝穿刺具有一定的創(chuàng)傷，而肝纖維化指標(biāo)HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ對于肝纖維化的診斷及程度判斷目前已在臨床獲得廣泛應(yīng)用[12]。本研究結(jié)果顯示，在慢性乙型肝炎纖維化各期患者血清TGF-B1及肝纖維化指標(biāo)HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ均較對照組升高，且其水平隨肝纖維化程度的逐級加重而逐級升高，并且TGF-B1與肝纖維化指標(biāo)呈正相關(guān)性，進(jìn)一步證實(shí)TGF-B1是一種在肝纖維化發(fā)生、發(fā)展的具有重要作用細(xì)胞因子，對于慢性乙型肝炎患者測定血清TGF-B1水平有助早期肝纖維化的診斷及肝纖維化程度的判斷。

綜上所述，血清TGF-B1水平與肝纖維化發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可作為臨床判斷肝纖維化程度的血清學(xué)指標(biāo)。

[1]姚佳燕,鐘碧慧,晁 康,等.肝纖維化血清學(xué)診斷的研究[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2011,20(8):687-691.

[2]李 東,李新宇,龔鈺清,等.PDGF-BB、TGF-B1與肝纖維化的相關(guān)性研究[J].海南醫(yī)學(xué),2012,23(21):99-100.

[3]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會,傳染病與寄生蟲病學(xué)分會.病毒型肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志,2000,8(6):324.

[4]中華肝臟病學(xué)會肝纖維化學(xué)組.肝纖維化診斷及療效評估共識[J].中華肝臟病雜志,2002,10(5):327-328.

[5]柯 柳,溫小鳳,蔣忠勝,等.慢性肝炎患者乙型肝炎病毒復(fù)制與肝纖維化程度的關(guān)系[J].廣東醫(yī)學(xué),2010,31(5):628-629.

[6]朱松濤.干擾素γ聯(lián)合坎地沙坦治療肝纖維化的近期療效觀察[J].中華全科醫(yī)學(xué),2010,8(10):1268-1269.

[7]Lee UE,Friedman SL.Mechanisms of hepatic fibrogenesis[J].Best Pract Res Clin Gastroenterol,2011,25(2):195-206.

[8]Gressner AM,Weiskirchen R,Breitkopf K,et al.Roles of TGF-beta in hepatic fibrosis[J].Front Biosci,2002,7:793-807.

[9]陳勇良,李振燕,姚春甫,等.TGF-B1、PDGF-BB與慢性乙型肝炎肝纖維化相關(guān)性研究[J].實(shí)用肝臟病雜志,2010,13(2):100-103,92.

[10]周明玉,程明亮.TGFB1刺激肝星狀細(xì)胞的活化與肝纖維化的研究進(jìn)展[J].貴州醫(yī)藥,2008,32(8):751-753.

[11]許文進(jìn),康海燕,董江龍,等.慢性乙型肝炎肝組織TGF-B1及CTGF與肝纖維化的相關(guān)性研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜,2011,20 (9):1044-1045.

[12]胡興榮,崔顯念,胡啟托.血清肝纖維化指標(biāo)與慢性肝炎肝纖維化程度的相關(guān)性[J].世界華人消化雜志,2010,18(14):1501-1503.

Study of serum TGF-B1levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its correlation with hepatic fibrosis.

HUNAG Guo-dong,XIE Yi-qin,YANG Bi-xin,HUANG Feng.
Department of Internal Medicine, Longchuan County Hospital of Traditional Chinese Medicine,Longchuan 517000,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the serum transforming growth factor-B1(TGF-B1)levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its correlation with hepatic fibrosis.MethodsSixty-five patients with chronic hepatitis B were divided into mild hepatic fibrosis group(29 cases),severe hepatic fibrosis group(19 cases) and hepatic cirrhosis group(17 cases),and 25 healthy volunteers were included into the control group.The serum TGF-B1and hyaluronic acid(HA),Ⅲprocollagen(PC-Ⅲ),laminin(LN),Ⅳcollagen(C-Ⅳ)levels were detected in all the patients.ResultsThe serum TGF-B1and HA,PC-Ⅲ,LN,C-Ⅳlevels were increased successively in the control group,mild hepatic fibrosis group,severe hepatic fibrosis group and hepatic cirrhosis group,and the differences were statistically significant(P＜0.05).There was positive correlations between serum TGF-B1levels and hepatic fibrosis indexes including HA,PC-Ⅲ,LN,C-Ⅳ(P＜0.05).ConclusionThe serum TGF-B1is closely related to the hepatic fibrosis in chronic hepatitis B process.It can be used as serological indicators for judging hepatic fibrosis.

Transforming growth factor B1;Hepatitis B virus;hepatic fibrosis;Hepatic cirrhosis

R512.6+2

A

1003—6350（2015）13—1890—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.13.0681

2015-01-08)

龍川縣2013年度科技計劃項目(編號：LC201308)

黃國棟。E-mail：guodongh@126.com