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    PRUE-LAMP 為結(jié)核防控帶來新的契機(jī)

    2015-04-13 04:07:52李奉京蒲志群北京藍(lán)譜生物技術(shù)開發(fā)有限公司
    中國(guó)醫(yī)療器械信息 2015年2期
    關(guān)鍵詞:涂片結(jié)核結(jié)核病

    李奉京 蒲志群 北京藍(lán)譜生物技術(shù)開發(fā)有限公司

    結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種嚴(yán)重影響人類健康的慢性傳染病。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道,目前全球有約三分之一( 20 億) 人口受感染,每年新發(fā)結(jié)核患者達(dá)900 多萬,死亡人數(shù)約 300 萬。中國(guó)是全球22 個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一,結(jié)核患者數(shù)僅次于印度位居世界第二。為加強(qiáng)全球結(jié)核病防控工作,聯(lián)合國(guó)制定了千年防治目標(biāo),要求全球結(jié)核病控制至2015 年結(jié)核病的患病率和死亡率均降低50%,但結(jié)核病防治工作中肺結(jié)核病人的發(fā)現(xiàn)仍是難點(diǎn)和重點(diǎn)。目前結(jié)核病的診斷仍然依賴于臨床資料、痰涂片鏡檢和細(xì)菌培養(yǎng)。然而,涂片法靈敏度低,分離培養(yǎng)方法耗時(shí)長(zhǎng),隨著全球結(jié)核病防治工作的進(jìn)展,現(xiàn)有的細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)方法已不能滿足臨床和防治工作要求。為提高肺結(jié)核病人的發(fā)現(xiàn)率,新的基于分子生物檢測(cè)的方法不斷的涌現(xiàn),其中熒光定量PCR 方法,XPERT 方法需要昂貴的儀器設(shè)備,在設(shè)施簡(jiǎn)陋技術(shù)缺乏的基層實(shí)驗(yàn)室條件尚不能滿足這些方法的開展。而 LAMP 方法不需要昂貴的儀器,操作步驟相對(duì)簡(jiǎn)單,對(duì)實(shí)驗(yàn)室的條件設(shè)備要求不高,因此,該方法有望成為結(jié)核病診斷方法中新的寵兒。

    全球結(jié)核病流行狀況(WHO report,2013)

    LAMP 法是一種全新的DNA 擴(kuò)增方法,具有簡(jiǎn)單、快速、特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn),采用2 對(duì)引物在等溫條件下即可完成DNA 的擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)果可通過肉眼觀察熒光或濁度進(jìn)行判定,同時(shí)采用封閉系統(tǒng)減少了工作區(qū)域擴(kuò)增子的污染,且整個(gè)反應(yīng)過程需時(shí)較短。PURE-LAMP 檢測(cè)試劑盒就是日本榮研公司與FIND 基金合作開發(fā)出的一種基于LAMP 技術(shù)速高效檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的試劑盒,被WHO 推薦為最適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)結(jié)核病的重要產(chǎn)品之一。該試劑盒采用的是干粉試劑,可常溫運(yùn)輸和保存,配合簡(jiǎn)單的前處理試劑,操作簡(jiǎn)便,無需復(fù)雜的技術(shù)要求,一臺(tái)簡(jiǎn)單的恒溫裝置就可以在一個(gè)小時(shí)之內(nèi)完成檢測(cè),直接通過肉眼觀察熒光進(jìn)行結(jié)果判定,可以說為設(shè)備簡(jiǎn)陋的基層實(shí)驗(yàn)室提供了分子檢測(cè)平臺(tái)。

    最近,中國(guó)疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病預(yù)防控制中心的歐喜超、趙雁林等,帕斯適宜衛(wèi)生科技組織(PATH)的張治英、李俊晨等,香港中文大學(xué)的Man Kam,蓋茨基金會(huì)項(xiàng)目北京辦的池俊英,中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院的張志堅(jiān)等科研機(jī)構(gòu)的專家們聯(lián)合發(fā)表于國(guó)際著名期刊《PLOS ONE》上的一篇文章報(bào)道了PRUE-LAMP 檢測(cè)試劑盒在中國(guó)區(qū)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用評(píng)估結(jié)果。研究者們收集了來自中國(guó)兩個(gè)縣級(jí)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室的1378 份肺結(jié)核疑似病例,排除不合格樣本后可供研究分析的共有1329 份。采集三個(gè)時(shí)期的痰液(時(shí)痰,晚痰和早痰)樣本用于檢測(cè)。將PURE-LAPM與標(biāo)準(zhǔn)L-J 培養(yǎng)法做對(duì)照。研究結(jié)果顯示,在供試樣本中,PURE-LAMP 法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的靈敏度達(dá)到70.67%。同時(shí),PURE-LAMP 法在基于涂片陽(yáng)性培養(yǎng)呈陽(yáng)性,涂片陰性培養(yǎng)呈陽(yáng)性的病患中靈敏度分別為92.12%和53.81%。PURE-LAMP 法在檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌中的特異性為98.32%。并且,與固體培養(yǎng)法相比,PURE-LAMP 能顯著降低污染率。

    PURE-LAMP 法具有較高的靈敏度和特異性。其具有高效、快速和安全的優(yōu)點(diǎn),適合在基層及偏遠(yuǎn)地區(qū)廣泛推廣使用。

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