溫陽強(qiáng)心方對(duì)慢性充血性心力衰竭家兔細(xì)胞因子的影響

郭欣桐

(河北大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 河北 保定 071000 )

慢性充血性心力衰竭(CHF)是指存在適量靜脈血回流的情況下，受心臟收縮或舒張功能障礙等因素的影響，導(dǎo)致心排血量不足無法滿足機(jī)體代謝需要的一種臨床綜合征，該病是大多數(shù)器質(zhì)性心臟病患者的最終結(jié)局［1］。有研究表明［2］，中藥可顯著改善CHF 患者的心功能，緩解其臨床癥狀，采用溫陽強(qiáng)心方對(duì)CHF 患者進(jìn)行治療可獲得理想療效。本研究以40 只普通級(jí)新西蘭兔作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，探討了溫陽強(qiáng)心方對(duì)慢性充血性心力衰竭(CHF)家兔L－10、TNF－α 和ET－1 等細(xì)胞因子的影響，旨在為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.材料與方法

1.1 材料、藥物、試劑與儀器

材料:40 只普通級(jí)新西蘭兔(南京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體質(zhì)量為1.8～2.1kg，雌雄比為1:1。

藥物:溫陽強(qiáng)心方:組方為附片、紅參、干姜、甘草等中藥，配藥煎煮為含原藥材0.23g/mL、0.35g/mL 兩種濃度的藥液，置入冰箱4℃下保存?zhèn)溆谩｛}酸阿霉素;生理鹽水。

試劑與儀器:IL－10 和ET－1 試劑盒購自北方生物技術(shù)研究所，TNF－α 試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司，彩超儀(GE 公司生產(chǎn)，型號(hào)LOGIQ－3)由南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院體檢中心提供。

1.2 造模、隨機(jī)分組和給藥

選取40 只新西蘭兔，隨機(jī)抽取10 只作為對(duì)照組，另30 只建立CHF模型，造模之后對(duì)家兔行心臟彩超檢查，按照心功能分層隨機(jī)分為CHF模型組、輕劑量和重劑量溫陽強(qiáng)心方組，每組10 只。其中輕劑組每次給予煎煮方按每kg10ml 灌胃，其中含原藥材2.3g，重劑組按kg10ml 灌胃，含原藥材3.5g，每日灌胃1 次，共持續(xù)4 周。對(duì)照組經(jīng)兔耳按1mL/kg 靜注生理鹽水，每周靜注兩次，持續(xù)8 周。對(duì)照組與模型組于實(shí)驗(yàn)第9 周使用等量蒸餾水灌胃，每日一次，共持續(xù)4 周。

1.3 細(xì)胞因子檢測(cè)

于治療后在兔耳動(dòng)脈中采血3 管，共9ml，檢測(cè)IL－10、TNF－α 和ET－1，其中IL－10 與ET－1 采用ELTSA 監(jiān)測(cè)，TNF－α 采用放免方法檢測(cè)，按試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.4 病理切片

經(jīng)治療后在兔耳緣處靜注空氣10mL，動(dòng)物死后取出心臟病并使用之前預(yù)冷的生理鹽水進(jìn)行清洗，使用4%聚甲醛固定各組織標(biāo)本、照相，間斷連續(xù)切片，并行HE 染色。觀察MIAS 圖像顯微攝像系統(tǒng)攝片和家兔心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。

2.結(jié)果

2.1 各組一般情況

對(duì)照組造模時(shí)有1 只因腹瀉死亡，2 只因麻醉未醒而死亡，模型組因腹瀉、麻醉意外和注射阿霉素時(shí)各死亡1 只，輕劑溫陽強(qiáng)心方組因腹瀉死亡2 只，重劑溫陽強(qiáng)心方組因麻醉意外死亡1 只，其中重劑溫陽強(qiáng)心方組的療效最佳，模型組無明顯改善。

2.2 各組IL－10、TNF－α 和ET－1 的變化情況

CHF 模型組、輕劑量和重劑量溫陽強(qiáng)心方組的IL－10、TNF－α 和ET－1 水平均明顯高于對(duì)照組，重劑量組的TNF－α 水平低于輕劑量組，IL－10 高于輕劑組，見表1。

表1 各組IL－10、TNF－α 和ET－1 的變化情況比較(±s)

表1 各組IL－10、TNF－α 和ET－1 的變化情況比較(±s)

?

2.3 病理結(jié)果

對(duì)照組心肌組織HE 染色顯示其心肌細(xì)胞的形態(tài)和大小正常，邊緣清晰，細(xì)胞核與橫紋清晰，細(xì)胞膜完整;模型組的心肌細(xì)胞有明顯水腫，顆粒及部分心肌細(xì)胞脂肪變性，心肌纖維明顯斷裂，橫紋較模糊，其他各組的心肌損害較輕，炎癥細(xì)胞浸潤減少，心肌細(xì)胞間隙大部正常。

3.討論

中醫(yī)認(rèn)為，CHF 屬于"心悸"、"水腫"、"喘證"等范疇，其病機(jī)為陰陽失調(diào)、心氣虧虛、痰濁互結(jié)并阻于心體［3］。溫陽強(qiáng)心方組方為附片、紅參、干姜、甘草等中藥，附片可補(bǔ)火助陽、回陽救逆，干姜?jiǎng)t溫中散寒、溫化痰飲、回陽通脈，紅參可大補(bǔ)元?dú)?，益肺補(bǔ)脾，甘草為佐藥和使藥，諸藥合用可益氣溫陽、利水消腫［4］。

臨床研究發(fā)現(xiàn)，CHF 的病理生理過程有多種機(jī)制參與，其中細(xì)胞因子是其中的重要因子。心功能正常時(shí)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)可發(fā)揮正常調(diào)控作用，各類型細(xì)胞因子處于平衡狀態(tài);心功能異常時(shí)(CHF 時(shí))細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)功能嚴(yán)重失控，抗炎性細(xì)胞因子明顯降低，而促炎性細(xì)胞因子大幅增加。IL－10 是機(jī)體免疫平衡中抑制炎癥因素的最重要部分，可有效抑制并拮抗促炎因子，具有心肌保護(hù)作用;TNF－α 可參與心力衰竭的發(fā)生及發(fā)展，是判斷心功能級(jí)別的重要指標(biāo);ET－1 可強(qiáng)烈收縮血管，具有促細(xì)胞生長特性，是誘發(fā)多種疾病的炎癥因子。本次研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)治療后CHF模型兔血漿中的TNF－α 和ET－1 水平明顯降低，IL－10 水平明顯升高，提示溫陽強(qiáng)心方可有效調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，改善CHF 模型兔心功能，其中重劑溫陽強(qiáng)心方的療效更為突出。

［1］ 陳新宇，唐燕萍，盧青，等.溫陽強(qiáng)心方對(duì)兔慢性充血性心力衰竭細(xì)胞凋亡及心臟結(jié)構(gòu)的影響［J］.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，32(1):16－19.

［2］ 唐燕萍，盧青，謝海波，等.溫陽強(qiáng)心方對(duì)慢性充血性心力衰竭家兔細(xì)胞因子的影響［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2012，19(2):35－40.

［3］ 陳新宇，張帆，盧青，等.重劑溫陽強(qiáng)心方對(duì)慢性充血性心力衰竭兔神經(jīng)內(nèi)分泌的影響［J］.湖南中醫(yī)雜志，2011，27(5):118－119.

［4］ 陳佳江，熊敏，周靜波，等.附子配伍干姜對(duì)附子總生物堿含量的影響［J］.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，33 (2):1－3.