EDTA-K2抗凝血對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及校正方法分析

蘇東 桂滿元 王永娜 趙亞南

臨床生化檢驗(yàn)中，常常遇到生化標(biāo)本太少或者存在溶血，影響生化檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性、及時(shí)性；同時(shí)部分患者（新生兒、兒科患者、燒傷患者、ICU室患者）重新采血存在困難，而這類患者往住是血常規(guī)檢測與生化檢測基本上是同步進(jìn)行的，筆者嘗試用EDTA-K2抗凝血經(jīng)離心后取血漿替代血清標(biāo)本進(jìn)行常用生化項(xiàng)目檢測，旨在分析EDTA-K2抗凝血對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響，分析原因并提出相關(guān)的處理措施，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑 無抗凝劑管或促凝管、EDTAK2抗凝管，由湖南瀏陽醫(yī)用儀具廠提供。檢測項(xiàng)目原理及試劑：總膽紅素（TBIL，氧化法）、直接膽紅素（DBIL，氧化法）、總蛋白（SP）、白蛋白（A）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽汁酸（TBA，循環(huán)酶法）、尿素（BU，酶法）、肌酐（Cr，苦味酸法）、尿酸（UA，酶法）、血糖（GLU，己糖己酶法）、血淀粉酶（AMS）、磷（P）、鎂（Mg）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、載脂蛋白A1（APOA1）、載脂蛋白B（APOB）等項(xiàng)目由山東3V生物科技有限公司生產(chǎn)，C反應(yīng)蛋白（CRP）、抗O（ASO）、RF、IgG、IgM、IgA、C3、C4均為永和陽光生物科技有限公司生產(chǎn)。缺血修飾白蛋白（IMA）由長沙熙康生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 儀器 AU2700全自動(dòng)生化分析儀，長沙湘智TDZ5-WS低速離心機(jī)。

1.3 標(biāo)本來源 本院住院部同一患者同時(shí)采取血常規(guī)及血生化標(biāo)本，其中血常規(guī)足夠量及肉眼未見小凝塊，所有標(biāo)本經(jīng)離心后無明顯溶血及乳糜狀。

1.4 質(zhì)控物 朗道質(zhì)控物，批號：ZX21511N。

1.5 方法 先用朗道質(zhì)控物進(jìn)行測定，所有項(xiàng)目均在控，進(jìn)行下一步分析。取同一患者的血常規(guī)剩余血及血生化標(biāo)本，經(jīng)離心后取血漿或血清在AU2700生化析儀上進(jìn)行相關(guān)生化項(xiàng)目分析，所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對本組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)對絕大多數(shù)生化項(xiàng)目進(jìn)行直線回歸及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

兩組標(biāo)本生化項(xiàng)目中除DBIL、Mg、ASO、RF、ALP、IMA比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其他項(xiàng)目無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；直線回歸方程及相關(guān)性良好（r2>0.80）的 生 化 項(xiàng) 目 有 TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。結(jié)果見表1。對結(jié)果相差太大的生化項(xiàng)目（ALP、IMA）不進(jìn)行直線回歸方程及相關(guān)性分析，但分析其原因。

表1 血清組與EDTA-K2抗凝血漿組生化結(jié)果及直線回歸與相關(guān)系數(shù)分析

3 討論

本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，EDTA-K2抗凝血漿組與血清組在肝、腎功能、血糖血脂、心肌酶、免疫球蛋白等多數(shù)項(xiàng)目比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與有關(guān)文獻(xiàn)[1-3]略有差異，筆者認(rèn)為有兩個(gè)方面的原因：其一是筆者所采用的標(biāo)本是住院患者，來源廣泛且高、低值相差大，而有關(guān)文獻(xiàn)標(biāo)本來源是體檢者，結(jié)果在一定范圍內(nèi)波動(dòng)，故統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方面會(huì)有差異；其二可能存在不一樣廠家試劑或方法學(xué)不一致。

EDTA-K2抗凝原理是EDTA-K2中的EDTA成分可與Ca2+形成配位化合物，而Ca2+是內(nèi)、外凝血途經(jīng)的必需因子，所以血液不能凝固，從而起到抗凝作用，因此EDTA-K2抗凝血漿組中的鈣、鎂含量下降，與文獻(xiàn)[1-4]報(bào)道一致。

此次實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)EDTA-K2抗凝血漿組ALP的檢測值明顯低于血清值，甚至有個(gè)別檢測值為負(fù)數(shù)或零，呈明顯的抑制狀態(tài)，文獻(xiàn)[5]認(rèn)為這主要因?yàn)锳LP檢測中的中間產(chǎn)物對硝基苯酚需要在堿性溶液中轉(zhuǎn)變?yōu)轷浇Y(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)較深的黃色而進(jìn)行比色分析，而EDTA在抗凝過程中產(chǎn)生了氫離子，而使溶液成中性甚至酸性，故檢測受到抑制；EDTA-K2抗凝血漿組IMA的檢測值明顯高于血清值，這是否與EDTA-K2中的某些成分能促進(jìn)缺血修飾白蛋白檢測反應(yīng)，有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

臨床護(hù)理工作中，多個(gè)項(xiàng)目檢測抽血時(shí)，一般會(huì)按照如下順序進(jìn)行抽血：凝血功能→血常規(guī)→血生化→免疫等[6]，對于某些患者（新生兒、兒科患者、大面積燒傷患者等）會(huì)存在抽血困難，抽取一、二管血后，適當(dāng)擠壓抽完后面部分項(xiàng)目（生化、免疫等），往往會(huì)造成輕度溶血，而溶血標(biāo)本對部分生化項(xiàng)目檢測有影響[7-10]。

EDTA-K2抗凝血對血生化項(xiàng)目的影響，各文獻(xiàn)[1-5，11-13]說法不一，有學(xué)者雖提出建立抗凝血漿結(jié)果參考值或進(jìn)行校正，但未見相關(guān)報(bào)道[12]。本文參照文獻(xiàn)[14]，進(jìn)行直線回歸及相關(guān)性分析，經(jīng)驗(yàn)證EDTA-K2抗凝血多數(shù)生化項(xiàng)目結(jié)果在本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可替代血清的結(jié)果，可用于臨床，這不僅可以減少“醫(yī)源性貧血”的隱患[15]，而且對于某些溶血、血少患者需重新抽血檢測時(shí)，縮短樣本檢測周期有著重要的意義[16-17]。

綜上所述，EDTA-K2抗凝血與血清在多數(shù)生化項(xiàng)目上相關(guān)性良好，其檢測結(jié)果經(jīng)校正后可以替代血清用于臨床。

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