飼料中的粗纖維、NDF、ADF和ADL含量的快速測(cè)定方法

張崇玉 王保哲 張桂國(guó) （山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 山東 泰安 271000）尹朋輝 路緒明 （泰安市新農(nóng)方舟飼料有限公司 山東 泰安）

飼料中的粗纖維、NDF、ADF和ADL含量的快速測(cè)定方法

張崇玉 王保哲 張桂國(guó) （山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 山東 泰安 271000）尹朋輝 路緒明 （泰安市新農(nóng)方舟飼料有限公司 山東 泰安）

本文介紹了用聚酯纖維濾網(wǎng)袋法測(cè)定飼料中的粗纖維、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和木質(zhì)素(ADL)含量的快速測(cè)定方法。聚酯纖維濾網(wǎng)袋法具有簡(jiǎn)單、方便、快速和準(zhǔn)確度的特點(diǎn)，可以進(jìn)行纖維成分的批量快速測(cè)定。

飼料中的粗纖維(CF)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和木質(zhì)素(ADL)是粗飼料、糠麩類、雜粕類等飼料中碳水化合物的主要成分，主要由半纖維素、纖維素、木質(zhì)素等。到目前為止，國(guó)家頒布了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飼料中粗纖維的含量測(cè)定(過(guò)濾法GB/T6434-2006/ISO6865: 2000)；國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飼料中中性洗滌纖維(NDF)的測(cè)定(GB/T20806-2006)；國(guó)家農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)飼料中酸性洗滌纖維(ADF)(NY/T1459-2007)；國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飼料中酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)的測(cè)定(GB/T20805-2006)。國(guó)標(biāo)法操作過(guò)程相當(dāng)繁雜，過(guò)濾時(shí)間長(zhǎng)，效率低。聚酯纖維濾網(wǎng)袋法不需要抽濾或過(guò)濾設(shè)備和步驟，可以進(jìn)行纖維成分的大批量的快速測(cè)定[1][2]，也可用于糧油檢驗(yàn)糧食中粗纖維素含量測(cè)定、植物類食品中粗纖維的測(cè)定、食品中不溶性膳食纖維的測(cè)定，為生產(chǎn)和科研的飼料纖維成分的測(cè)定提供了新的測(cè)定方法。

1 聚酯纖維濾網(wǎng)袋法測(cè)定飼料中的粗纖維含量的方法

1.1 適用范圍

本方法適用于粗纖維含量大于10g/kg(1%)的飼料。

1.2 測(cè)定原理

飼料用一定濃度和量的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用醚、丙酮除去脂肪，經(jīng)高溫灼燒扣除灰分的量，所余量稱為粗纖維。其中包括全部的纖維素和大部分的木質(zhì)素及少量的半纖維素。

1.3 試劑及材料

1.3.1 鹽酸溶液 c(HCI)=0.5 mol/L，取41.7ml的濃鹽酸稀釋定容1000ml。

1.3.2 硫酸溶液 c(H2SO4)=0.13±0.005 mol/L，取6.9ml的濃硫酸稀釋定容1000ml。

1.3.3 氫氧化鉀溶液 c(KOH)=0.23±0.005 mol/L，取

12.5 g氫氧化鉀溶解定容1000ml。

1.3.4 丙酮。

1.3.5 石油醚 沸點(diǎn)范圍40～60℃

1.3.6 聚酯纖維濾網(wǎng)袋 用高質(zhì)量的聚酯細(xì)絲(聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯，細(xì)絲的直徑為34μm)織成孔徑為20μm的均勻一致的聚酯超細(xì)網(wǎng)后，制成為5cm×6cm長(zhǎng)方形的聚

酯網(wǎng)袋，三面塑封口，一面開口，用特殊記號(hào)筆編號(hào)，稱重。

1.4 儀器和設(shè)備

1.4.1 粉碎設(shè)備 樣品粉碎能完全通過(guò)篩孔為1mm(18目)篩。

1.4.2 分析天平 感量0.1mg。

1.4.3 干燥箱 可控溫度在105±2℃。

1.4.4 干燥器 藍(lán)色硅膠為干燥劑。

1.4.5 馬福爐 溫度可調(diào)控，在500±25℃。

1.5 測(cè)定步驟

1.5.1 樣品稱量 在已知質(zhì)量(m1)的5cm×6cm聚酯纖維濾網(wǎng)袋(用特殊記號(hào)筆編號(hào))中，準(zhǔn)確稱取1.000g左右的樣品(m)，用塑封機(jī)封口。每個(gè)樣品做2個(gè)平行樣測(cè)定。(樣品脂肪含量大于10%，須預(yù)先脫脂：將裝有樣品的濾網(wǎng)袋用石油醚或丙酮浸泡10分鐘；碳酸鹽含量超5%，需要預(yù)先除去碳酸鹽：將裝有樣品的濾網(wǎng)袋用0.5mol/L鹽酸溶液浸泡10min)。

1.5.2 酸處理 將20個(gè)樣品濾網(wǎng)袋放入3L大燒杯中，加入2000ml配好的硫酸溶液(0.13±0.005mol/L)，煮沸30±1min。在煮沸期間要保持溶液濃度不變。煮沸完畢取出濾網(wǎng)袋，用水沖洗干凈后把水?dāng)D壓干。

1.5.3 堿處理 將濾網(wǎng)袋放入原來(lái)的大燒杯中，加入2000ml配好的氫氧化鉀溶液(0.23±0.005mol/L)，繼續(xù)微沸30±1min，煮沸完畢取出濾網(wǎng)袋，用水洗至中性，把水?dāng)D壓干凈。

1.5.4 丙酮處理 將濾網(wǎng)袋放燒杯中用丙酮浸泡10min去除剩余脂肪，取出纖維濾網(wǎng)袋并在通風(fēng)櫥涼干。

1.5.5 烘干：將濾網(wǎng)袋放在烘箱內(nèi)105℃烘干1h，取出立即稱重m 2 。

1.5.6 測(cè)定灰分含量 (單一飼料經(jīng)酸堿處理后的殘?jiān)谢曳忠话阈∮?%，可忽略不計(jì)；若去除殘?jiān)械幕曳趾?，則按以下步驟測(cè)定灰分含量)，將纖維濾網(wǎng)袋放入已知質(zhì)量的坩堝中，把坩堝放在電爐上炭化至無(wú)煙，然后轉(zhuǎn)移到馬福爐中500℃灰化30min，取出在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱重，測(cè)定灰分重(m3)。

濾網(wǎng)袋的質(zhì)量，m3為

灰分質(zhì)量。

2 聚酯纖維濾網(wǎng)袋法測(cè)定飼料中性洗滌纖維(NDF)含量的方法

2.1 適用范圍

本方法適用于各種單一飼料和配合飼料。

2.2 測(cè)定原理

飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，可以洗滌分解大部分細(xì)胞內(nèi)容物，如脂肪、蛋白質(zhì)、淀粉和糖類等，而不溶解的殘?jiān)Q為中性洗滌纖維(NDF)，包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和少量硅酸鹽和少量蛋白質(zhì)等。

2.3 試劑及材料

2.3.1 中性洗滌劑溶液(3%十二烷基硫酸鈉溶液)：稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉)和6.8g四硼酸鈉(放人1000ml燒杯中，加適量蒸餾

2.3.2 丙酮 又名二甲基酮，易燃，易揮發(fā)，分子量58.08。

2.3.3 聚酯纖維濾網(wǎng)袋 用高質(zhì)量的聚酯細(xì)絲(聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯，細(xì)絲的直徑為34μm)織成孔徑為20μm的均勻一致的聚酯超細(xì)網(wǎng)后，制成為5cm×6cm長(zhǎng)方形的聚酯網(wǎng)袋，三面塑封口，一面開口，用特殊記號(hào)筆編號(hào)、稱重。

2.4 儀器和設(shè)備

同粗纖維的測(cè)定。

2.5 測(cè)定步驟

2.5.1 樣品稱量 在已知質(zhì)量(m1)的5cm×6cm聚酯纖維濾網(wǎng)袋(用特殊記號(hào)筆編號(hào))中，裝入樣品，準(zhǔn)確稱取樣品0.5～1.0g左右(m)，準(zhǔn)確至0.0001g，用塑封機(jī)封口。每個(gè)樣品做2個(gè)平行樣測(cè)定。(樣品脂肪含量大于10%，須預(yù)先脫脂：將裝有樣品的濾網(wǎng)袋用丙酮浸泡10～20min)。

2.5.2 中性洗滌劑處理 將20個(gè)樣品濾網(wǎng)袋放入3L大燒杯中，加入2000ml配好的中性洗滌劑2000ml，煮沸60±1min。在煮沸期間要保持溶液濃度不變。煮沸完畢取出濾網(wǎng)袋，用水沖洗干凈后把水?dāng)D壓干。

2.5.3 丙酮處理 將濾網(wǎng)袋放燒杯中用丙酮浸泡10min去除剩余脂肪，取出纖維濾網(wǎng)袋并在通風(fēng)櫥涼干。

2.5.4 烘干 將濾網(wǎng)袋放在烘箱內(nèi)105℃烘干1h，取出立即稱重m 2 。

2.5.5 灰分的測(cè)定 (如果NDF包含灰分，則此步驟不做；若NDF去除灰分，可按以下步驟測(cè)定殘?jiān)械幕曳趾?。將纖維濾網(wǎng)袋放入已知質(zhì)量的坩堝中，把坩堝放在電爐上炭化至無(wú)煙，然后轉(zhuǎn)移到馬福爐中500℃灰化30min，取出在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱重，測(cè)定灰分重(m 3 )。

2.5.6 測(cè)定結(jié)果的計(jì)算 中性洗滌纖維(NDF)(含灰分)的含量或者中性洗滌纖維(NDF)(不含灰分)的含量式中：m為試樣質(zhì)量，為中性洗滌纖維殘?jiān)蜑V網(wǎng)袋的質(zhì)量，m1為濾網(wǎng)袋的質(zhì)量，m3為灰分質(zhì)量。

3 聚酯纖維濾網(wǎng)袋法測(cè)定飼料酸性洗滌纖維(ADF)含量的方法

3.1 適用范圍

本方法適用于各種單一飼料和配合飼料。

3.2 測(cè)定原理

飼料用酸性洗滌劑煮沸處理，可以洗滌分解大部分細(xì)胞內(nèi)容物，如脂肪、蛋白質(zhì)、淀粉和糖類和半纖維素等，而不溶解的殘?jiān)Q為酸性洗滌纖維(ADF)，包括纖維素、木質(zhì)素和少量硅酸鹽等。

3.3 試劑及材料

3.3.1 0.5mol/L硫酸(H2SO4)溶液 取27.9ml(約49g)濃硫酸，慢慢加入已裝有500ml水的1000ml容量瓶中，冷卻后定容。

3.3.2 酸性洗滌劑溶液(2%十六烷基三甲基溴化銨溶液)稱取20g十六烷基三甲基溴化銨，溶于1000ml 0.5mol/L硫酸溶液。

3.3.3 聚酯纖維濾網(wǎng)袋 用高質(zhì)量的聚酯細(xì)絲(聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯，細(xì)絲的直徑為34μm)織成孔徑為20μm的均勻一致的聚酯超細(xì)網(wǎng)后，制成為5cm×6cm長(zhǎng)方形的聚酯網(wǎng)袋，三面塑封口，一面開口，用特殊記號(hào)筆編號(hào)、稱重。

3.4 儀器和設(shè)備

同粗纖維的測(cè)定。

3.5 測(cè)定步驟

3.5.1 樣品稱量 在已知質(zhì)量(m1)的5cm×6cm聚酯纖維濾網(wǎng)袋(用特殊記號(hào)筆編號(hào))中，裝入樣品，準(zhǔn)確稱取樣品1.000g左右(m)，用塑封機(jī)封口。每個(gè)樣品做2個(gè)平行樣測(cè)定。(樣品脂肪含量大于10%，須預(yù)先脫脂：將裝有樣品的濾網(wǎng)袋用丙酮浸泡10～20min)。

3.5.2 酸性洗滌劑處理 將20個(gè)樣品濾網(wǎng)袋放入3L大燒杯中，加入2000ml配好的酸性洗滌劑2000ml，煮沸60±1min。在煮沸期間要保持溶液濃度不變。煮沸完畢取出濾網(wǎng)袋，用水沖洗干凈后把水?dāng)D壓干。

3.5.3 丙酮處理 將濾網(wǎng)袋放燒杯中用丙酮浸泡10min去除剩余脂肪，取出濾網(wǎng)袋并在通風(fēng)櫥涼干。

3.5.4 烘干 將濾網(wǎng)袋放在烘箱內(nèi)105℃烘干1h，取出室內(nèi)冷卻1min，立即稱重m2。

3.5.5 灰分的測(cè)定 (如果ADF包括灰分，則此步驟不需要做；如果ADF去除灰分，則按下列步驟殘?jiān)械幕曳趾?。將纖維濾網(wǎng)袋放入已知質(zhì)量的坩堝中，把坩堝放在電爐上炭化至無(wú)煙，然后轉(zhuǎn)移到馬福爐中500℃灰化30min，取出在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱重，測(cè)定灰分重

3.5.6 測(cè)定結(jié)果的計(jì)算 酸性洗滌纖維(ADF)(含灰分)的含量或者酸性洗滌纖維(ADF)(不含灰分)的含量式中：m為試樣質(zhì)量，為酸性洗滌纖維殘?jiān)蜑V網(wǎng)袋的質(zhì)量，為濾網(wǎng)袋的質(zhì)量，m3為灰分質(zhì)量。

4 聚酯纖維濾網(wǎng)袋法測(cè)定飼料酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)含量的方法

4.1 適用范圍

本方法適用于各種單一飼料和配合飼料。

4.2 測(cè)定原理

飼料分別經(jīng)酸性洗滌劑和濃硫酸處理，可以分解細(xì)胞內(nèi)容物，如脂肪、蛋白質(zhì)、淀粉、糖類、半纖維素、纖維素等，而不溶解的殘?jiān)Q為酸性洗滌木質(zhì)素。

4.3 試劑及材料

4.3.1 0.5mol/L硫酸(H2SO4)溶液 取27.9ml(約49g)濃硫酸，慢慢加入已裝有500ml水的1000ml容量瓶中，冷卻后定容。

4.3.2 12mol/L硫酸(H2SO4)溶液 取666.0ml(約1235.5g)濃硫酸，慢慢加入已裝有300ml水的燒杯中，攪拌冷卻后定容1000ml容量瓶中。

4.3.3 酸性洗滌劑溶液(2%十六烷基三甲基溴化銨溶液)稱取20g十六烷基三甲基溴化銨，溶于1000ml 0.5mol/L硫酸溶液。

4.3.4 聚酯纖維濾網(wǎng)袋 用高質(zhì)量的聚酯細(xì)絲(聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯，細(xì)絲的直徑為34μm)織成孔徑為20μm的均勻一致的聚酯超細(xì)網(wǎng)后，制成為5cm×6cm長(zhǎng)方形的聚酯網(wǎng)袋，三面塑封口，一面開口，用特殊記號(hào)筆編號(hào)、稱重。

4.4 儀器和設(shè)備

同粗纖維的測(cè)定。

4.5 測(cè)定步驟

4.5.1 樣品稱量 在已知質(zhì)量的聚酯纖維濾網(wǎng)袋(5cm×6cm)上，用特殊記號(hào)筆編號(hào)，裝入樣品，準(zhǔn)確稱量樣品重(m)1.000g左右于袋中，封好口。每種樣品做2個(gè)平行樣。(樣品脂肪含量大于10%，須預(yù)先脫脂：將裝有樣品的濾網(wǎng)袋用丙酮浸泡10～20min)。

4.5.2 酸性洗滌劑處理 將20個(gè)樣品濾網(wǎng)袋放入3L大燒杯中，加入2000ml配好的酸性洗滌劑2000ml，煮沸60±1min。在煮沸期間要保持溶液濃度不變。煮沸完畢取出濾網(wǎng)袋，用水沖洗干凈后把水?dāng)D壓干。

4.5.3 濃硫酸處理 將濾網(wǎng)袋放在烘箱內(nèi)105℃烘干30min，取出。將以上的濾網(wǎng)袋中的殘?jiān)嗨楹?，放入燒杯中，?2.0mol/L的硫酸在20～25℃下浸泡3h(用玻璃棒打碎結(jié)塊，每30min攪拌1次)，取出用水洗凈至中性，擠干水分。

4.5.4 烘干 把濾網(wǎng)袋放入105℃烘箱中烘1h，取出立即稱重(m 2 )。

4.5.5 灰分測(cè)定 (殘?jiān)曳稚倏墒÷源瞬襟E；若去除殘?jiān)械幕曳郑瑒t按以下步驟測(cè)定灰分)。將每個(gè)的濾網(wǎng)袋連同殘?jiān)湃胍阎|(zhì)量坩堝中，先在電爐上炭化至無(wú)煙，后放入500℃馬福爐中燒30min，取出放干燥器冷卻至室溫稱重，計(jì)算灰分重(m3)。計(jì)算：ADL%=(m2-m3)/m ×100%。式中：m為試樣質(zhì)量，m2為濃硫酸處理后濾網(wǎng)袋及殘?jiān)暮娓少|(zhì)量，m3為灰分質(zhì)量。

S816.9

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1007-1733(2015)09-0020-03

2015–05–05）