豬支原體肺炎活疫苗與滅活苗比較分析

豬支原體肺炎是由豬肺炎支原體引起的一種慢性呼吸道傳染病,又稱豬氣喘病和豬地方流行性肺炎,廣泛流行于世界各養(yǎng)豬國家和地區(qū),是一種頑固性慢性傳染病。臨床表現(xiàn)咳嗽和氣喘，患病動(dòng)物體溫、食欲變化不明顯，剖檢可見肺臟心葉、中間葉和尖葉有融合性支氣管炎，呈現(xiàn)肉樣或肝樣病變。國內(nèi)豬支原體肺炎的發(fā)病率為30%～50%，而感染率高達(dá)85%以上。

豬支原體肺炎的預(yù)防、控制和凈化須采取早期診斷、及時(shí)隔離、抗生素治療或淘汰病豬、疫苗接種、全進(jìn)全出、嚴(yán)格消毒等綜合性措施，其中疫苗預(yù)防起著關(guān)鍵性作用。大量研究已經(jīng)證實(shí)了支原體疫苗帶來的經(jīng)濟(jì)效益，使用肺炎支原體疫苗可以降低肺炎發(fā)生率和與肺炎支原體感染有關(guān)的經(jīng)濟(jì)損失，在感染嚴(yán)重的豬場其效益和成本的比例可以達(dá)到5∶1。

目前國內(nèi)應(yīng)用的豬肺炎支原體疫苗包括弱毒活疫苗和滅活苗，活疫苗由于胸腔注射途徑難于掌握，副反應(yīng)較大，因此推廣受到限制，而滅活疫苗特別是新型佐劑和雙重佐劑的疫苗在田間顯示出對豬支原體肺炎較為理想的控制效果?，F(xiàn)僅從以下幾個(gè)方面對豬肺炎支原體弱毒活疫苗和滅活苗的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行比較分析，以期為豬肺炎支原體疫苗的臨床選用提供參考。

（一）弱毒活疫苗和滅活苗特征

1.弱毒活疫苗。

在國內(nèi),弱毒活疫苗主要有豬肺炎支原體兔化弱毒苗和168株無細(xì)胞培養(yǎng)弱毒苗,它們分別由北京獸藥監(jiān)察所和江蘇農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所研制成功。豬肺炎支原體弱毒活疫苗采用胸腔和肺部注射的免疫途徑不易為一般用戶接受,因而在推廣應(yīng)用上受到一定限制。

豬肺炎支原體兔化弱毒苗于1989年由北京獸藥監(jiān)察所研制成功，該疫苗采用濟(jì)南強(qiáng)毒株在乳兔山連續(xù)傳代致弱后獲得兔化弱毒株，經(jīng)配苗凍干后制成兔化弱毒苗。經(jīng)臨床試用證明，該毒株制成的疫苗安全有效，能使80%的免疫豬在強(qiáng)度攻擊后肺部組織不出現(xiàn)任何病變，而對照組全部發(fā)病。

豬肺炎支原體168株無細(xì)胞弱毒苗于2006年由江蘇省農(nóng)科院獸醫(yī)研究所和南京天邦生物科技有限公司研制成功，該疫苗采用豬支原體肺炎168株，通過無細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)繁獲得大量抗原，經(jīng)配苗凍干后制成弱毒活疫苗。

豬支原體肺炎168株分離于1979年甘肅省蘭州市安寧區(qū)豬肺炎支原體強(qiáng)毒株人工感染發(fā)病的168號(hào)二花臉豬，經(jīng)3次克隆化培養(yǎng)，無細(xì)胞培養(yǎng)340代次，人工致弱為弱毒菌株。經(jīng)過漫長的致弱過程，豬肺炎支原體的毒力基因發(fā)生了改變，通過大量的實(shí)驗(yàn)室與臨床試驗(yàn)，證明168弱毒株具有其獨(dú)特穩(wěn)定的基因特征，安全性穩(wěn)定，同時(shí)具有良好的免疫原性。

2.滅活苗。

國內(nèi)目前應(yīng)用的豬支原體肺炎滅活苗主要從國外進(jìn)口，如美國輝瑞公司生產(chǎn)的“瑞倍適”、“瑞倍適-旺”和“瑞富特”，美國梅里亞公司生產(chǎn)的“豬克喘”，美國先靈葆雅公司生產(chǎn)的“安百克”，德國勃林格公司生產(chǎn)的“茵格發(fā)”，西班牙海博萊公司生產(chǎn)的“喜可舒”等，這些疫苗都是利用新型佐劑研制成功的豬肺炎支原體滅活疫苗,并進(jìn)行了商品化生產(chǎn),其共同點(diǎn)是可以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答。

瑞富特滅活苗由美國輝瑞公司生產(chǎn)，選用二乙烯亞胺（BEI）作為滅活劑，使P97蛋白暴露出來（P97蛋白被普遍認(rèn)為是保護(hù)性抗原），可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生更好的局部黏膜免疫和細(xì)胞免疫。它既保持了菌體的完整性，又大大提高了疫苗的免疫原性。瑞富特應(yīng)用Carbopol水質(zhì)佐劑，它是一種交聯(lián)的丙烯酸聚合物，具有5項(xiàng)主要功能：①有效濃縮抗原；②使不溶的成分持久懸浮；③使水包油乳劑穩(wěn)定;④使抗原緩慢釋放，促進(jìn)抗原遞呈給效應(yīng)細(xì)胞，顯著加強(qiáng)免疫反應(yīng)和免疫效率；⑤促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生更高水平的體液抗體和細(xì)胞免疫力，更快速啟動(dòng)免疫系統(tǒng)和增強(qiáng)保護(hù)力。同時(shí)，該佐劑免疫應(yīng)激微弱，不激發(fā)豬圓環(huán)病毒復(fù)制。

豬克喘滅活苗由美國梅利亞公司生產(chǎn)，采用豬肺炎原體BQ14株和菌膜蛋白雙效抗原，以水性氫氧化鋁膠為佐劑，提升了疫苗保護(hù)力，有效降低支原體危害。水性氫氧化鋁佐劑能快速釋放抗原，對3日齡豬免疫注射依然安全，初生豬早期免疫阻斷產(chǎn)房仔豬感染，有效地保護(hù)仔豬。

瑞倍適和瑞倍適-旺滅活苗于1990年由美國輝瑞公司研制并商品化生產(chǎn)，該疫苗含有化學(xué)滅活的肺炎支原體全部細(xì)胞培養(yǎng)物，采用純化的天然油質(zhì)Amphigen佐劑，疫苗安全無副作用，在實(shí)驗(yàn)條件下，疫苗不能預(yù)防感染，但能減輕臨床癥狀和肺炎病變。經(jīng)臨床試驗(yàn)證明免疫豬用同源菌、異源菌攻毒后，肺臟受損程度分別下降82%和91%，具有增加增重、縮短飼養(yǎng)期及降低多殺性巴氏桿菌和胸膜肺炎放線桿菌感染的效果。田間研究證實(shí)，用豬肺炎支原體滅活疫苗免疫，能有效降低肺病變程度及屠宰豬支氣管肺炎的發(fā)生率。但是在當(dāng)今我國豬場豬圓環(huán)病毒2型陽性率非常高的現(xiàn)實(shí)情況下，應(yīng)該謹(jǐn)慎使用油質(zhì)佐劑的豬肺炎支原體疫苗，以免由于油質(zhì)佐劑導(dǎo)致PMWS的風(fēng)險(xiǎn)。

（二）弱毒活疫苗和滅活苗免疫機(jī)理

在豬肺炎支原體的抗感染免疫中，體液免疫、細(xì)胞免疫和黏膜免疫所扮演的角色及抗感染機(jī)制不同。有證據(jù)表明，在抗豬肺炎支原體感染中抗體僅起到部分保護(hù)作用，保護(hù)性免疫主要基于細(xì)胞免疫和豬呼吸道黏膜IgA的分泌。鄧均華等認(rèn)為豬呼吸道的免疫屬于黏膜免疫,主要通過呼吸道黏膜上皮分泌的IgA(sIgA)抑制病原體對細(xì)胞的黏附作用。此外,豬肺炎支原體主要侵襲豬的呼吸道上皮纖毛頂端,而體液循環(huán)抗體不容易到達(dá)該部位,即使通過免疫接種后,在血清中檢測到高滴度的抗體,也不一定能對豬呼吸道提供理想的的抵抗病原入侵的作用。

研究證明,豬肺炎支原體168株活疫苗能同時(shí)刺激產(chǎn)生體液免疫（循環(huán)抗體）、局部黏膜免疫（分泌型IgA）以及細(xì)胞免疫3種免疫效應(yīng),免疫效力堅(jiān)強(qiáng)而持久,只需正確接種1次,便可在2周內(nèi)產(chǎn)生保護(hù)力,1個(gè)月抗同群感染,2個(gè)月抗強(qiáng)毒感染,免疫期可達(dá)6個(gè)月。

豬肺炎支原體的免疫應(yīng)答主要以細(xì)胞免疫為主,而滅活疫苗卻主要激發(fā)動(dòng)物機(jī)體的體液免疫,因此以體液免疫為主的常規(guī)滅活疫苗免疫效力很低。目前已經(jīng)商品化生產(chǎn)的豬肺炎支原體滅活苗大多采用新型佐劑，如Carbopol水質(zhì)佐劑和Amphigen佐劑，可以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。

（三）疫苗免疫接種方法

豬肺炎支原體168株活疫苗采用“蘇氣”穴肺內(nèi)注射，即疫苗按瓶簽注射頭份用滅菌生理鹽水稀釋后,在右側(cè)肩胛骨后緣沿中軸線向后2～3肋間,用9號(hào)短針頭垂直進(jìn)針注射1頭份（0.5 ml）。仔豬在5～7日齡免疫接種1次即可，1個(gè)月后產(chǎn)生免疫力，免疫期9個(gè)月以上。免疫前后1～2周禁用抗支原體的藥物(如土霉素、壯觀霉素、卡那霉素、林肯霉素、泰樂菌素等)等，但可用青霉素、鏈霉素、阿莫西林、頭孢菌素控制藍(lán)耳病及細(xì)菌感染。

豬克喘滅活苗采用耳后頸部深度肌肉注射，3日齡至10周齡豬進(jìn)行第一次免疫，3周后進(jìn)行第二次免疫，每頭豬每次注射2 ml。

瑞倍適滅活苗采用肌肉注射接種，哺乳仔豬在1和3周齡各免疫1次，懷孕母豬分娩前2周免疫1次，公豬每隔半年加強(qiáng)免疫1次，每次2 ml，肌肉注射。免疫期6個(gè)月。

（四）疫苗免疫效力

趙卓等用豬支原體肺炎活疫苗對1～2月齡健康仔豬進(jìn)行免疫接種，免疫后60 d進(jìn)行攻毒保護(hù)試驗(yàn)并剖殺進(jìn)行肺臟特異性病變觀察，根據(jù)肺臟病變計(jì)分計(jì)算肺炎減少率達(dá)到80%以上。劉茂軍等用豬支原體肺炎活疫苗(168株)對7 000多頭豬進(jìn)行了臨床免疫試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)免疫豬群支原體肺炎發(fā)病率減少，肺部病變減輕，有效控制率達(dá)80%以上，許多豬場達(dá)90%，生產(chǎn)指標(biāo)有明顯提高。蘇國東等對豬支原體肺炎活疫苗(168株)進(jìn)行了免疫效力試，結(jié)果表明豬支原體肺炎活疫苗(168株)免疫仔豬60 d后，免疫保護(hù)率達(dá)80%以上，免疫后7個(gè)月保護(hù)率仍有50%以上，說明豬支原體肺炎活疫苗(168株)具有很好的免疫效力。

Reynolds等用滅活疫苗進(jìn)行免疫保護(hù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用過疫苗的試驗(yàn)豬抗體滴度均比非免疫豬高，肺臟評(píng)分均比非免疫組低。Tzivara等對兩個(gè)豬場進(jìn)行豬支原體肺炎滅活疫苗的療效試驗(yàn)，結(jié)果表明免疫豬沒有豬支原體肺炎臨床癥狀，肺臟病變指數(shù)比非免疫豬低，增重比非免疫豬平均高4～6 kg。這些結(jié)果說明豬支原體肺炎滅活疫苗從免疫效果看確實(shí)有效。

大量的免疫試驗(yàn)和臨床已經(jīng)證實(shí)了豬肺炎支原體疫苗可有效預(yù)防支原體感染，減輕肺臟損傷，誘導(dǎo)血清抗體和呼吸道局部免疫抗體，誘導(dǎo)細(xì)胞免疫。既可以減少降低肺炎的發(fā)病率、減輕感染壓力，還可以提高免疫豬群的生長速度、降低飼料消耗，增加經(jīng)濟(jì)收益。