人布魯氏菌病的流行、檢測(cè)與防治研究進(jìn)展

邱宇鶴 王錦 何淑云

布魯氏菌病是由布魯氏菌屬細(xì)菌感染引起的分布廣泛的人畜共患傳染病，多種動(dòng)物可作為布魯氏菌的宿主，人類對(duì)其普遍易感。布魯氏菌病不僅影響畜牧業(yè)和相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，造成社會(huì)經(jīng)濟(jì)損失，并且對(duì)人類的健康構(gòu)成重大威脅［1］，我國《傳染病防治法》規(guī)定其為乙類傳染病，美國疾病預(yù)防控制中心將布魯氏菌列為潛在的生物恐怖戰(zhàn)劑［2，3］。上世紀(jì)末以來，人布魯氏菌病在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率呈上升態(tài)勢(shì)，每年新發(fā)病例數(shù)超過50萬例，已成為重要的國際性公共衛(wèi)生問題［4］。本文從病原學(xué)、流行特點(diǎn)、診斷檢測(cè)、疾病治療與預(yù)防等方面對(duì)人布魯氏菌病的研究進(jìn)展做一綜述。

1 病原學(xué)與流行特點(diǎn)

布魯氏菌是兼性胞內(nèi)寄生的革蘭氏陰性球狀、球桿狀或短桿狀細(xì)菌，根據(jù)生物學(xué)特性和主要宿主，傳統(tǒng)的布魯氏菌分類包括6個(gè)種19個(gè)型，即羊種（B.melitensis，3個(gè)型）、牛種（B.abortus，8 個(gè)型）、豬種（B.suis，5 個(gè)型）、犬種（B.canis）、綿羊附睪種（B.ovis）和沙林鼠種（B.neotomae），近年來又相繼分離出鯨種（B.ceti）、鰭種（B.pinnipedialis）、田鼠種（B.microti）和未知宿主的 B.inopinata［5］。布魯氏菌的不同種型之間致病能力存在差異，其中以羊種、牛種和豬種對(duì)人類危害最大，犬種也有一定影響［1］。

布魯氏菌在自然環(huán)境中抵抗力較強(qiáng)，可以通過呼吸道、消化道和皮膚黏膜等多種途徑傳播，人感染的途徑主要是接觸攜帶病原體的動(dòng)物或食用被污染的動(dòng)物產(chǎn)品，罕見人與人之間的直接傳播，因此人布魯氏菌病的危險(xiǎn)人群分布與職業(yè)、飲食、環(huán)境和生活特點(diǎn)等具有相關(guān)性。Nasinyama等［6］的研究顯示，攝入未煮沸的牛奶和烏干達(dá)Mbarara區(qū)人群的血清布魯氏菌陽性情況顯著相關(guān)，但不同年齡和性別人群并無差異。Rodríguez－Morales［7］對(duì) 1990年至 2000年間墨西哥地區(qū)人布魯氏菌病例情況和海洋厄爾尼諾指數(shù)的比較研究發(fā)現(xiàn)，厄爾尼諾年的發(fā)病數(shù)有所上升，表明氣候變化和布魯氏菌病的發(fā)病有關(guān)。在我國，近年來隨著畜牧業(yè)的發(fā)展和旅游業(yè)的興盛，人布魯氏菌病疫情的空間分布有了進(jìn)一步擴(kuò)散趨勢(shì)。2005年－2010年，我國共報(bào)告了155 979個(gè)新發(fā)病例，6年內(nèi)人布魯氏菌病發(fā)病率大幅度提高，從1.41／100 000上升至2.56／100 000，病例的報(bào)告省份由2005年的18個(gè)擴(kuò)大為30個(gè)，疫情形勢(shì)嚴(yán)峻［8］。值得關(guān)注的是，接觸含有布魯氏菌病原體樣本的實(shí)驗(yàn)室工作人員也存在暴露感染的風(fēng)險(xiǎn)，是最常見的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染之一［9］。其主要傳播途徑為氣溶膠暴露，同時(shí)也可能經(jīng)由皮膚直接接觸等方式傳播。

2 診斷檢測(cè)

人感染布魯氏菌病臨床癥狀表現(xiàn)復(fù)雜，缺乏特異性，可影響多種器官和系統(tǒng)，不易與其他疾病相區(qū)別，因此其診斷需要結(jié)合流行病學(xué)史、臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果來進(jìn)行，其中實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是確診的重要依據(jù)［10］。目前，常用的布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有分離培養(yǎng)、血清學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)。

2.1 分離培養(yǎng) 從血液、骨髓或其他組織培養(yǎng)分離細(xì)菌是檢測(cè)布魯氏菌病的金標(biāo)準(zhǔn)，而該方法對(duì)于操作時(shí)的生物安全防護(hù)要求嚴(yán)格、耗時(shí)長(zhǎng)、陽性檢出率較低，并且抗生素的使用、布魯氏菌的濃度和培養(yǎng)條件等都會(huì)對(duì)分離結(jié)果產(chǎn)生影響。Mantur等［11］對(duì)103例人布魯氏菌病患者的檢測(cè)結(jié)果顯示，骨髓培養(yǎng)（82.5%）的靈敏度高于血培養(yǎng)（45.6%），同時(shí)可以降低平均檢測(cè)時(shí)間。但是從減輕患者痛苦的角度考慮，骨髓培養(yǎng)應(yīng)該僅限制性的應(yīng)用于特定病例檢測(cè)［12］。

2.2 血清學(xué)檢測(cè) 血清學(xué)檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室常用的方法，包括虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)（serum tube agglutination test，STAT）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、抗人球蛋白試驗(yàn)（coombs＇test，CT）、2－琉基乙醇試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme－linked immunosorbent assay，ELISA）等。免疫捕獲凝集試驗(yàn)（immuncapture agglutination test，IcAT）是建立在雙抗體夾心ELISA 上的一種新的血清學(xué)檢測(cè)方法，Sangüzel等［13］對(duì)STAT、CT和IcAT檢測(cè)方法進(jìn)行比較性研究發(fā)現(xiàn)，三者的靈敏度分別為 41.6%，85.7%和95.2%；我國趙娜等［14］對(duì) IcAT和雙抗體夾心ELISA法的對(duì)比研究也發(fā)現(xiàn)，IcAT的特異性、符合率、Kappa值和受試者工作特征曲線下面積均高于ELISA，是一種可靠有效的診斷方法。

2.3 分子生物學(xué)檢測(cè) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）作為一種具有較高的靈敏度和特異性的分子生物學(xué)檢測(cè)方法，近年來越來越受到人們關(guān)注。PCR操作相對(duì)安全簡(jiǎn)便，工作周期短，可以為人布魯氏菌病患者提供早期、快捷的臨床檢測(cè)，也可以應(yīng)用于治療后的隨訪工作［15］。Kamal等［16］對(duì) 61例急性發(fā)熱性患者的研究發(fā)現(xiàn)，通過twostage PCR檢出50例（81.9%）布魯氏菌陽性，而血清學(xué)只檢出44例陽性（72%），證明了其作為快速診斷工具的優(yōu)勢(shì)。同時(shí)分子生物學(xué)方法能從基因水平上開展布魯氏菌分型鑒定和進(jìn)化分析等研究。

3 疾病的治療與預(yù)防

布魯氏菌為兼性細(xì)胞內(nèi)寄生，易逃避抗生素的作用和宿主的免疫應(yīng)答，人布魯氏菌病的治療目的主要是縮短病程、防止疾病的復(fù)發(fā)以及避免并發(fā)癥如腦膜炎、脊椎炎、心內(nèi)膜炎的發(fā)生等。目前人布魯氏菌病的治療方案以抗生素聯(lián)合治療為主，對(duì)于部分有并發(fā)癥的病例必要時(shí)可給予相應(yīng)外科手術(shù)治療［17］。我國采用中醫(yī)及中西醫(yī)結(jié)合療法也取得了一定效果，郭鳳蘭［18］對(duì)96例人布魯氏菌病患者進(jìn)行中西醫(yī)結(jié)合治療的結(jié)果觀察發(fā)現(xiàn)，治療的總有效率為99.0%，治愈率為85.4%，表現(xiàn)出良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

由于感染動(dòng)物是布魯氏菌病的主要傳染源，從防控動(dòng)物布魯氏菌病著手是防控布病最有效、最經(jīng)濟(jì)的方法，其中接種疫苗為重要的防控手段［4］。當(dāng)前應(yīng)用于預(yù)防動(dòng)物布魯氏菌病的疫苗包括滅活疫苗、活疫苗和亞單位疫苗等新型疫苗，其中活疫苗成本較低廉，其免疫效果優(yōu)于滅活疫苗，在當(dāng)前應(yīng)用中占主要地位，常見的包括牛種S19、牛種RB51、羊種Rev.1、豬種S2疫苗等，新興的亞單位疫苗雖然能夠保證對(duì)動(dòng)物和人的安全性，但與活疫苗相比在免疫原性上存在差距，且生產(chǎn)成本高昂［19］。目前尚無可大范圍推廣應(yīng)用的人用布魯氏菌病疫苗，對(duì)于未來人用疫苗的研發(fā)工作，必須要同時(shí)考慮安全性和有效性，以用于對(duì)職業(yè)人群和流行區(qū)居民的防護(hù)以及應(yīng)對(duì)生物恐怖風(fēng)險(xiǎn)［20］。

4 展望

人布魯氏菌病與動(dòng)物疫情密切相關(guān)，面對(duì)近年來發(fā)病趨勢(shì)上升的挑戰(zhàn)，需要多部門統(tǒng)一規(guī)劃、綜合干預(yù)，加強(qiáng)畜牧業(yè)生產(chǎn)管理、基礎(chǔ)設(shè)施和技術(shù)隊(duì)伍建設(shè)，切實(shí)保證食品安全，做好公共衛(wèi)生和臨床診治工作。在這個(gè)協(xié)作體系中，疾病預(yù)防控制部門所承擔(dān)的職責(zé)十分重要，需要從流行病學(xué)的角度規(guī)范做好疫情監(jiān)測(cè)，及時(shí)把握疫情動(dòng)態(tài)和流行規(guī)律，提高疫情預(yù)警預(yù)測(cè)能力，為制定合理有效的疾病預(yù)防控制措施提供科學(xué)依據(jù)，進(jìn)一步對(duì)目標(biāo)人群有效開展行為干預(yù)，提高人布魯氏菌病防控效率。同時(shí)要大力開展疾病防控知識(shí)的培訓(xùn)指導(dǎo)和宣傳教育工作，提高全社會(huì)特別是重點(diǎn)人群的防護(hù)意識(shí)和能力，保持健康正確的工作和生活習(xí)慣。

1 Olsen SC，Palmer MV.Advancement of knowledge of Brucella over thepast 50 years.Vet Pathol，2014，51：1076－1089.

2 中華人民共和國衛(wèi)生部.布魯氏菌病診療指南（試行）.傳染病信息，2012，25：323－324.

3 Doganay GD，Doganay M.Brucella as a potential agent of bioterrorism.Recent Pat Antiinfect Drug Discov，2013，8：27－33.

4 Gwida M，Al Dahouk S，Melzer F，etal.Brucellosis－regionally emergingzoonotic disease？ Croat Med J，2010，51：289－295.

5 O＇Callaghan D，Whatmore AM.Brucella genomics as we enter the multi－genomeera.Brief Funct Genomics，2011，10：334－341.

6 Nasinyama G，Ssekawojwa E，Opuda J，etal.Brucella sero－prevalence and modifiable risk factors among predisposed cattle keepers and consumers of un－pasteurized milk in Mbarara and Kampala districts，Uganda.Afr Health Sci，2014，14：790－796.

7 Rodríguez－Morales AJ.Climate change，climate variability and brucellosis.Recent Pat Antiinfect Drug Discov，2013，8：4－12.

8 Zhong Z，Yu S，Wang X，etal.Human brucellosis in the People＇s Republic of China during 2005－2010.Int J Infect Dis，2013，17：e289－e292.

9 Traxler RM，Lehman MW，Bosserman EA，etal.A literature review of laboratory－acquired brucellosis.JClin Microbiol，2013，51：3055－3062.

10 Galińska EM，Zagórski J.Brucellosis in humans－－etiology，diagnostics，clinical forms.Ann Agric Environ Med，2013，20：233－238.

11 Mantur BG，Mulimani MS，Bidari LH，etal.Bacteremia is as unpredictable as clinical manifestations in human brucellosis.Int JInfect Dis，2008，12：303－307.

12 Al Dahouk S，Sprague LD，Neubauer H.New developmentsin thediagnostic procedures for zoonotic brucellosisin humans.Rev Sci Tech，2013，32：177－188.

13 Sangüzel FM，Kayman T，Celik I，etal.Comparison of standard tube agglutination，Coombs’ and BrucellaCapt tests in the diagnosis of brucellosis.New JMed，2011，28：113－115.

14 趙娜，趙赤鴻，榮蓉，等.布魯氏菌病血清學(xué)Brucellacapt和iELISA檢測(cè)方法的比較.中國人獸共患病學(xué)報(bào)，2014，30：1045－1047.

15 Wang Y，Wang Z，Zhang Y，etal.Polymerase chain reaction－based assays for the diagnosisof human brucellosis.Ann Clin Microbiol Antimicrob，2014，13：31.

16 Kamal IH，Al Gashgari B，Moselhy SS，etal.Two－stage PCR assay for detection of human brucellosis in endemic areas.BMCInfect Dis，2013，13：145.

17 Herrick JA，Lederman RJ，Sullivan B，etal.Brucellaarteritis：clinical manifestations，treatment，and prognosis.Lancet Infect Dis，2014，14：520－526.

18 郭鳳蘭.中西醫(yī)結(jié)合治療布魯氏菌病的臨床療效觀察.中國傷殘醫(yī)學(xué)，2014，22：168－169.

19 Yang X，Skyberg JA，Cao L，etal.Progress in Brucella vaccine development.Front Biol（Beijing），2013，8：60－77.

20 Perkins SD，Smither SJ，Atkins HS.Towards a Brucella vaccine for humans.FEMSMicrobiol Rev，2010，34：379－394.