396株女性生殖道感染細(xì)菌的分布及耐藥性分析

泰淑紅 何路 邵艷 李輝 賈莉婷

300000 天津市，天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖與組織胚胎學(xué)系（何路）

目前女性生殖道感染發(fā)病率越來(lái)越高，耐藥的菌群也越來(lái)越多，為了能更好地明確女性生殖道感染常見(jiàn)病原菌及其耐藥情況，便于指導(dǎo)治療。本文對(duì)我院2011年1月－2014年6月婦科門(mén)診及住院患者送檢的宮頸分泌物標(biāo)本中分離出的396株病原菌及其藥敏結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2011年1月－2014年6月我院婦科門(mén)診及住院需進(jìn)行宮頸檢查的患者396例，年齡 18～50 歲，平均年齡（33.52±7.65）歲。采集患者的宮頸分泌物進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)。剔除同一患者相同部位的重復(fù)標(biāo)本。

1.2 儀器與試劑 所有菌株采用DL－96細(xì)菌鑒定分析系統(tǒng)（珠海迪爾生物工程有限公司）進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)。血瓊脂平板、真菌顯色平板購(gòu)于鄭州安圖生物有限公司。

1.3 方法

1.3.1 分離培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn) 將標(biāo)本分別轉(zhuǎn)種于血瓊脂平板，真菌顯色平板，放入隔水式二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24－48 h后分離純菌，經(jīng)革蘭染色鏡檢后，選擇相應(yīng)的DL－96試劑板。取純培養(yǎng)單個(gè)菌落于稀釋液瓶?jī)?nèi)研磨成菌懸液，均勻滴于試劑板小孔內(nèi)，然后將試劑板放入35～37℃的溫箱孵育18－24 h，最后將試劑板放入DL－96細(xì)菌鑒定分析系統(tǒng)，判讀菌種種屬及抗菌藥物最低抑菌濃度結(jié)果。藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)按照2013年版CLSI標(biāo)準(zhǔn)判讀。

1.3.2 質(zhì)控菌株 質(zhì)控菌株大腸埃希菌 ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、銅綠假單胞菌ATCC27853均購(gòu)自衛(wèi)生部臨檢中心。

1.3.3 超廣譜 β 內(nèi)酰胺酶（extended－spectrum betalactamases，ESBLs）檢測(cè) 通過(guò)頭孢他啶、頭孢噻肟和頭孢他啶／克拉維酸、頭孢噻肟／克拉維酸復(fù)合紙片對(duì)待檢菌的抑制作用進(jìn)行測(cè)定，當(dāng)任何一種復(fù)合紙片抑菌圈直徑大于或等于其單獨(dú)藥敏紙片抑菌圈直徑5 mm時(shí)，可確證該菌株為產(chǎn)ESBLs菌。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用WHONET 5.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

表1 396株細(xì)菌中革蘭陽(yáng)性球菌的菌種分布與檢出率

表2 396株細(xì)菌中革蘭陰性桿菌的菌種分布與檢出率

表3 396株細(xì)菌中真菌的菌種分布與檢出率

2.1 女性生殖道分離細(xì)菌的菌種分布情況 396株病原菌中，革蘭陽(yáng)性球菌137株（34.60%），其中糞腸球菌檢出率最高，為 9.34%（37株），其次為屎腸球菌（33 株，8.33%）；革蘭陰性桿菌 102 株（25.76%），其中大腸埃希菌的檢出率最高，為12.63%（50株），其次為肺炎克雷伯菌（13株，3.28%）；真菌 157 株（39.65%），其中白假絲酵母菌的檢出率最高，為27.27%（108株），其次為光滑假絲酵母菌（36 株，9.09%），見(jiàn)表1～3。

2.2 396株病原菌中糞腸球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析 對(duì)革蘭陽(yáng)性球菌、革蘭陰性桿菌和真菌中檢出率最高的糞腸球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。其中37株糞腸球菌對(duì)紅霉素的耐藥率最高，達(dá)91.89%，其次為四環(huán)素（78.38%），而對(duì)替考拉寧的耐藥率為0.00%；50株大腸埃希菌對(duì)氨芐西林的耐藥率最高，達(dá)80.00%，其次為四環(huán)素和復(fù)方新諾明，耐藥率均為74.00%，而對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為0.00%，50株大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌株為28株；108株白假絲酵母菌對(duì)伊曲康唑的耐藥率最高，為59.26%，對(duì)兩性霉素 B 的耐藥率最低，為 1.85%，見(jiàn)表4～6。

表4 37株糞腸球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥情況

表5 50株大腸埃希菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥情況

3 討論

表6 108株白假絲酵母菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥情況

女性下生殖道感染菌的主要來(lái)源是陰道微生態(tài)群落中的條件致病菌，如大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、β溶血性鏈球菌、假絲酵母菌、滴蟲(chóng)以及支原體等。目前對(duì)滴蟲(chóng)、支原體、衣原體、加德納菌感染的治療效果較好，然而其他細(xì)菌、真菌引起的生殖道感染，由于其耐藥性普遍存在，需要臨床根據(jù)藥敏結(jié)果來(lái)選用適宜的藥物進(jìn)行治療。對(duì)于B族溶血性鏈球菌引起的生殖道感染已經(jīng)得到普遍重視，認(rèn)為該種細(xì)菌感染可導(dǎo)致嚴(yán)重母兒并發(fā)癥［1－3］，對(duì)于其他細(xì)菌引起的生殖道感染認(rèn)為有自覺(jué)癥狀且細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性者，需進(jìn)行規(guī)范抗生素治療。國(guó)外有文獻(xiàn)［4，5］報(bào)道細(xì)菌性陰道疾病會(huì)導(dǎo)致不良圍產(chǎn)結(jié)局，包括自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎膜早破、宮內(nèi)感染以及圍產(chǎn)兒并發(fā)癥等。因此，了解女性生殖道感染致病菌的情況，并及時(shí)有效地進(jìn)行治療是降低女性圍產(chǎn)期不良妊娠結(jié)局可能性的重要措施之一。

本文研究對(duì)我院婦科生殖道感染患者分離出的396株病原菌進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，革蘭陽(yáng)性球菌、革蘭陰性桿菌和真菌均有檢出，其中糞腸球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌的檢出率最高，分別為9.34%（37／396），12.63%（50／396）和27.27%（108／396）。由此可見(jiàn)，糞腸球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌是臨床女性生殖道細(xì)菌感染最常見(jiàn)的致病菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，糞腸球菌對(duì)紅霉素和四環(huán)素的耐藥率較高，對(duì)氨芐西林耐藥率僅為8.11%，然而對(duì)高濃度慶大霉素耐藥率高達(dá)59.46%，對(duì)于重癥腸球菌感染患者聯(lián)合用藥出現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)的概率只有40.54%，故檢測(cè)腸球菌高濃度氨基糖苷類(lèi)藥敏試驗(yàn)，對(duì)臨床用藥具有重要的指導(dǎo)意義。本文研究發(fā)現(xiàn)1例耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌，未發(fā)現(xiàn)耐替考拉寧的糞腸球菌；大腸埃希菌對(duì)氨芐西林、氨芐西林／他唑巴坦、阿莫西林／克拉維酸、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢吡肟、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、慶大霉素、氨曲南、四環(huán)素和復(fù)方新諾明的耐藥率均高于40.00%，因此均不能作為臨床經(jīng)驗(yàn)性治療的首選藥物，對(duì)頭孢西丁、哌拉西林／他唑巴坦、阿米卡星、亞胺培南、美羅培南和頭孢哌酮／舒巴坦的敏感率較高，其中對(duì)亞胺培南和美羅培南的敏感率達(dá)100.0%；白假絲酵母菌對(duì)伊曲康唑的耐藥率最高，為 59.26%，其次為氟康唑（10.19%），而真菌中檢出率位列第二的光滑假絲酵母菌對(duì)氟康唑的耐藥率為63.89%，可見(jiàn)不同真菌對(duì)不同的抗真菌藥物的耐藥性有一定的差異，因此臨床上應(yīng)高度重視生殖道真菌感染的病原菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)結(jié)果，合理用藥，才能夠有效地控制耐藥現(xiàn)象快速發(fā)展的趨勢(shì)。

不同病原菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率差別很大，因此及時(shí)了解女性生殖道感染細(xì)菌的分布和耐藥情況，對(duì)臨床合理使用抗菌藥物，做好抗菌藥物的宏觀管理，避免對(duì)其濫用，減少耐藥現(xiàn)象的發(fā)生有極其重要的意義。

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