EV71感染重癥病例外周血淋巴細(xì)胞亞群分析及意義

王文杰+朱洪峰+岳屹囡

【摘要】目的對(duì)EV71感染重癥病例及健康對(duì)照組患兒進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定及分析，以期能為臨床工作提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法采用流式細(xì)胞儀術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群CD3T淋巴細(xì)胞（%）、CD4T淋巴細(xì)胞（%）、CD8T淋巴細(xì)胞（%）、CD4/CD8比值。結(jié)果EV71重癥重型組較對(duì)照組CD3、CD4、CD8百分比升高； EV71重癥危重型組較其余2組CD3、CD4百分比減低， CD4/CD8比值降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論EV71感染重癥病例細(xì)胞免疫功能存在異常。

【關(guān)鍵詞】EV71感染；外周血淋巴細(xì)胞亞群

【中圖分類號(hào)】R512.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

1. 資料與方法

近幾年來(lái)，EV71感染呈逐年上升趨勢(shì)，其中重癥病例發(fā)病率增高，死亡率及致殘率高，社會(huì)危害極大，已引起社會(huì)各界的高度關(guān)注。為探討機(jī)體免疫功能變化與EV71重癥病例發(fā)病機(jī)制及病情進(jìn)展的關(guān)系，本文對(duì)2011-2013年間收入本院兒童搶救室的62例EV71感染重癥病例進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群分析，現(xiàn)報(bào)道如下：

1.1 一般資料

回顧并收集2011年4月至2013年11月我院兒童搶救室收治的62例EV71重癥病例，將其分為重癥重型組32例、重癥危重型組30例；隨機(jī)抽取28例門診同期健康體檢兒童作為對(duì)照組。其中，重癥重型組男患兒21例，女患兒11例，年齡0.6-6歲，平均2.5±2.2歲；重癥危重型組男患兒20例，女患兒10例，年齡0.9-8歲，平均2.4±2.1歲；對(duì)照組男17例，女11例，年齡0.8-7.1歲，平均2.4±2.3歲。三組間年齡、性別比較無(wú)顯著差異，（P>0.05），無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 診斷依據(jù)：依據(jù)我國(guó)衛(wèi)生部HFMD臨床專家組共同制定的2011版《EV71感染重癥病例臨床救治專家共識(shí)》，62例患兒臨床符合診斷條件，62例患兒均于入院當(dāng)日采集糞便或肛拭子標(biāo)本送本市傳染病醫(yī)院做RT-PCR檢測(cè)，分離出腸道病毒EV71，為實(shí)驗(yàn)室確診EV71感染病例。32例重癥重型患兒中24例行腰椎穿刺檢查，另8例患兒家長(zhǎng)拒絕腰穿， 30例重癥危重型患兒中行腰椎穿刺者11例，另19例患兒因病情危重，未行腰穿檢查。

1.3 臨床表現(xiàn)

除發(fā)熱外，皮疹多不典型，手足等部位皮疹少，部分僅有口腔皰疹，重型患兒表現(xiàn)為嗜睡、意識(shí)障礙、噴射性嘔吐、頭痛、易驚、肢體抖動(dòng)、下肢無(wú)力等，危重型患兒除上述表現(xiàn)外，還伴有頻繁抽搐、昏迷、心率、呼吸增快、呼吸節(jié)律改變、肺水腫、肺出血等。

1.4 臨床轉(zhuǎn)歸及預(yù)后

32例重癥重型患兒中30例臨床治愈（93.8%），2例出現(xiàn)病情進(jìn)展，其中1例發(fā)生肺出血死亡（3.1%），1例家長(zhǎng)放棄（3.1%），30例重癥危重型患兒好轉(zhuǎn)14例（46.7%），其中6例（42.8%）留下不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。家長(zhǎng)放棄治療2例（6.6%），死亡14例（46.7%）。

1.5 試劑及儀器

運(yùn)用流式細(xì)胞儀（來(lái)自美國(guó)BD公司）測(cè)定外周血CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比及CD4/CD8比值。

1.6 方法

外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：所有患兒于入院后當(dāng)天或第二日清晨采靜脈血2mL，運(yùn)用流式細(xì)胞儀術(shù)進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群CD3（%）、CD4（%）、CD8（%）、CD4/CD8比值測(cè)定；

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布及方差齊，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，三組之間比較采用單因素方差分析，兩兩比較，采用LSD-t檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2. 結(jié)果

外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果，如表2所示：

2.1 三組之間CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比CD4/CD8比值測(cè)定，均存在差異（F= 344.408，563.806，57.31，227.111，P均<0.01），具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

2.2 與對(duì)照組相比，EV71重癥重型組CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比均升高（P均<0.01），差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； CD4/CD8比值變化不明顯（P=0.24>0.05）；EV71重癥危重型組CD3、CD4T淋巴細(xì)胞百分比降低（P均<0.01）；CD4/CD8比值降低（P< 0.01），CD8T淋巴細(xì)胞百分比升高（P<0.01），差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

2.3 EV71危重型組同重型組相比，CD3、CD4T淋巴細(xì)胞百分比、 CD4/CD8均減低，（P均< 0.01），差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而兩組之間CD8無(wú)明顯差異（P=0.575>0.05）；表2三組兒童CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比（%）及CD4/CD8比值 比較

3. 討論

EV71感染對(duì)象主要為5歲以下兒童，3歲以下的嬰幼兒為最易受累且重癥人群，發(fā)病率和死亡率均較高，具體原因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，研究表明，除了與EV71病毒本身毒力有關(guān)外，還可能與該年齡段患兒自身免疫狀態(tài)有關(guān)。嬰幼兒免疫系統(tǒng)功能發(fā)育尚不完善，特異性及非特異性免疫功能均低于成人，更易受到外界病原微生物的入侵[1]。

國(guó)內(nèi)外研究顯示，EV71病毒感染與機(jī)體的免疫反應(yīng)密切相關(guān)[2]。 目前能準(zhǔn)確反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的方法是檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群，大量證據(jù)表明：T淋巴細(xì)胞參與并介導(dǎo)了腸道病毒感染后的免疫發(fā)病機(jī)制；正常情況下， CD4 和CD8 T淋巴細(xì)胞作為機(jī)體免疫反應(yīng)最主要的2種效應(yīng)細(xì)胞，維持著機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。CD4對(duì)免疫應(yīng)答發(fā)揮正調(diào)節(jié)作用，增多提示細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，CD8對(duì)免疫應(yīng)答發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用，增多提示細(xì)胞免疫功能抑制；CD4/CD8比值表示輔助性T細(xì)胞（Th）與抑制性T細(xì)胞（Ts）之間功能處于相對(duì)平衡狀態(tài)，是衡量人體免疫系統(tǒng)是否協(xié)調(diào)、是否平穩(wěn)最重要的指標(biāo)，若兩者比值減低，或比值倒置，則標(biāo)志著輔助性T淋巴細(xì)胞功能相對(duì)不足， 細(xì)胞免疫功能減低，且不利于抗體產(chǎn)生，體液免疫功能亦減低，機(jī)體免疫功能出現(xiàn)紊亂。

眾多研究顯示EV71感染致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害患兒細(xì)胞免疫功能低下，表現(xiàn)為CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比減低，而本文研究顯示：EV71重癥重型組CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比均較其余2組升高，CD 4/CD8比值波動(dòng)在正常范圍。表明EV71重癥重型患兒中，機(jī)體細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，機(jī)體通過(guò)CD4T細(xì)胞釋放各種細(xì)胞因子發(fā)揮抗感染作用，并通過(guò)CD8殺傷性T細(xì)胞，清除病原體、殺傷靶細(xì)胞，此為機(jī)體為抵抗外界病毒的入侵的正常的保護(hù)性反應(yīng)。此時(shí)CD4/CD8比值不變，表明EV71重型患兒機(jī)體細(xì)胞免疫功能處于協(xié)調(diào)、穩(wěn)定狀態(tài)，能夠維持機(jī)體細(xì)胞免疫功能內(nèi)環(huán)境的平衡。此時(shí)增強(qiáng)的細(xì)胞免疫功能，則有利于宿主抵抗病毒感染，有利于病情恢復(fù)，病情趨于好轉(zhuǎn)或恢復(fù)，臨床中 EV71重癥重型患兒大部分能夠治愈（本文研究中該型腦炎患兒治愈率93.8%），考慮與機(jī)體當(dāng)時(shí)的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)有關(guān)。若病毒數(shù)量多，毒力強(qiáng)，導(dǎo)致病情繼續(xù)進(jìn)展或趨于惡化。本研究顯示EV71重癥危重型患兒CD3T淋巴細(xì)胞百分比、CD4T淋巴細(xì)胞百分比較其余2組均減低，CD8T淋巴細(xì)胞百分比增高，CD4/CD8比值倒置（<1），CD4、CD8正常的比例關(guān)系出現(xiàn)紊亂。表明當(dāng)病情處于危重期時(shí)，機(jī)體細(xì)胞免疫功能出現(xiàn)抑制狀態(tài)，并且機(jī)體免疫功能的平衡狀態(tài)被打破，免疫功能嚴(yán)重紊亂，推測(cè)可能為EV71重癥危重型患兒高死亡率原因之一。

綜上所述，適當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)加用適當(dāng)?shù)募?xì)胞免疫調(diào)節(jié)劑治療EV71重癥病例能否取得一定療效，值得臨床進(jìn)一步推廣驗(yàn)證！

參考文獻(xiàn)

[1]高寧，黨雙鎖，李梅.腸道病毒71型手足口病致神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)病機(jī)制的最新進(jìn)展[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志，2012，6（2）：162-164.

[2]Lin TY，Chang LY，Huang YC，eta1.Different proinflammatory reactions infatal and nonfatal enterovirus infections：implications for early ree-ognition and therapy[J].Aeta Paediatr，2002，91：633-636.

【摘要】目的對(duì)EV71感染重癥病例及健康對(duì)照組患兒進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定及分析，以期能為臨床工作提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法采用流式細(xì)胞儀術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群CD3T淋巴細(xì)胞（%）、CD4T淋巴細(xì)胞（%）、CD8T淋巴細(xì)胞（%）、CD4/CD8比值。結(jié)果EV71重癥重型組較對(duì)照組CD3、CD4、CD8百分比升高； EV71重癥危重型組較其余2組CD3、CD4百分比減低， CD4/CD8比值降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論EV71感染重癥病例細(xì)胞免疫功能存在異常。

【關(guān)鍵詞】EV71感染；外周血淋巴細(xì)胞亞群

【中圖分類號(hào)】R512.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

1. 資料與方法

近幾年來(lái)，EV71感染呈逐年上升趨勢(shì)，其中重癥病例發(fā)病率增高，死亡率及致殘率高，社會(huì)危害極大，已引起社會(huì)各界的高度關(guān)注。為探討機(jī)體免疫功能變化與EV71重癥病例發(fā)病機(jī)制及病情進(jìn)展的關(guān)系，本文對(duì)2011-2013年間收入本院兒童搶救室的62例EV71感染重癥病例進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群分析，現(xiàn)報(bào)道如下：

1.1 一般資料

回顧并收集2011年4月至2013年11月我院兒童搶救室收治的62例EV71重癥病例，將其分為重癥重型組32例、重癥危重型組30例；隨機(jī)抽取28例門診同期健康體檢兒童作為對(duì)照組。其中，重癥重型組男患兒21例，女患兒11例，年齡0.6-6歲，平均2.5±2.2歲；重癥危重型組男患兒20例，女患兒10例，年齡0.9-8歲，平均2.4±2.1歲；對(duì)照組男17例，女11例，年齡0.8-7.1歲，平均2.4±2.3歲。三組間年齡、性別比較無(wú)顯著差異，（P>0.05），無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 診斷依據(jù)：依據(jù)我國(guó)衛(wèi)生部HFMD臨床專家組共同制定的2011版《EV71感染重癥病例臨床救治專家共識(shí)》，62例患兒臨床符合診斷條件，62例患兒均于入院當(dāng)日采集糞便或肛拭子標(biāo)本送本市傳染病醫(yī)院做RT-PCR檢測(cè)，分離出腸道病毒EV71，為實(shí)驗(yàn)室確診EV71感染病例。32例重癥重型患兒中24例行腰椎穿刺檢查，另8例患兒家長(zhǎng)拒絕腰穿， 30例重癥危重型患兒中行腰椎穿刺者11例，另19例患兒因病情危重，未行腰穿檢查。

1.3 臨床表現(xiàn)

除發(fā)熱外，皮疹多不典型，手足等部位皮疹少，部分僅有口腔皰疹，重型患兒表現(xiàn)為嗜睡、意識(shí)障礙、噴射性嘔吐、頭痛、易驚、肢體抖動(dòng)、下肢無(wú)力等，危重型患兒除上述表現(xiàn)外，還伴有頻繁抽搐、昏迷、心率、呼吸增快、呼吸節(jié)律改變、肺水腫、肺出血等。

1.4 臨床轉(zhuǎn)歸及預(yù)后

32例重癥重型患兒中30例臨床治愈（93.8%），2例出現(xiàn)病情進(jìn)展，其中1例發(fā)生肺出血死亡（3.1%），1例家長(zhǎng)放棄（3.1%），30例重癥危重型患兒好轉(zhuǎn)14例（46.7%），其中6例（42.8%）留下不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。家長(zhǎng)放棄治療2例（6.6%），死亡14例（46.7%）。

1.5 試劑及儀器

運(yùn)用流式細(xì)胞儀（來(lái)自美國(guó)BD公司）測(cè)定外周血CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比及CD4/CD8比值。

1.6 方法

外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：所有患兒于入院后當(dāng)天或第二日清晨采靜脈血2mL，運(yùn)用流式細(xì)胞儀術(shù)進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群CD3（%）、CD4（%）、CD8（%）、CD4/CD8比值測(cè)定；

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布及方差齊，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，三組之間比較采用單因素方差分析，兩兩比較，采用LSD-t檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2. 結(jié)果

外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果，如表2所示：

2.1 三組之間CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比CD4/CD8比值測(cè)定，均存在差異（F= 344.408，563.806，57.31，227.111，P均<0.01），具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

2.2 與對(duì)照組相比，EV71重癥重型組CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比均升高（P均<0.01），差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； CD4/CD8比值變化不明顯（P=0.24>0.05）；EV71重癥危重型組CD3、CD4T淋巴細(xì)胞百分比降低（P均<0.01）；CD4/CD8比值降低（P< 0.01），CD8T淋巴細(xì)胞百分比升高（P<0.01），差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

2.3 EV71危重型組同重型組相比，CD3、CD4T淋巴細(xì)胞百分比、 CD4/CD8均減低，（P均< 0.01），差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而兩組之間CD8無(wú)明顯差異（P=0.575>0.05）；表2三組兒童CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比（%）及CD4/CD8比值 比較

3. 討論

EV71感染對(duì)象主要為5歲以下兒童，3歲以下的嬰幼兒為最易受累且重癥人群，發(fā)病率和死亡率均較高，具體原因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，研究表明，除了與EV71病毒本身毒力有關(guān)外，還可能與該年齡段患兒自身免疫狀態(tài)有關(guān)。嬰幼兒免疫系統(tǒng)功能發(fā)育尚不完善，特異性及非特異性免疫功能均低于成人，更易受到外界病原微生物的入侵[1]。

國(guó)內(nèi)外研究顯示，EV71病毒感染與機(jī)體的免疫反應(yīng)密切相關(guān)[2]。 目前能準(zhǔn)確反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的方法是檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群，大量證據(jù)表明：T淋巴細(xì)胞參與并介導(dǎo)了腸道病毒感染后的免疫發(fā)病機(jī)制；正常情況下， CD4 和CD8 T淋巴細(xì)胞作為機(jī)體免疫反應(yīng)最主要的2種效應(yīng)細(xì)胞，維持著機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。CD4對(duì)免疫應(yīng)答發(fā)揮正調(diào)節(jié)作用，增多提示細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，CD8對(duì)免疫應(yīng)答發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用，增多提示細(xì)胞免疫功能抑制；CD4/CD8比值表示輔助性T細(xì)胞（Th）與抑制性T細(xì)胞（Ts）之間功能處于相對(duì)平衡狀態(tài)，是衡量人體免疫系統(tǒng)是否協(xié)調(diào)、是否平穩(wěn)最重要的指標(biāo)，若兩者比值減低，或比值倒置，則標(biāo)志著輔助性T淋巴細(xì)胞功能相對(duì)不足， 細(xì)胞免疫功能減低，且不利于抗體產(chǎn)生，體液免疫功能亦減低，機(jī)體免疫功能出現(xiàn)紊亂。

眾多研究顯示EV71感染致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害患兒細(xì)胞免疫功能低下，表現(xiàn)為CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比減低，而本文研究顯示：EV71重癥重型組CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比均較其余2組升高，CD 4/CD8比值波動(dòng)在正常范圍。表明EV71重癥重型患兒中，機(jī)體細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，機(jī)體通過(guò)CD4T細(xì)胞釋放各種細(xì)胞因子發(fā)揮抗感染作用，并通過(guò)CD8殺傷性T細(xì)胞，清除病原體、殺傷靶細(xì)胞，此為機(jī)體為抵抗外界病毒的入侵的正常的保護(hù)性反應(yīng)。此時(shí)CD4/CD8比值不變，表明EV71重型患兒機(jī)體細(xì)胞免疫功能處于協(xié)調(diào)、穩(wěn)定狀態(tài)，能夠維持機(jī)體細(xì)胞免疫功能內(nèi)環(huán)境的平衡。此時(shí)增強(qiáng)的細(xì)胞免疫功能，則有利于宿主抵抗病毒感染，有利于病情恢復(fù)，病情趨于好轉(zhuǎn)或恢復(fù)，臨床中 EV71重癥重型患兒大部分能夠治愈（本文研究中該型腦炎患兒治愈率93.8%），考慮與機(jī)體當(dāng)時(shí)的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)有關(guān)。若病毒數(shù)量多，毒力強(qiáng)，導(dǎo)致病情繼續(xù)進(jìn)展或趨于惡化。本研究顯示EV71重癥危重型患兒CD3T淋巴細(xì)胞百分比、CD4T淋巴細(xì)胞百分比較其余2組均減低，CD8T淋巴細(xì)胞百分比增高，CD4/CD8比值倒置（<1），CD4、CD8正常的比例關(guān)系出現(xiàn)紊亂。表明當(dāng)病情處于危重期時(shí)，機(jī)體細(xì)胞免疫功能出現(xiàn)抑制狀態(tài)，并且機(jī)體免疫功能的平衡狀態(tài)被打破，免疫功能嚴(yán)重紊亂，推測(cè)可能為EV71重癥危重型患兒高死亡率原因之一。

綜上所述，適當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)加用適當(dāng)?shù)募?xì)胞免疫調(diào)節(jié)劑治療EV71重癥病例能否取得一定療效，值得臨床進(jìn)一步推廣驗(yàn)證！

參考文獻(xiàn)

[1]高寧，黨雙鎖，李梅.腸道病毒71型手足口病致神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)病機(jī)制的最新進(jìn)展[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志，2012，6（2）：162-164.

[2]Lin TY，Chang LY，Huang YC，eta1.Different proinflammatory reactions infatal and nonfatal enterovirus infections：implications for early ree-ognition and therapy[J].Aeta Paediatr，2002，91：633-636.

【摘要】目的對(duì)EV71感染重癥病例及健康對(duì)照組患兒進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定及分析，以期能為臨床工作提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法采用流式細(xì)胞儀術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群CD3T淋巴細(xì)胞（%）、CD4T淋巴細(xì)胞（%）、CD8T淋巴細(xì)胞（%）、CD4/CD8比值。結(jié)果EV71重癥重型組較對(duì)照組CD3、CD4、CD8百分比升高； EV71重癥危重型組較其余2組CD3、CD4百分比減低， CD4/CD8比值降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論EV71感染重癥病例細(xì)胞免疫功能存在異常。

【關(guān)鍵詞】EV71感染；外周血淋巴細(xì)胞亞群

【中圖分類號(hào)】R512.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

1. 資料與方法

近幾年來(lái)，EV71感染呈逐年上升趨勢(shì)，其中重癥病例發(fā)病率增高，死亡率及致殘率高，社會(huì)危害極大，已引起社會(huì)各界的高度關(guān)注。為探討機(jī)體免疫功能變化與EV71重癥病例發(fā)病機(jī)制及病情進(jìn)展的關(guān)系，本文對(duì)2011-2013年間收入本院兒童搶救室的62例EV71感染重癥病例進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群分析，現(xiàn)報(bào)道如下：

1.1 一般資料

回顧并收集2011年4月至2013年11月我院兒童搶救室收治的62例EV71重癥病例，將其分為重癥重型組32例、重癥危重型組30例；隨機(jī)抽取28例門診同期健康體檢兒童作為對(duì)照組。其中，重癥重型組男患兒21例，女患兒11例，年齡0.6-6歲，平均2.5±2.2歲；重癥危重型組男患兒20例，女患兒10例，年齡0.9-8歲，平均2.4±2.1歲；對(duì)照組男17例，女11例，年齡0.8-7.1歲，平均2.4±2.3歲。三組間年齡、性別比較無(wú)顯著差異，（P>0.05），無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 診斷依據(jù)：依據(jù)我國(guó)衛(wèi)生部HFMD臨床專家組共同制定的2011版《EV71感染重癥病例臨床救治專家共識(shí)》，62例患兒臨床符合診斷條件，62例患兒均于入院當(dāng)日采集糞便或肛拭子標(biāo)本送本市傳染病醫(yī)院做RT-PCR檢測(cè)，分離出腸道病毒EV71，為實(shí)驗(yàn)室確診EV71感染病例。32例重癥重型患兒中24例行腰椎穿刺檢查，另8例患兒家長(zhǎng)拒絕腰穿， 30例重癥危重型患兒中行腰椎穿刺者11例，另19例患兒因病情危重，未行腰穿檢查。

1.3 臨床表現(xiàn)

除發(fā)熱外，皮疹多不典型，手足等部位皮疹少，部分僅有口腔皰疹，重型患兒表現(xiàn)為嗜睡、意識(shí)障礙、噴射性嘔吐、頭痛、易驚、肢體抖動(dòng)、下肢無(wú)力等，危重型患兒除上述表現(xiàn)外，還伴有頻繁抽搐、昏迷、心率、呼吸增快、呼吸節(jié)律改變、肺水腫、肺出血等。

1.4 臨床轉(zhuǎn)歸及預(yù)后

32例重癥重型患兒中30例臨床治愈（93.8%），2例出現(xiàn)病情進(jìn)展，其中1例發(fā)生肺出血死亡（3.1%），1例家長(zhǎng)放棄（3.1%），30例重癥危重型患兒好轉(zhuǎn)14例（46.7%），其中6例（42.8%）留下不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。家長(zhǎng)放棄治療2例（6.6%），死亡14例（46.7%）。

1.5 試劑及儀器

運(yùn)用流式細(xì)胞儀（來(lái)自美國(guó)BD公司）測(cè)定外周血CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比及CD4/CD8比值。

1.6 方法

外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：所有患兒于入院后當(dāng)天或第二日清晨采靜脈血2mL，運(yùn)用流式細(xì)胞儀術(shù)進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞亞群CD3（%）、CD4（%）、CD8（%）、CD4/CD8比值測(cè)定；

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布及方差齊，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，三組之間比較采用單因素方差分析，兩兩比較，采用LSD-t檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2. 結(jié)果

外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果，如表2所示：

2.1 三組之間CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比CD4/CD8比值測(cè)定，均存在差異（F= 344.408，563.806，57.31，227.111，P均<0.01），具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

2.2 與對(duì)照組相比，EV71重癥重型組CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比均升高（P均<0.01），差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； CD4/CD8比值變化不明顯（P=0.24>0.05）；EV71重癥危重型組CD3、CD4T淋巴細(xì)胞百分比降低（P均<0.01）；CD4/CD8比值降低（P< 0.01），CD8T淋巴細(xì)胞百分比升高（P<0.01），差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

2.3 EV71危重型組同重型組相比，CD3、CD4T淋巴細(xì)胞百分比、 CD4/CD8均減低，（P均< 0.01），差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而兩組之間CD8無(wú)明顯差異（P=0.575>0.05）；表2三組兒童CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比（%）及CD4/CD8比值 比較

3. 討論

EV71感染對(duì)象主要為5歲以下兒童，3歲以下的嬰幼兒為最易受累且重癥人群，發(fā)病率和死亡率均較高，具體原因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，研究表明，除了與EV71病毒本身毒力有關(guān)外，還可能與該年齡段患兒自身免疫狀態(tài)有關(guān)。嬰幼兒免疫系統(tǒng)功能發(fā)育尚不完善，特異性及非特異性免疫功能均低于成人，更易受到外界病原微生物的入侵[1]。

國(guó)內(nèi)外研究顯示，EV71病毒感染與機(jī)體的免疫反應(yīng)密切相關(guān)[2]。 目前能準(zhǔn)確反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的方法是檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群，大量證據(jù)表明：T淋巴細(xì)胞參與并介導(dǎo)了腸道病毒感染后的免疫發(fā)病機(jī)制；正常情況下， CD4 和CD8 T淋巴細(xì)胞作為機(jī)體免疫反應(yīng)最主要的2種效應(yīng)細(xì)胞，維持著機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。CD4對(duì)免疫應(yīng)答發(fā)揮正調(diào)節(jié)作用，增多提示細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，CD8對(duì)免疫應(yīng)答發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用，增多提示細(xì)胞免疫功能抑制；CD4/CD8比值表示輔助性T細(xì)胞（Th）與抑制性T細(xì)胞（Ts）之間功能處于相對(duì)平衡狀態(tài)，是衡量人體免疫系統(tǒng)是否協(xié)調(diào)、是否平穩(wěn)最重要的指標(biāo)，若兩者比值減低，或比值倒置，則標(biāo)志著輔助性T淋巴細(xì)胞功能相對(duì)不足， 細(xì)胞免疫功能減低，且不利于抗體產(chǎn)生，體液免疫功能亦減低，機(jī)體免疫功能出現(xiàn)紊亂。

眾多研究顯示EV71感染致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害患兒細(xì)胞免疫功能低下，表現(xiàn)為CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比減低，而本文研究顯示：EV71重癥重型組CD3、CD4、CD8T淋巴細(xì)胞百分比均較其余2組升高，CD 4/CD8比值波動(dòng)在正常范圍。表明EV71重癥重型患兒中，機(jī)體細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，機(jī)體通過(guò)CD4T細(xì)胞釋放各種細(xì)胞因子發(fā)揮抗感染作用，并通過(guò)CD8殺傷性T細(xì)胞，清除病原體、殺傷靶細(xì)胞，此為機(jī)體為抵抗外界病毒的入侵的正常的保護(hù)性反應(yīng)。此時(shí)CD4/CD8比值不變，表明EV71重型患兒機(jī)體細(xì)胞免疫功能處于協(xié)調(diào)、穩(wěn)定狀態(tài)，能夠維持機(jī)體細(xì)胞免疫功能內(nèi)環(huán)境的平衡。此時(shí)增強(qiáng)的細(xì)胞免疫功能，則有利于宿主抵抗病毒感染，有利于病情恢復(fù)，病情趨于好轉(zhuǎn)或恢復(fù)，臨床中 EV71重癥重型患兒大部分能夠治愈（本文研究中該型腦炎患兒治愈率93.8%），考慮與機(jī)體當(dāng)時(shí)的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)有關(guān)。若病毒數(shù)量多，毒力強(qiáng)，導(dǎo)致病情繼續(xù)進(jìn)展或趨于惡化。本研究顯示EV71重癥危重型患兒CD3T淋巴細(xì)胞百分比、CD4T淋巴細(xì)胞百分比較其余2組均減低，CD8T淋巴細(xì)胞百分比增高，CD4/CD8比值倒置（<1），CD4、CD8正常的比例關(guān)系出現(xiàn)紊亂。表明當(dāng)病情處于危重期時(shí)，機(jī)體細(xì)胞免疫功能出現(xiàn)抑制狀態(tài)，并且機(jī)體免疫功能的平衡狀態(tài)被打破，免疫功能嚴(yán)重紊亂，推測(cè)可能為EV71重癥危重型患兒高死亡率原因之一。

綜上所述，適當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)加用適當(dāng)?shù)募?xì)胞免疫調(diào)節(jié)劑治療EV71重癥病例能否取得一定療效，值得臨床進(jìn)一步推廣驗(yàn)證！

參考文獻(xiàn)

[1]高寧，黨雙鎖，李梅.腸道病毒71型手足口病致神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)病機(jī)制的最新進(jìn)展[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志，2012，6（2）：162-164.

[2]Lin TY，Chang LY，Huang YC，eta1.Different proinflammatory reactions infatal and nonfatal enterovirus infections：implications for early ree-ognition and therapy[J].Aeta Paediatr，2002，91：633-636.