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      新鄉(xiāng)地區(qū)鏈格孢菌病害病原鑒定

      2015-03-28 05:16:13翟鳳艷張柯李娟劉英杰
      關(guān)鍵詞:顯微照片鏈格橫膈膜

      翟鳳艷,張柯,李娟,劉英杰

      (河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003)

      新鄉(xiāng)地區(qū)鏈格孢菌病害病原鑒定

      翟鳳艷,張柯,李娟,劉英杰

      (河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003)

      將在新鄉(xiāng)地區(qū)采集的鳶尾、國槐、玉米、紅葉李、黃豆、豆角、白蠟樹、芙蓉、刺槐、竹子10種植物的鏈格孢菌發(fā)病葉片標(biāo)本,在室內(nèi)制作成臨時(shí)玻片,通過對病原菌形態(tài)進(jìn)行顯微觀察,并觀察和描述癥狀特征、測量梗及孢子大小,結(jié)合文獻(xiàn)的查閱和分析,鑒定10種植物上的鏈格孢屬病原菌.鑒定結(jié)果表明:10種植物上的鏈格孢屬病原菌分別為鳶尾生鏈格孢、細(xì)極鏈格孢、小麥鏈格孢、杏鏈格孢、黑鏈格孢、長喙鏈格孢、連翹鏈格孢、錦葵鏈格孢、豆鏈格孢、稻鏈格孢.

      鏈格孢屬;病害;病原;鑒定

      鏈格孢菌(Alternaria spp.)是一類極為常見的分生孢子真菌,對生態(tài)環(huán)境和基質(zhì)有著極強(qiáng)的適應(yīng)性.鏈格孢菌侵害的目標(biāo)主要是植物[1],如馬鈴薯早疫病、梨黑斑病、煙草赤星病(褐斑病)等都是由鏈格孢屬真菌侵染引起的.此外,鏈格孢還可以引發(fā)橘子、蘋果、梨等水果發(fā)生腐霉病.在全世界的鏈格孢種級分類單位中,95%以上的鏈格孢種類兼性寄生于植物上[2],致使發(fā)生多種病害,常給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成重大損失.據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),截止到目前,全世界已經(jīng)發(fā)表的鏈格孢菌種約500個(gè),而且仍然有新種不斷發(fā)表[3].作者通過對采集于新鄉(xiāng)地區(qū)的植物病害標(biāo)本進(jìn)行顯微觀察、描述癥狀特征、測量梗及孢子大小,結(jié)合文獻(xiàn)的查閱和分析,鑒定出10種鏈格孢屬病原菌,為預(yù)防、控制由鏈格孢引起的植物病害的發(fā)生奠定了基礎(chǔ).

      1 材料與方法

      1.1 供試材料

      鳶尾(Iris tectorum Maxim.)、國槐(Sophora japonica Linn.)、玉米(Zea mays L.)、紅葉李(Prunus cerasifera Ehrh.)、黃豆(Glycine max(L)Merrill)、豆角(Phaseolus vulgaris L.)、白蠟樹(Fraxinus chinensis Roxb.)、芙蓉(Hibiscus mutabilis Linn.)、刺槐(Robinia pseudoacaciaL.),竹子(Dracaena sanderianaL.).

      1.2 試驗(yàn)方法

      選取病害標(biāo)本,在病健交界處用刀片切取兩片邊長0.5 cm的病組織塊;按照左正右反的原則(左邊葉片正面朝上,右邊葉片反面朝上)放至在干凈的載玻片上;每塊組織塊上滴幾滴乳酚油,蓋上蓋玻片;點(diǎn)燃酒精燈,把載玻片放在酒精燈的外焰上進(jìn)行加熱,加熱到葉片呈半透明狀態(tài)為止;放涼后在顯微鏡下觀察,并結(jié)合文獻(xiàn)資料進(jìn)行病原鑒定.

      2 結(jié)果與分析

      2.1 鳶尾生鏈格孢(Alternaria iridicola)

      葉上病斑圓形或近圓形,中間淡黃色,邊緣顏色較深為黑褐色病斑嚴(yán)重時(shí)可脫落.子實(shí)體可在葉片病斑的正反兩面著生.分生孢子單生或著短鏈生狀,顏色黃褐色,呈倒棒狀,具有5~9個(gè)橫膈膜,3~7個(gè)縱、斜隔膜,孢身長47.0~87.0 μm,寬15.0~27.0 μm.分生孢子梗大多為簇生,直立或彎曲狀,顏色為淺褐色,長在33.0~85.0 μm之間,寬在5.0~8.0 μm之間.喙呈柱狀,顏色淡,具有分隔,喙長20.0~70.0 μm,寬2.5~4.5μm.寄主:鳶尾(Iris tectorum Maxim.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖1.

      圖1 鳶尾生鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.1 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria iridicola

      2.2 細(xì)極鏈格孢(Alternaria tenuissima)

      葉上病斑圓形或橢圓形,淡黃色或黃褐色.分生孢子單生或短鏈生狀,顏色黑褐色,呈近橢圓形或卵圓形、倒棍棒狀,具有4~7個(gè)橫膈膜或者半橫膈膜,1~6個(gè)縱、斜隔膜,孢身長29.0~45.0 μm,寬12.0~15.5 μm,最長可達(dá)51.0 μm,最寬可達(dá)16.0 μm.分生孢子梗單生或幾根簇生,略彎或者直立狀,顏色為淺褐色,偶爾具有分枝,基部稍微膨大,長在26.5~65.0 μm之間,寬4.0~5.5 μm之間.喙呈柱狀,顏色淡褐色,具有分隔,喙長5.0~34.5 μm,寬3.0~4.5 μm,具有假喙,部分假喙的產(chǎn)孢基部略膨大.寄主:國槐(Sophora japonicaLinn.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖2.

      圖2 細(xì)極鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.2 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria tenuissima

      2.3 小麥鏈格孢(Alternaria triticina)

      葉上病斑長橢圓形或者卵形,淡黃色,病斑上可形成黑色霉層,病害嚴(yán)重時(shí)可以連成一個(gè)大的不規(guī)則形狀的大病斑.子實(shí)體主要著生在葉片病斑的正面.分生孢子單生或短鏈生狀,顏色褐色,呈橢圓形或者卵形,具有3~7個(gè)橫膈膜,1~6個(gè)縱、斜隔膜,中間部分常具有1個(gè)或2個(gè)加厚并且顏色較深的隔膜,孢身長25.0~45.5 μm,寬13.0~20.5 μm.分生孢子梗單生或者幾根簇生,直立或者略微彎曲,顏色為淺褐色或褐色,偶分枝或不分枝,具有分隔,長在39.5~86.5 μm之間,寬在3.5~5.5 μm之間.一般無喙,偶爾具有柱狀的假喙,喙長4.5~18.0 μm,寬3.5~4.5 μm.寄主:玉米(Zea mays L.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖3.

      圖3 小麥鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.3 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria triticina

      2.4 杏鏈格孢(Alternaria armeniacae)

      葉上病斑圓形或橢圓形,白色,病斑上具有黑色霉層,病斑可相互愈合形成不規(guī)則形狀的大病斑.果實(shí)上病斑初期出現(xiàn)不規(guī)則形狀,紅色小斑點(diǎn),隨著果實(shí)不斷膨大病斑亦逐漸擴(kuò)大,且顏色不斷加深,最后形成圓形或橢圓形的不規(guī)則形黑色的病斑.病斑在充分成熟的果實(shí)上可深及果肉,凹陷,上面著生黑色霉層,為病菌的子實(shí)體.在果實(shí)的病鍵交界處龜裂,流膠.分生孢子單生或短鏈生狀,顏色淡黃褐色至黃褐色,呈倒棒狀或者卵圓形,具有3~6個(gè)橫膈膜,0~3個(gè)縱、斜隔膜,孢身平均長28.7 μm,寬10.6 μm,具有分隔,分生孢子的分隔處具有不明顯的隘縮.分生孢子梗大多數(shù)為單生,直立或稍微彎曲,顏色為淺褐色,在上部偶爾分枝或不分枝,具有分隔,長在51.5~106.5 μm之間,寬在3.5~4.5 μm之間.分生孢子一般無喙,頂細(xì)胞有孢孔,次生產(chǎn)孢,或者稍微延伸形成具有1~2個(gè)細(xì)胞的假喙.假喙顏色極淺接近無色,喙長在2.5~10.0 μm之間,寬在3.0~4.0 μm之間,極少數(shù)假喙可以合軸延伸,并且具有孢痕.寄主:紅葉李(Prunus cerasifera Ehrh.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖4.

      圖4 杏鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.4 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria armeniacae

      2.5 黑鏈格孢(Alternaria atrans)

      葉上病斑圓形或者近圓形,中間淺褐色,邊緣具有深褐色暈圈,不產(chǎn)生霉層,病斑可相互愈合形成一個(gè)不規(guī)則的大病斑.子實(shí)體在葉片病斑的正反兩面著生.分生孢子單生或短鏈生狀,顏色為褐色,呈闊倒棒狀或者倒梨形,具有3~7個(gè)橫膈膜,1~4個(gè)縱、斜隔膜,孢身長23.0~44.5 μm,寬11.0~19.0 μm.分生孢子梗單身或幾根簇生,直立或屈膝狀彎曲,顏色為黃褐色,偶分枝,具有孢痕,有分隔,長在29.0~62.0 μm之間,寬在3.5~5.5 μm之間.具有真(假)喙,喙長7.0~23.0 μm,寬2.5~4.0 μm.寄主:黃豆[Glycine max(L) Merrill].寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖5.

      圖5 黑鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.5 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria atrans

      2.6 長喙鏈格孢(Alternaria longirostrata)

      葉片病斑近圓形,中間灰褐色,邊緣顏色較深為褐色,嚴(yán)重時(shí)病斑脫落,形成小洞.子實(shí)體在葉片病斑的正反兩面著生,正面居多,產(chǎn)生大量的分生包子梗和分生孢子.分身孢子單生,顏色為褐色,呈倒棒狀至卵圓形,基部鈍圓,具有5~10個(gè)橫膈膜,1~5個(gè)縱、斜隔膜,孢身長45.0~76.5 μm,寬14.5~21.5 μm,平均長60.5 μm,寬17.4 μm,孢子主分隔處有稍微的隘縮,表面光滑,孢子上部1/4處至頂端部分逐漸變細(xì),最后過渡為喙.分生孢子梗直立或稍微彎曲,顏色為褐色,極少數(shù)少分枝,梗的上部分呈合軸延伸,呈屈膝狀彎曲,具有分隔,長在60.0~155.5 μm之間,寬在4.5~6.0 μm之間.具細(xì)長的絲狀喙,淡褐色至近無色,喙平均長180.5 μm,寬2.0 μm.寄主:豆角(Phaseolus vulgaris L.)寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖6.

      圖6 長喙鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.6 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria longirostrata

      2.7 連翹鏈格孢(Alternaria forsythiae)

      葉上病斑近圓形或者不規(guī)則形,稍凹陷,灰褐色,葉片背面的病斑深褐色.子實(shí)體主要著生在葉片病斑的背面.分生孢子形成短鏈或者單生,顏色最淺淺褐色,最深褐色,呈倒棒狀、卵圓形或近橢圓形,具有3~7個(gè)橫膈膜,0~5個(gè)縱、斜隔膜,孢身長34.0~50.0 μm,寬10.0~17.0 μm,孢子的分隔處稍微隘縮,部分孢子的橫隔顏色加深至深褐色.分生孢子梗單生或者簇生,直立或者彎曲,顏色為褐色,具有分隔,孢子梗上部具有1個(gè)到數(shù)個(gè)的孢痕,長在18.0~61.0 μm之間,寬在4.0~5.0 μm之間.無喙或者具有柱狀短喙,喙長0~27.0 μm,寬3.0~4.0 μm.寄主:白蠟樹(Fraxinus chinensis Roxb.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖7.

      圖7 連翹鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.7 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria forsythiae

      2.8 錦葵鏈格孢(Alternaria malvae)

      葉上生出不規(guī)則形大病斑,深褐色,具有霉層,嚴(yán)重時(shí)病斑可布滿整個(gè)葉片,病斑易脫落.子實(shí)體主要著生在葉上病斑的正面.分生孢子單生或者短鏈生狀,顏色青褐色,呈橢圓形、卵形或者倒梨形,具有3~7個(gè)橫膈膜,0~6個(gè)縱、斜隔膜,孢身長28.5~43.5 μm,寬10.0~19.5 μm.分生孢子梗單生或者簇生,直立或者屈膝狀彎曲,顏色為淡褐色,具有分隔,不分枝,長在45.5~207.5 μm之間,寬在4.5~7.0 μm之間.具有柱狀的喙,有假喙,通常假喙頂部膨大,顏色淡褐色,具有分隔,喙長0~25.5 μm,寬4.0~5.5 μm.寄主:芙蓉(Hibiscus mutabilis Linn.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖8.

      圖8 錦葵鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.8 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria malvae

      2.9 豆鏈格孢(Alternaria azukiae)

      葉上病斑橢圓形或近圓形,赤褐色,后期病斑中央灰白色.分生孢子單生或者短鏈生狀,顏色暗褐色,呈倒棒狀至卵形,具有4~7個(gè)橫膈膜,1~5個(gè)縱、斜隔膜,孢身長37.0~55.0 μm,寬10.5~17.0 μm(包括喙的長度).分生孢子梗單生或者簇生,直、直立或者屈膝狀彎曲,顏色為褐色,具有分隔,著生有1至數(shù)個(gè)孢痕,長在33.5~78.5 μm之間,寬在4.5~6.0 μm之間.具有柱狀的喙或者無喙,顏色淡褐色.寄主:刺槐(Robinia pseudoacacia L.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖9.

      圖9 豆鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.9 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria azukiae

      2.10 稻鏈格孢(Alternaria oryzae)

      葉上病斑近圓形或不規(guī)則形,褐色,嚴(yán)重時(shí)可危害整個(gè)葉面,病斑上著生黑色霉層.子實(shí)體著生在葉片病斑的正面.分生孢子單生或形成短鏈狀,顏色為褐色至深褐色,呈長橢圓形、廣梭形、卵形、倒棒形,具有4~7個(gè)橫膈膜,2~9個(gè)縱、斜隔膜,分隔處隘縮,成熟的老孢子隘縮明顯,并且孢子中部有一至數(shù)個(gè)顏色加深加厚的橫隔.分生孢子梗單生或者簇生,直立或者彎曲,顏色為褐色,越向上顏色越淡,具有分隔,著生有1至數(shù)個(gè)孢痕,基部稍微膨大,長在21.5~95.0 μm之間,寬在4.0~5.5 μm之間.無喙或有假喙,喙長26.5~55.0 μm,寬11.0~18.0 μm.寄主:竹子(Dracaena sanderiana L.).寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖見圖10.

      圖10 豆鏈格孢寄主發(fā)病癥狀、病原顯微照片及形態(tài)圖Fig.10 Symptom on host,micrograph and morphological illustration of Alternaria oryzae

      3 結(jié)論與討論

      試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)鏈格孢類病原菌對多變的環(huán)境條件和營養(yǎng)基質(zhì)的適應(yīng)性極強(qiáng),大多數(shù)寄生或腐生于植物葉片、果實(shí)、種子及其他組織上,迅速侵染植物并形成病斑.病斑多呈圓形或近圓形,常具有深色輪紋,并且具有暗色霉層.鏈格孢菌病害的發(fā)生和流行給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了重大的損失,本試驗(yàn)通過組織透明法鑒定出以上10種病害的病原,對寄主的發(fā)病癥狀、孢子形態(tài)特征等進(jìn)行了研究,并顯微繪制了這10種病原的病原形態(tài)圖,為防治該病原引起的病害奠定了一定的基礎(chǔ).

      [1]崔迪,王繼華,陳捷,等.鏈格孢真菌對農(nóng)作物的危害[J].哈爾濱師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào),2005,21(4):88-89.

      [2]王娜,楊鎮(zhèn),楊濤.一株促植物生長鏈格孢真菌培養(yǎng)基優(yōu)化的研究[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué),2012(3):22-24.

      [3]張?zhí)煊?中國真菌志:第十六卷鏈格孢屬[M].北京:科學(xué)出版社,2003.

      (責(zé)任編輯:鄧天福)

      Identification of pathogens in Xinxiang area

      ZHAI Fengyan,ZHANG Ke,LI Juan,LIU Yingjie
      (Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang 453003,China)

      10 kinds of diseased plant leaves,Iris tectorum Maxim.,Sophora japonica,Zea mays,Prunus cerasifera, Glycine max,Phaseolus vulgaris,Fraxinus chinensis,Hibiscus mutabilis,Robinia pseudoacacia,Dracaena sanderiana, collected from Xinxiang area,were made into temporary slides indoors.Through the study of the microscopic observation of morphological characteristics of the pathogens,and the observation and description of the disease symptoms,measurement of the size of the spores and conidiophores,combining with literature review and analysis,10 kinds of Alternaria pathogenic fungi were identified,Alternaria iridicola,A.tenuissima,A.triticina,A.armeniacae,A. atrans,A.longirostrata,A.forsythiae,A.malvae,A.azukiae,A.oryzae.

      Alternaria;disease;pathogen;identification

      Q949.32

      :A

      :1008-7516(2015)05-0030-06

      10.3969/j.issn.1008-7516.2015.05.007

      2015-07-13

      國家自然科學(xué)基金(31100013)

      翟鳳艷(1978―),女,吉林省吉林市人,博士,副教授.主要從事植物病原真菌系統(tǒng)分類學(xué)研究.

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